Sars-Con-2-ni zararsizlantiruvchi vosita (Elisa)
【Printsip】
SARS-KE-2 ga qarshi zararsizlantiruvchi vosita raqobatbardosh Elisa metodologiyasi asosida amalga oshiriladi.
Tozalangan retseptorni bog'lab qo'yish domeni (RBD), virusli shpalik (lar) oqsil va xost hujayralaridan oqsil
Aceptor Ace2, ushbu sinov virusni xoldingli o'zaro ta'sirni taqlid qilish uchun mo'ljallangan.
Kalibronlar, sifatli boshqarish vositalari va zardob yoki plazma namunalari alohida suyultirishda yaxshilab aralashtirilgan
Kichik naychalarda ice2-htrp-ni o'z ichiga olgan bufer. Keyin aralashmalar uzatiladi
immobilizatsiya qilingan rekombinant SARSS-2-RBD parchalarini o'z ichiga olgan mikroplate quduqlari uchun (RBD)
inkubatsiya. 30 daqiqali inkubatsiya paytida, kalibronlarda, QK va
Namunalar quduqlarda Immobilashgan Rbd-ni aniq bog'lab qo'yish uchun Haste2-GRP bilan raqobatlashadi. Keyin
Kuluçka, quduqlar Yuborugga yuklangan Xac2-HRP-ni olib tashlash uchun 4 marta yuviladi. Eritmasi
Keyin tmb, keyinchalik xona haroratida 20 daqiqa davomida xijolat tortdi va natijada a rivojlanmoqda
ko'k rang. Rangni qayta ishlash 1n HCl va yutishni yutish bilan to'xtatiladi
O'lchamli spektromometrik jihatdan 450 nm. Shakllangan rangning intensivligi mutanosib
Hozirgi vaqtda ferment miqdori, shuningdek, xuddi shu tarzda sodir etilgan standartlar miqdori bilan bog'liq.
Ko'rsatilgan kalibrlar, konsentratsiyalangan kalibrlash egri bilan taqqoslash orqali
Antijismlarni noma'lum namunadagi zararsizlantiradi.
【Kerakli materiallar, lekin taqdim etilmagan】
1. Distilla yoki shiddatli suv
2. Tekshiruv prudetlari: 10ml, 100ml, 200 ml va 1 ml
3. Bir marta ishlatiladigan pipetka maslahatlari
4
5. Changlash qog'ozi
6. Grafik qog'oz
7. Vortex mikser yoki ekvivalent
【Namunaviy yig'ish va saqlash】
1. Sarum va K2 EDTA ni o'z ichiga olgan naychalarda to'plangan sallamalardan foydalanish mumkin.
2. Namunalarni kesish kerak va 48 soat davomida 2 ° C - 8 ° C gacha saqlashdan oldin saqlanishi mumkin.
Namunalar uzoqroq vaqt davomida ushlab turilgan (6 oygacha) Assagdan oldin -20 ° C-° C dan oldin muzlatilishi kerak.
Tushunib yuradigan tsikllardan saqlaning.
Protokol
【Reaktiv tayyorlash】
1. Barcha reaktivlar Sovutishdan olib tashlash kerak va foydalanishdan oldin xona haroratiga qaytishga ruxsat beriladi
(20 ° C dan 25 ° C gacha). Ishlatgandan keyin barcha reaktivlarni sivilg'ochatorda saqlang.
2. Barcha namunalar va boshqarish vositalaridan foydalanishdan oldin o'zgaruvchan bo'lishi kerak.
3
Bufer. Masalan, 100 mk2-HRP ni 5,0 mln. HRP Silmülme Buferi bilan suyultiring
HACE2-HRP echimini tuzing.
4
Ovoz balandligi 1:19 nisbati. Masalan, 20 ml 20 ml 20 × yuvish eritmasi 380 ml zanjirli yoki
Distillangan suv 400 ml 1 × yuvish eritmasi.
【Sinov protsedurasi】
1
2. Har bir naychada 6 mklli kalibronlar, noma'lum namunalar, sifatli nazorat va yaxshilab aralashtiring.
3
oldindan taxmin qilingan sinov konfiguratsiyasiga.
3
4
5
.
7. Reaktsiyani to'xtatish uchun har bir quduqqa 50 mkl to'xtatadigan eritma qo'shing.
8. Mikoplatatsiya o'quvchisiga 10 daqiqada 450 nm ni o'qing (630 metr)
yuqori aniqlikdagi ishlash uchun tavsiya etiladi).