סאַרס-קאָוו -2 נוטראַלייזינג אַנטיבאָדי דיטעקשאַן קיט (עליסאַ)
【פּרינציפּ】
די סאַרס-קאָוו -2 נוטראַלייזינג אַנטיבאָדי דיטעקשאַן קיט איז באזירט אויף קאַמפּעטיטיוו עליסאַ מעטאַדאַלאַדזשי.
ניצן פּיוראַפייד רעסעפּטאָר ביינדינג פעלד (רבד), פּראָטעין פון די וויראַל נאָגל (s) פּראָטעין און דער באַלעבאָס צעל
רעסעפּטאָר אַס 2, דעם פּראָבע איז דיזיינד צו נאָכקרימען די ווירוס-באַלעבאָס נוטראַלייזינג ינטעראַקשאַן.
קאַלאַבראַטאָרס, קוואַליטעט קאָנטראָלס און סערום אָדער פּלאַזמע סאַמפּאַלז זענען ינדיווידזשואַלי געמישט געזונט אין דיילושאַן
באַפער מיט האַק 2-הרפּ קאָנדזשוגאַטע אַליוקאָוטאַד אין קליין טובז. דערנאָך די מיקסטשערז זענען טראַנספערד אין
די מיקראָפּאַט וועלז מיט ימאָובאַלייזד רעקאָמבינאַנט סאַרס-קאַוו-קאַוו-קאַוו-2 רבד פראַגמענט (רבד) פֿאַר
ינגקיוביישאַן. בעשאַס די העכער ינגקיוביישאַן, די RBD ספּעציפיש אַנטיבאָדי אין די קאַלאַבראַטאָרס, קק און
סאַמפּאַלז וועט קאָנקורירן מיט די האַק 2-הרפּ פֿאַר ספּעציפיש ביינדינג די רבד ימאָובאַלייזד אין די וועלז. נאָך
די ינגקיוביישאַן, די וועלז זענען געוואשן 4 מאל צו באַזייַטיקן אַנבאַונד האַסע 2-הרפּ קאָנדזשוגאַטע. אַ לייזונג פון
טמב איז דערנאָך צוגעגעבן און ינקובאַטעד פֿאַר 20 מינוט אין צימער טעמפּעראַטור, ריזאַלטינג אין דער אַנטוויקלונג פון אַ
בלוי קאָליר. די קאָליר אַנטוויקלונג איז פארשטאפט מיט די דערצו פון 1 ען הקל, און די אַבזאָרבאַנס איז
געמאסטן ספּעקטראָפאָטרעטריקאַללי 450 נם. די ינטענסיטי פון די קאָליר איז פּראַפּאָרשאַנאַל צו די
סומע פון ענזיים פאָרשטעלן, און איז פאַרקערט צו די סומע פון סטאַנדאַרדס אַססיסטאַד אין די זעלבע וועג.
דורך פאַרגלייַך מיט די קאַלאַבריישאַן ויסבייג געשאפן דורך די צוגעשטעלט קאַליבאַטאָרס, די קאַנסאַנטריישאַן פון
נייטראַלייזינג אַנטיבאָדיעס אין די אומבאַקאַנט מוסטער איז דעמאָלט קאַלקיאַלייטיד.
【מאַטעריאַלס פארלאנגט אָבער נישט צוגעשטעלט】
1. דיסטילד אָדער דעיאָניזעד וואַסער
2. פּינטלעכקייַט פּיצאַטעס: 10μ ל, 100μ ל, 200 ל און 1 מל
3. דיספּאָוזאַבאַל פּייפּעט עצות
4. מיקראָפּלאַטע לייענער טויגעוודיק פון לייענען אַבזאָרבאַנס אויף 450 נם.
5. אַבזאָרבאַנט פּאַפּיר
6. גראַפיק פּאַפּיר
7. Vortex מיקסער אָדער עקוויוואַלענט
【מוסטער זאַמלונג און סטאָרידזש】
1. סערום און פּלאַזמע סאַמפּאַלז קאַלעקטאַד אין טובז מיט ק 2-עדטאַ קענען ווערן געניצט פֿאַר דעם קיט.
2. ספּעסאַמאַנז זאָל זיין קאַפּט און קען זיין סטאָרד אַרויף צו 48 שעה ביי 2 ° C - 8 ° C איידער צו אַסייסינג.
ספּעסאַמאַנז געהאלטן פֿאַר אַ מער צייט (אַרויף צו 6 חדשים) זאָל זיין פאַרפרוירן בלויז אַמאָל ביי -20 ° C איידער צו אַסס.
ויסמיידן ריפּיטיד פרירן-טאָי סייקאַלז.
פּראָטאָקאָל
【רעאַגענט צוגרייטונג】
1. אַלע רייידזשאַנץ מוזן זיין גענומען פֿון ריפרידזשעריישאַן און ערלויבט צו צוריקקומען צו די צימער טעמפּעראַטור איידער נוצן
(20 ° צו 25 ° C). היט אַלע רייידזשאַנץ אין פרידזשידער גלייך נאָך נוצן.
2. אַלע סאַמפּאַלז און קאָנטראָלס זאָל זיין וואָרטעקסעד איידער נוצן.
3. HACE2-HRP לייזונג צוגרייטונג: Dalute Hace2-HRP קאַנסאַנטרייט בייַ 1: 51 דיילושאַן פאַרהעלטעניש מיט דיילושאַן
באַפער. לעמאָשל, צעפירן 100 μL פון HACE2-HRP קאַנסאַנטרייט מיט 5.0 מל הרפּ דיילושאַן באַפער צו
מאַכן אַ האַס 2-הרפּ לייזונג.
4. 1 × וואַשן סאַלענדיישאַן צוגרייטונג: צעפירן די 20 × וואַשן לייזונג מיט דעיאָניזעד אָדער דיסטילד וואַסער מיט אַ
Ratio-overio פון 1:19. לעמאָשל, צעפירן 20 מל 20 × וואַשן לייזונג מיט 380 מל פון דעיאָניזעד אָדער
דיסטילד וואַסער צו מאַכן 400 מל פון 1 × וואַשן לייזונג.
【פּרובירן פּראָצעדור】
1. אין באַזונדער טובז, אַלאַקוואַט 120μ ol פון די צוגעגרייט האַס 2-הרפּ לייזונג.
2. לייג 6 אָלס פון קאַלאַבראַטאָרס, אומבאַקאַטאָרס סאַמפּאַלז, קוואַליטעט קאָנטראָלס אין יעדער רער און מישן געזונט.
3. אַריבערפירן 100 אָדער יעדער געמיש צוגעגרייט אין די טרעטן 2 אין קאָראַספּאַנדינג מיקראָפּלאַטע וועלז לויט
צו פּרעדעסיגנעד פּרובירן קאַנפיגיעריישאַן.
3. דעקן די טעלער מיט טעלער סעער און ינקובייט ביי 37 ° C פֿאַר 30 מינוט.
4. אַראָפּנעמען די פייַכט סעילער און וואַשן די טעלער מיט 300 × 1 × וואַשן לייזונג פּער וועלפאָרשער פיר מאָל.
5. צאַפּן אויף די טעלער אויף פּאַפּיר האַנטעך צו באַזייַטיקן די ריזידזשואַל פליסיק אין די וועלז נאָך וואַשינג סטעפּס.
6. לייג 100 μ ל טמב לייזונג צו יעדער געזונט און ינקאַבאַד די טעלער אין טונקל ביי 20 - 25 ° C פֿאַר 20 מינוט.
7. לייג 50 μ ל האַלטן לייזונג צו יעדער צו האַלטן דעם אָפּרוף.
8. לייענען די אַבזאָרבאַנס אין מיקראָפּלאַטע לייענער מיט 450 נם ין 10 מינוט (630 נם ווי אַקסעסערי איז
רעקאַמענדיד פֿאַר העכער פּינטלעכקייַט פאָרשטעלונג).