Ma SAR-COV-2 Onerraction Antibody Oneder Countration Kit (Elisa)
】Maganizo】
Ma SARS-COV-2 ogwiritsa ntchito dibodrady antibody sodiction yakhazikitsidwa ndi njira yopikisana elisa.
Kugwiritsa ntchito zoyera zoyera (RBD), mapuloteni kuchokera ku mapuloteni a viral (s) ndi selo
Kulandilidwa kwa Ace2, kuyesaku kwakonzedwa kuti zigwirizane ndi mgwirizano womwe ukulowererapo.
Magibibutor, zowongolera zapamwamba, ndipo seramu kapena zitsanzo zama plasma zimasakanikirana bwino payekha
Buffer okhala ndi hace2-hrp conjugate okonzedwa m'machubu ochepa. Kenako zosakanikirazo zimasamutsidwa mkati
Zitsime za Microplate zomwe zili ndi zobwezeretsera zobwezeretsedwanso SARS-COV-2 RBD Pragment (RBD) ya
makulidwe. Pakati pa mphindi 30
Zitsanzo zimapikisana ndi tsitsi la Hace2-HRP lachindunji la RBD osinthika pamavuto. Patsogolo
Kuunika, zitsime zimasambitsidwa kasanu kuti zichotse hace2-hrp conjugate. Yankho la
TMB kenako ndikuwonjezeredwa ndi mphindi 20 kutentha kwa firiji, zomwe zimapangitsa kuti a
mtundu wabuluu. Chitukuko cha utoto chimayimitsidwa ndi kuwonjezera kwa 1N hcl, ndipo kulowetsedwa kuli
kuyeza kowoneka bwino pa 450 nm. Kukula kwa utoto komwe kumapangidwa ndi kofanana ndi
kuchuluka kwa enzyme pakalipano, ndipo kumagwirizana ndi kuchuluka kwa kuchuluka kwa miyezo yomwe inasindikizidwa chimodzimodzi.
Kupatula kufanizira ndi ma cubhibration opangidwa ndi ma calibrators, kupsinjika kwa
Kutenga ma antibodies mu chitsanzo chosadziwika kumawerengeredwa.
】Zida zofunika koma sizinaperekedwe】
1. Madzi osungunuka kapena owongoka
2. Mapaipi onena: 10μL, 100μl, 200. ch- ml
3. Malangizo otayika
4.
5. Pepala loyandikana
6. Pepala la graph
7. Kusakaniza kwa vortex kapena zofanana
】Kutolera mwachidule ndi kusungidwa】
1. Seramu ndi plasma zitsanzo zomwe zimasonkhanitsidwa m'machubu okhala ndi K2-Edta zitha kugwiritsidwa ntchito pochita izi.
2. Zolingalira ziyenera kuti zizisungidwa ndipo zitha kusungidwa kwa maola 48 pa 2 ° C - 8 ° C Peltur.
Zoyesa zomwe zimachitika nthawi yayitali (mpaka miyezi 6) ziyenera kukhala zozizira kamodzi kokha ku -20 ° C asanalowe.
Pewani kuzungulira kwaulere-thaw.
Plapulocol
】Kukonzekera Kwakukulu】
1. Ma reagents onse ayenera kuchotsedwa kuchokera ku firiji ndikuloledwa kubwerera ku kutentha kwa chipinda musanagwiritse ntchito
(20 ° mpaka 25 ° C). Sungani ma reagent onse mu firiji mwachangu mutatha kugwiritsa ntchito.
2. Zitsanzo zonse ndi zowongolera ziyenera kukhala zochokera musanagwiritse ntchito.
3.
Buffer. Mwachitsanzo, kuchepetsa 100 μl ya hace2-hrp yikani ndi 5.0ml ya hrp dilfder
Pangani yankho la Hace2-HRP.
4. 1 × 1 × forn Kukonzekera: kuchepetsa yankho la 20
chiwerengero cha voliyumu ya 1:19. Mwachitsanzo, kuchepetsa 20 ml ya 20 × yotsuka ndi 380 ml ya zojambula kapena
Madzi osungunuka kuti apange 400 ml ya 1 × yosambitsa.
】Njira Yoyeserera】
1. Mu machubu osiyana, alliquot 120μL ya okonzedwa hace2-hrp yankho.
2. Onjezani 6 μl wa calibratoni, zitsanzo zosadziwika, zowongolera zapamwamba mu chubu chilichonse ndikusakaniza bwino.
3. Sinthani 100μl iliyonse yosakaniza mu sitepe 2 mu malo olinga chofananira m'malo molingana ndi
Kugawirana koyeserera.
3. Valani mbaleyo ndi mbale yoyala ndi incurute pa 37 ° C kwa mphindi 30.
4. Chotsani panyanjayo ndikusamba mbaleyo ndi pafupifupi 300 μl ya 1 μl ya 1 × sambani yankho pachitsime kanayi.
5. Dinani mbale papepala la pepala kuti muchotse madzi otsalira mu zitsime mutatsuka.
6. Onjezerani 100 μl yankho la chitsime aliyense pa chitsime chilichonse ndikulowetsa mbale mumdima nthawi 20 - 25 ° C kwa mphindi 20.
7. Onjezani 50 μl ya kuletsa yankho la chitsime chilichonse kuti aletse zomwezo.
8. Werengani kuyamwa kwa owerenga microplate pa 450 nm mkati mwa mphindi 10 (630nm monga chowonjezera
akulimbikitsidwa kuti azichita bwino kwambiri).