Sars-Cover-2 distrarin antibody awari ohun elo (Eliasa)
【Ipilẹ-oye】
Kirs-Coar-2 disramizing antibow Irisi Iduroṣinṣin da lori Iṣeduro Erisa.
Lilo gbigbasilẹ ti a wẹ mimọ (RBD), amuaradagba lati olukọ (s)
Gba gbigba ACCE2, idanwo yii jẹ apẹrẹ lati mimic awọn ọlọjẹ ti ko ni akojọpọ ibaraenisọrọ.
Awọn calibrators, awọn iṣakoso didara, ati awọn ayẹwo pilasima ti wa ni irọrun daradara ni didi
Buffere ti o ni hoce2-HRP conjuutate bi awọn iwẹ kekere. Lẹhinna awọn apopọ ti wa ni gbigbe sinu
Awọn microplate awọn kanga ti o ni imunblized scur-125-2 rbd pogment (RBD) fun
abeabo. Lakoko akoko iṣẹju 30, apakokoro RBD kan pato ninu awọn calibrators, QC ati
Awọn ayẹwo yoo dije pẹlu Hoce2-HRP fun ifinu RBD kan ti RBD kobililized ninu awọn kanga. Lẹhin
A wẹ awọn kanga ti wa ni iwẹ mẹrin lati yọ Hove2-HRP conjugate. Ojutu kan ti
A fi kun TMB lẹhinna ṣafikun ati irubọ fun iṣẹju 20 ni iwọn otutu yara, ti o yorisi idagbasoke ti a
awọ bulu. Awọn idagbasoke awọ ti duro pẹlu afikun ti 1n HLL, ati gbigbasilẹ jẹ
wiwọn scentrophotometrically ni 450 NM. Kikankikan ti awọ ti a ṣẹda jẹ ibamu si Oluwa
Iye ti henensiamu lọwọlọwọ, ati pe o ni ibatan si iye awọn ajohunše ṣe ni ọna kanna.
Nipasẹ lafiwe pẹlu ile-iṣọ mapako ti a ṣẹda nipasẹ awọn ti a pese ti awọn ile-iṣẹ ti a pese, ifọkansi ti
Awọn afọwọṣe yomi ninu ayẹwo ti a ko mọ ni a iṣiro.
【Awọn ohun elo ti a nilo ṣugbọn ko pese】
1. Distilled tabi omi titobi
2. Papettes pipe: 10μL, 100μL, 200μL ati 1 milimita
3
4. Ẹrọ microplate o lagbara lati gba kika kika ni 450nm.
5. Iwe ọwọ
6 iwe
7
【Eto ikojọpọ ati Ibi ipamọ】
1. Arara ati awọn ayẹwo pilasima ti a gba ni awọn Falobe ti o ni K2-Edta le ṣee lo fun ohun elo yii.
2. Apẹrẹ yẹ ki o wa ni ààjọ ati o le wa ni fipamọ fun to awọn wakati 48 ni 2 ° C - 8 ° C2 ṣaaju ṣiṣe lati ṣinṣin.
Awọn alaye ti o waye fun akoko to gun (to awọn oṣu 6) yẹ ki o tutu nikan ni ẹẹkan ni ẹẹkan ni apapọ.
Yago fun awọn kẹkẹ-ọwọ-thaw ti a tun ṣe.
Ilana-ọja
【Igbaradi Reetment】
1.
(20 ° si 25 ° C). Fipamọ gbogbo awọn reagents ni firiji lẹsẹkẹsẹ ni kiakia lẹhin lilo.
2. Gbogbo awọn ayẹwo ati awọn iṣakoso yẹ ki o wa ni onimọn ṣaaju lilo.
3
Ifipamọ. Fun apẹẹrẹ, dilute 100 μL ti Hoce2-HRP ṣe ifọkansi pẹlu 5.0ml ti buffer soffer si
Ṣe ojutu Hara2-HRP kan.
4.
ipin iwọn didun ti 1:19. Fun apẹẹrẹ, kililu 20 milimita ti 20 × wẹ pẹlu 380 milimita ti iparun tabi
Omi distilled lati ṣe 400 milimita ti 1 × wẹ.
【Ilana idanwo】
1. Ni awọn obe mẹta, alot 120μL ti awọn ti a ti pese silẹ Sace2-HRP ojutu.
2. Fi 6 μl ti awọn calibrators, awọn ayẹwo aimọ, awọn iṣakoso didara ni paadi kọọkan ati ki o dapọ daradara.
3
si ilana iṣeto idanwo.
3. Bo awo naa pẹlu awo ti a fifin ati idoti ni 37 ° C fun iṣẹju 30.
4. Yọ awo awo naa ki o wẹ awo naa pẹlu to 300 μL ti 1 × wẹ fun daradara.
5. Tẹ awo naa lori aṣọ inura iwe lati yọ omi mimukuro sinu awọn kanga lẹhin awọn igbesẹ fifọ.
6. Fi 100 μL ti ojutu TMB si ọkọọkan ati fa awopọ ti awo naa ni okunkun ni 20 - 25 ° C fun iṣẹju 20.
7. Fi 50 μ ti ojutu iduro si kọọkan lati da idaduro duro.
8
Iṣeduro fun iṣẹ iṣe iṣaaju ga).