Bộ phát hiện axit nucleic virus Monkeypox (MPV)

Bộ sản phẩm chứa thuốc thử để xử lý 48 xét nghiệm hoặc kiểm soát chất lượng, bao gồm các thành phần sau:

Thuốc thử A

Thuốc thửB

Lưu ý: Các thành phần có số lô khác nhau không thể thay thế cho nhau

【Điều kiện bảo quản và thời hạn sử dụng】

1. Thuốc thử A/B có thể được bảo quản ở nhiệt độ 2-30°C và thời hạn sử dụng là 10 tháng.

2. Vui lòng chỉ mở nắp ống nghiệm khi bạn đã sẵn sàng kiểm tra.

3. Không sử dụng ống nghiệm đã hết hạn sử dụng.

4. Không sử dụng ống phát hiện rò rỉ.

【Dụng cụ áp dụng】

Thích hợp cho Thích hợp cho hệ thống phân tích PCR LC480, hệ thống phân tích PCR tự động Gentier 48E, hệ thống phân tích PCR ABI7500.

【Yêu cầu mẫu】

1.Các loại mẫu áp dụng: mẫu bệnh phẩm họng.

2.Giải pháp lấy mẫu:Sau khi xác minh, nên sử dụng ống bảo quản nước muối thông thường hoặc ống bảo quản Virus do công ty sinh học Hàng Châu Testsea sản xuất để lấy mẫu.

ngoáy họng:lau amidan họng hai bên và thành sau họng bằng tăm bông lấy mẫu vô trùng dùng một lần, nhúng tăm bông vào ống chứa 3mL dung dịch lấy mẫu, bỏ đuôi và vặn chặt nắp ống.

3. Lưu trữ và giao hàng mẫu:Các mẫu cần kiểm tra phải được kiểm tra càng sớm càng tốt.Nhiệt độ vận chuyển phải được giữ ở 2 ~ 8oC. Các mẫu có thể được kiểm tra trong vòng 24 giờ có thể được bảo quản ở 2oC ~ 8oC và nếu các mẫu không thể được kiểm tra trong vòng 24 giờ thì nên bảo quản ở nhiệt độ nhỏ hơn hoặc bằng đến -70oC (nếu không có điều kiện bảo quản ở -70oC thì có thể bảo quản tạm thời ở -20oC), tránh lặp lại

đóng băng và tan băng.

4. Việc thu thập, lưu trữ và vận chuyển mẫu đúng cách là rất quan trọng đối với hiệu suất của sản phẩm này.

【Phương pháp thử nghiệm】

1. Xử lý mẫu và bổ sung mẫu

1.1 Xử lý mẫu

Sau khi trộn dung dịch lấy mẫu trên với các mẫu, lấy 30μL mẫu vào ống thuốc thử giải phóng DNA và trộn đều.

1.2 Đang tải

Lấy 20μL thuốc thử hoàn nguyên và thêm vào thuốc thử phát hiện MPV, thêm 5μL mẫu đã xử lý ở trên (Kiểm soát dương tính và kiểm soát âm tính phải được xử lý song song với các mẫu), đậy nắp ống, ly tâm ở tốc độ 2000 vòng / phút trong 10 giây.

2. Khuếch đại PCR

2.1 Nạp đĩa/ống PCR đã chuẩn bị vào thiết bị PCR huỳnh quang. Phải cài đặt đối chứng âm tính và đối chứng dương tính cho mỗi xét nghiệm.

2.2 Cài đặt kênh huỳnh quang:

1) Chọn kênh FAM để phát hiện MPV;

2) Chọn kênh HEX/VIC để phát hiện gen kiểm soát nội bộ；

3.Phân tích kết quả

Đặt đường cơ sở phía trên điểm cao nhất của đường cong huỳnh quang của mẫu đối chứng âm.

4. Kiểm soát chất lượng

4.1 Kiểm soát âm tính: Không phát hiện thấy giá trị Ct trong kênh FAM、HEX/VIC hoặc Ct＞40；

4.2 Kiểm soát tích cực: Trong kênh FAM、HEX/VIC, Ct≤40；

4.3 Các yêu cầu trên phải được đáp ứng trong cùng một thí nghiệm, nếu không kết quả thí nghiệm sẽ không hợp lệ và thí nghiệm phải được lặp lại.

【Giá trị cắt bỏ】

Một mẫu được coi là dương tính khi: Trình tự đích Ct<40, Gen kiểm soát nội bộ Ct<40.

【Giải thích kết quả】

Sau khi quá trình kiểm soát chất lượng được thông qua, người dùng nên kiểm tra xem có đường cong khuếch đại cho từng mẫu trong kênh HEX/VIC hay không, nếu có và với Ct<40, điều đó cho thấy gen kiểm soát nội bộ đã được khuếch đại thành công và thử nghiệm cụ thể này là hợp lệ.Người dùng có thể tiến hành phân tích tiếp theo:

3.Đối với các mẫu khuếch đại gen nội kiểm không thành công (HEX/VIC

kênh, Ct＞40,hoặc không có đường cong khuếch đại), tải lượng virus thấp hoặc sự tồn tại của chất ức chế PCR có thể là nguyên nhân thất bại, việc kiểm tra nên lặp lại từ việc lấy mẫu bệnh phẩm;

4.Đối với mẫu dương tính và virus nuôi cấy, kết quả kiểm soát nội bộ không ảnh hưởng;

Đối với các mẫu được xét nghiệm âm tính, nội kiểm cần phải có kết quả dương tính, nếu không kết quả tổng thể không hợp lệ và cần phải xét nghiệm lại, bắt đầu từ bước lấy mẫu.