Xirmada ogaanshaha Asiidhka Nukliyeerka (MPV).

Xirmada ayaa ka kooban reagenyaal lagu farsameeyo 48 tijaabo ama ilaalinta tayada, oo ay ku jiraan qaybaha soo socda:

Reagent A

ReagentB

Xusuusin: Qaybaha nambarada dufcadaha kala duwan looma isticmaali karo si isku beddelasho ah

【Xaaladaha Kaydinta iyo Nolosha shelf】

1.Reagent A/B waxa lagu kaydin karaa 2-30°C, nolosha shelfina waa 10 bilood.

2. Fadlan fur daboolka tuubada tijaabada kaliya marka aad diyaar u tahay baaritaanka.

3.Ha isticmaalin tuubooyinka tijaabada wixii ka dambeeya taariikhda dhicitaanka.

4.Ha isticmaalin tuubo ogaanshaha soo daadanaya.

【Qalabka lagu dabaqi karo】

Ku habboon nidaamka falanqaynta PCR LC480, Gentier 48E Nidaamka falanqaynta PCR ee tooska ah, nidaamka falanqaynta PCR ABI7500.

【Shuruudaha Tusaalaha】

1. Noocyada muunad ee lagu dabaqi karo: muunadaha suufka cunaha.

2.Sampling xal:Xaqiijinta ka dib, waxaa lagu talinayaa in la isticmaalo milix caadi ah ama tuubada ilaalinta fayraska ee ay soo saartay Hangzhou Testsea bayoloji si muunada loo qaado.

dhuunta dhuunta:ku tirtir qumanka qanjidhada laba geesoodka ah iyo gidaarka pharyngeal ee dambe adigoo isticmaalaya suuf muunad nadiif ah oo la tuuri karo, dhex geli suufka tuubada uu ka kooban yahay 3ml muunad, iska tuur dabada, oo adkee daboolka tuubada.

3.Sample kaydinta iyo keenista:Muunada la tijaabinayo waa in la tijaabiyaa sida ugu dhakhsaha badan.Heerkulka gaadiidka waa in lagu hayaa 2~8℃ ilaa -70 ℃ (haddii aysan jirin xaalad kaydinta -70 ℃, waxaa lagu kaydin karaa -20 ℃ si ku meel gaar ah), iska ilaali soo noqnoqda

qaboojin iyo dhalaalid.

4.Ururinta muunada saxda ah, kaydinta, iyo gaadiidka ayaa muhiim u ah waxqabadka alaabtan.

【Habka Imtixaanka】

1.Sample processing iyo muunad ku darista

1.1 Sambalka habaynta

Ka dib marka lagu qaso muunada sare ee muunado, qaado 30μL oo muunada ah tuubada reagent ee DNA-ga oo si siman isku qas.

1.2 Soodejinaya

Qaado 20μL ee reagent dib-u-dhiska oo ku dar reagent MPV-ga, ku dar 5μL ee muunada kor ku xusan ee la farsameeyay (Kontoroolka togan iyo kan taban waa in si la mid ah shaybaarada loo habeeyo), dabool daboolka tuubada, sentrifuge 2000rpm 10 ilbiriqsi

2. Kordhinta PCR

2.1 Ku shub saxanka PCR/tubooyinka diyaarsan ee qalabka PCR-ga ee fluorescence, xakamaynta xun iyo xakamaynta togan waa in loo dejiyaa imtixaan kasta.

2.2 Dejinta kanaalka fluorescent:

1) Dooro kanaalka FAM ee ogaanshaha MPV;

2) Dooro kanaalka HEX/VIC si aad u ogaato hidda-wadaha kontoroolka gudaha;

3.Natiijooyinka falanqaynta

Ka dhig xariiqda saldhiga ka sareeysa meesha ugu sarreysa ee kantaroolka taban ee qalooca fluorescent.

4.xakamaynta tayada

4.1 Xakamaynta taban: Wax qiime ah lagama helin FAM, kanaalka HEX/VIC, ama Ct＞40;

4.2 Xakamaynta wanaagsan: gudaha FAM, kanaalka HEX/VIC, Ct≤40;

4.3 Shuruudaha kor ku xusan waa in lagu qanco isla tijaabadaas, haddii kale natiijadii imtixaanku waa khaldan yihiin oo tijaabada ayaa loo baahan yahay in lagu celiyo.

【Qiimaha goo】

Muunad waxa loo tixgalinayaa mid togan marka: Taxanaha bartilmaameedka Ct≤40, Hidde-sidaha xakamaynta gudaha Ct≤40.

【Natiijooyinka fasiraada】

Marka xakamaynta tayada la dhaafo, isticmaalayaashu waa inay hubiyaan haddii uu jiro qalooca kor u qaadida muunad kasta oo ku yaal kanaalka HEX/VIC, haddii uu jiro iyo Ct≤40, waxay muujisay hidda-wadaha kontoroolka gudaha si guul leh loo xoojiyay tijaabadan gaarka ahna waa ansax.Isticmaalayaashu waxay sii wadi karaan falanqaynta dabagalka:

3.Samballada leh kordhinta hidda-socodka xakamaynta gudaha ayaa fashilmay (HEX/VIC

kanaalka, Ct＞40, ama qalooca kor u qaadis la'aan), culeyska fayraska hooseeya ama jiritaanka PCR inhibitor waxay noqon kartaa sababta guuldarada, baaritaanka waa in lagu celiyaa ururinta muunada;

4.Samballada togan iyo fayras dhaqameed, natiijooyinka xakamaynta gudaha ma saameeyaan;

Shaybaarada laga baaro diidmada, kontoroolka guduhu wuxuu u baahan yahay in la tijaabiyo si togan haddii kale natiijadu guud ahaan waa buray oo baadhistu waxay u baahan tahay in lagu celiyo, laga bilaabo tallaabada ururinta muunada.