SARS-Cov-2 ayaa ka takhalusidda xirmada antibody-ka (Elisa)
【Mabda】
SARS-Cov-2 ayaa ka takhalusidda xirmada antibodyfy-ka waxay ku saleysan tahay habka loo tartamayo ELISA.
Adoo adeegsanaya soo-damiska lagu daahiriyey domain-ka (RBD), borotiinka ka socda protein (s) borotiinka viruska iyo unugyada martida loo yahay
ACEPTER ACECE2, Imtixaankan waxaa loogu talagalay in lagu yareeyo martigalinta fayraska-curyaaminta is-dhexgalka.
Kalabuts, kontaroolada tayada leh, iyo serum ama shaandhada plasma ayaa si gaar ah loogu dhex qabaa si wanaagsan
Buffer oo ay kujiraan hace2-hrp conjugate ayaa lagu xusay tuubooyin yaryar. Markaas isku-darka ayaa lagu wareejiyaa
Ceelasha Microplate-ka oo ay kujiraan dib-u-xubinta Sambaha-Samafalka-2-da
suuxdin. Intii lagu gudajiray 30-ka daqiiqo gudahood, RBD gaar ahaaneed ee ka hortagga calibrirs, QC iyo
Saamballada ayaa la tartami doona HAC2-HRP si loogu habeeyo wax ku ool ah oo ku saabsan rbd-ka si xun looguma dajiyay ceelasha. Ka bacdi
Elleynta, ceelasha waxaa lagu maydhay 4 jeer si looga saaro xawaashka loo yaqaan '22-hrp conjugate '. Xalka
TMB ayaa markaa lagu daray oo lagu soo dayaa 20 daqiiqo heerkulka qolka, taasoo dhalisay horumarka a
midab buluug ah. Kobcinta midabka waxaa lagu joojiyaa ku darista 1nka HCL, oo caabbirka waa
Waxaa lagu cabiray si muuqata u ah 450 nm. Xoogga midabka la sameeyay ayaa u dhigma
Caddadka enzyme jooga, oo si muuqata u laxiriira xaddiga heerarka si isku mid ah.
Iyada oo loo eegayo qalooca qafiifka ah ee ay sameeyeen dhallaanka la siiyay, uruurinta
Isu-takoorka unugyada ka hortagga ah ee unugyada aan la aqoon ayaa markaa la xisaabiyaa.
【Qalabka loo baahan yahay laakiin lama bixin】
1. Biyo qudhun oo laga adkaaday
2. Saxeex sax ah: 10μl, 100μl, 200μl iyo 1 ml
3. Tilmaamaha tuubada tuurista
4. Akhristaha Microplate ee Akhriska Akhriska ka maqnaanshaha 450m.
5. Waraaq gariir ah
6. Waraaqda garaafka
7. Isku-darka vortex ama u dhigma
【Qalabka muujinta iyo kaydinta】
1. Suruuraha Plasma iyo Plasma ayaa laga soo aruuriyay tuubooyinka ay ku jiraan K2-Edta loo isticmaali karo xirmadaan.
2. Muunosku waa inuu ahaadaa mid lagu keydin karaa ilaa 48 saacadood gudahood 2 ° C - 8 ° C ka hor intaan la dhisin.
Muunadaha la qabto waqti dheer (illaa 6 bilood) waa in la qaboojiyaa hal mar oo hal mar ah oo ah -20 ° C ka hor Assay.
Iska ilaali wareegga dheecaanka-soo noqnoqda ee soo noqnoqda.
Borotomitol
【Diyaarinta Reagent】
1. Dhammaan regoobaadda waa in laga saaraa qaboojiyaha oo loo oggol yahay inay ku noqdaan heerkulka qolka ka hor inta aan la isticmaalin
(20 ° 25 ° C). Ku keydi dhammaan reagends qaboojiyaha si dhakhso leh ka dib isticmaalka.
2. Dhammaan samballada iyo kontaroolada oo dhan waa in la joojiyaa ka hor isticmaalka.
3. Diyaarinta Xalka HAE2-HRP Diyaarinta
Xashiishka. Tusaale ahaan, milo ah 100 μl of Houstra2-HRP waxay ka dhigeysaa 5.0ml oo ka mid ah xaraashka hrp
Samee xalka HAC2-HRP.
4. 1 × 3 × × Diyaarinta xalka: Ku milo 20 × xalka ku maydh biyo-u-dhafka ama biyo-mareenka leh a
Cabbirka mugga ee 1:19. Tusaale ahaan, ku milo 20 ml oo ah 20 × qiyaastii xalka ah oo leh 380 ml oo loo dejiyo ama
Biyaha durugsan si ay u sameeyaan 400 ml oo ah 1 × × Fasal Xol.
【Nidaamka imtixaanka】
1. Tuubbooyinka kala duwan, Alipe 120μL oo ah xalka HEAC2-HRP ee loo diyaariyey.
2. Ku dar 6 μl oo ah wax lagu caleemo, samballo aan la aqoon, kontorool tayo leh oo tuubbo kasta iyo si wanaagsan isku dara.
3. Ku wareejinta 100μL oo isku dhafka ah ee isku darka ah ee loo diyaariyey tillaabada 2 ee ku habboon ceelasha microplate-ka sida
si loo yareeyo qaabeynta tijaabada.
3. Ku dabool saxanka dabool leh shaashad shaashad ah oo ku dar 37 ° C 30 daqiiqo.
4. Ka saar saxanka saxanka oo ku nadiifi saxanka qiyaastii 300 μl oo ah 1 × 1 × × xalka sineerkiiba afar jeer.
5. Taabo saxanka tuwaal warqad ah si aad uga saarto dareeraha haraaga ah ceelasha ka dib tallaabooyinka lagu dhaqo.
6. Ku dar 100 μl oo ah xalka TMB ee ceel kasta oo ku dhex dar saxan mugdi ah 20 - 25 ° C 20 daqiiqo.
7. Ku dar 50 μL oo xalka istaag si wanaagsan si loo joojiyo fal-celinta.
8. Akhri caqabadda ku jirta akhristaha microplate ee 450 nm 10 daqiiqo gudahood (630m gudahood)
lagula taliyo waxqabadka saxda ah).