Kokoro Monkeypox (MPV) Ohun elo Iwari Acid

Ohun elo naa ni awọn atunmọ fun sisẹ awọn idanwo 48 tabi iṣakoso didara, pẹlu awọn paati atẹle:

Reagent A

ReagentB

Akiyesi: Awọn paati ti awọn nọmba ipele oriṣiriṣi ko ṣee lo ni paarọ

【Awọn ipo Ibi ipamọ Ati Igbesi aye Selifu】

1.Reagent A / B le wa ni ipamọ ni 2-30 ° C, ati igbesi aye selifu jẹ osu 10.

2.Jọwọ ṣii ideri tube idanwo nikan nigbati o ba ṣetan fun idanwo naa.

3.Maṣe lo awọn tubes idanwo ju ọjọ ipari lọ.

4.Maṣe lo tube wiwa ti n jo.

【Ohun elo to wulo】

Dara fun Dara fun LC480 PCR eto onínọmbà, Gentier 48E Aifọwọyi PCR eto onínọmbà, ABI7500 PCR eto.

【Awọn ibeere apẹẹrẹ】

1.Awọn iru apẹẹrẹ ti o wulo: ọfun swabs awọn ayẹwo.

2.Sampling ojutu:Lẹhin ijẹrisi, o gba ọ niyanju lati lo iyọ deede tabi tube itọju Iwoye ti a ṣejade nipasẹ isedale Hangzhou Testsea fun gbigba apẹẹrẹ.

ọfun swab:nu awọn tonsils pharyngeal bilateral ati odi pharyngeal ti o tẹle pẹlu swab iṣapẹẹrẹ ifofo isọnu, fi omi swab sinu tube ti o ni ojutu iṣapẹẹrẹ 3mL, sọ iru naa silẹ, ki o si mu ideri tube di.

3.Sample ipamọ ati ifijiṣẹ:Awọn ayẹwo lati ṣe idanwo yẹ ki o ni idanwo ni kete bi o ti ṣee.Awọn irinna otutu yẹ ki o wa ni pa ni 2 ~ 8 ℃.The awọn ayẹwo ti o le wa ni idanwo laarin 24 wakati le wa ni fipamọ ni 2℃ ~ 8 ℃ ati ti o ba awọn ayẹwo ko le wa ni idanwo laarin 24 wakati, o yẹ ki o wa ni ti o ti fipamọ ni kere ju tabi dogba. si -70 ℃ (ti ko ba si ipo ipamọ ti -70 ℃, o le wa ni ipamọ ni -20 ℃ fun igba diẹ), yago fun atunṣe

didi ati thawing.

4.Proper gbigba apẹẹrẹ, ibi ipamọ, ati gbigbe jẹ pataki si iṣẹ ti ọja yii.

【Ọna Idanwo】

1.Sample processing ati ayẹwo afikun

1.1 Ayẹwo processing

Lẹhin ti o dapọ ojutu iṣapẹẹrẹ loke pẹlu awọn ayẹwo, mu 30μL ti ayẹwo sinu tube reagent itusilẹ DNA ki o si dapọ ni deede.

1.2 ikojọpọ

Mu 20μL ti reagent atunṣe ki o ṣafikun si reagent wiwa MPV, ṣafikun 5μL ti apẹẹrẹ ti a ti ni ilọsiwaju loke (Iṣakoso rere ati iṣakoso odi ni yoo ṣiṣẹ ni afiwe pẹlu awọn apẹẹrẹ), bo fila tube, centrifuge ni 2000rpm fun 10 iṣẹju-aaya.

2. PCR ampilifaya

2.1 Fifuye PCR ti a pese silẹ / awọn tubes si ohun elo PCR fluorescence, iṣakoso odi ati iṣakoso rere yoo ṣeto fun idanwo kọọkan.

2.2 Eto ikanni Fuluorisenti:

1) Yan ikanni FAM fun wiwa MPV;

2) Yan ikanni HEX / VIC fun wiwa jiini iṣakoso inu;

3.Results onínọmbà

Ṣeto laini ipilẹ loke aaye ti o ga julọ ti iha fluorescent ti iṣakoso odi.

4.Iṣakoso didara

4.1 Iṣakoso odi: Ko si iye Ct ti a rii ni FAM, ikanni HEX/VIC, tabi Ct＞40;

4.2 Iṣakoso to dara: Ni FAM, ikanni HEX / VIC, Ct≤40;

4.3 Awọn ibeere ti o wa loke yẹ ki o ni itẹlọrun ni idanwo kanna, bibẹẹkọ awọn abajade idanwo ko wulo ati pe idanwo naa nilo lati tun ṣe.

【Ge iye】

Ayẹwo kan ni a gba bi idaniloju nigbati: Ilana ibi-afẹde Ct≤40, Jiini iṣakoso inu Ct≤40.

【Itumọ esi】

Ni kete ti iṣakoso didara ba ti kọja, awọn olumulo yẹ ki o ṣayẹwo ti o ba wa ti tẹ ampilifaya fun ayẹwo kọọkan ni ikanni HEX/VIC, ti o ba wa ati pẹlu Ct≤40, o tọka si jiini iṣakoso inu ti pọ si ni aṣeyọri ati pe idanwo pataki yii wulo.Awọn olumulo le tẹsiwaju si itupalẹ atẹle:

3.Fun awọn ayẹwo pẹlu titobi ti iṣakoso iṣakoso inu ti kuna (HEX / VIC

ikanni, Ct ~ 40, tabi ko si ohun elo imudara), ẹru Viral kekere tabi aye ti inhibitor PCR le jẹ idi ti ikuna, idanwo naa yẹ ki o tun ṣe lati gbigba apẹẹrẹ;

4.Fun awọn ayẹwo ti o dara ati kokoro gbin, awọn esi ti iṣakoso inu ko ni ipa;

Fun awọn ayẹwo ti o ni idanwo odi, iṣakoso inu nilo lati ni idanwo rere bibẹẹkọ abajade gbogbogbo ko wulo ati pe idanwo naa nilo lati tun ṣe, bẹrẹ lati igbesẹ ikojọpọ apẹẹrẹ.