猴痘病毒（MPV）核酸检测试剂盒

该试剂盒包含用于处理 48 项测试或质量控制的试剂，包括以下组件：

试剂A

试剂B

注：不同批号的组件不能互换使用

【储存条件和保质期】

1.试剂A/B可在2-30℃保存，保质期为10个月。

2.请在准备测试时才打开试管盖。

3.请勿使用超过有效期的试管。

4.请勿使用泄漏检测管。

【适用仪器】

适用于 适用于LC480 PCR分析系统、Gentier 48E自动PCR分析系统、ABI7500 PCR分析系统。

【样品要求】

1.适用样品类型：咽拭子样本。

2、取样溶液：经核实，建议使用杭州测海生物生产的生理盐水或病毒保存管进行样本采集。

咽拭子：用一次性无菌采样拭子擦拭双侧咽扁桃体及咽后壁，将拭子浸入盛有3mL采样液的试管中，弃尾，旋紧管盖。

3.样品储存及交付：待测样品应尽快进行检测。运输温度应保持在2~8℃。24小时内能检测的样品可在2℃~8℃保存，如果24小时内不能检测的样品应保存在≤至-70℃（如无-70℃储存条件，可暂存于-20℃），避免重复

冷冻和解冻。

4.正确的样品采集、储存和运输对于本产品的性能至关重要。

【测试方法】

1.样品处理及加样

1.1 样品处理

将上述进样液与样品混合后，取30μL样品放入DNA释放试剂管中，混匀。

1.2 加载

取复溶试剂20μL加入MPV检测试剂中，加入上述处理过的样品5μL（阳性对照和阴性对照与样品平行处理），盖上管盖，2000rpm离心10次。秒。

2. PCR 扩增

2.1 将准备好的PCR板/管装入荧光PCR仪中，每次检测均设置阴性对照和阳性对照。

2.2 荧光通道设置：

1)选择FAM通道进行MPV检测；

2)选择HEX/VIC通道进行内参基因检测；

3.结果分析

将基线设置在阴性对照荧光曲线最高点上方。

4.质量控制

4.1 阴性对照：FAM、HEX/VIC通道未检测到Ct值，或Ct＞40；

4.2 阳性对照：FAM、HEX/VIC通道中，Ct≤40；

4.3 在同一次试验中应满足上述要求，否则试验结果无效，需重复试验。

【截止值】

当目标序列Ct≤40、内参基因Ct≤40时，样品被认为是阳性。

【结果解读】

一旦质控通过，用户应检查HEX/VIC通道中每个样本是否有扩增曲线，如果有且Ct≤40，则表明内参基因扩增成功，本次测试有效。用户可以进行后续分析：

3.对于内参基因扩增失败的样品（HEX/VIC

通道，Ct>40，或无扩增曲线），病毒载量低或PCR抑制剂的存在可能是失败的原因，应从标本采集中重复检查；

4.对于阳性样本和培养病毒，内控结果不影响；

对于检测结果为阴性的样品，需要内控检测为阳性，否则整体结果无效，需要从标本采集步骤开始重复检测