Maymun pox virusi (MPV) Nuklein kislotasini aniqlash to'plami

To'plam 48 ta testni qayta ishlash yoki sifat nazorati uchun reagentlarni o'z ichiga oladi, shu jumladan quyidagi komponentlar:

Reaktiv A

ReaktivB

Eslatma: Turli partiya raqamlarining komponentlarini bir-birining o'rnida ishlatib bo'lmaydi

【Saqlash shartlari va Yaroqlilik muddati】

1.Reagent A/B 2-30°C haroratda saqlanishi mumkin, saqlash muddati esa 10 oy.

2. Iltimos, probirka qopqog'ini faqat sinovga tayyor bo'lganingizda oching.

3.Yaroqlilik muddati o'tgan probirkalardan foydalanmang.

4.Oqishni aniqlash naychasidan foydalanmang.

【Amaldagi asbob】

LC480 PCR tahlil tizimi, Gentier 48E Avtomatik PCR tahlil tizimi, ABI7500 PCR tahlil tizimi uchun mos keladi.

【Namuna talablari】

1.Qo'llaniladigan namuna turlari: tomoq tayoqlari namunalari.

2. Namuna olish yechimi:Tekshiruvdan so'ng, namuna olish uchun Hangzhou Testsea biology tomonidan ishlab chiqarilgan oddiy sho'r suv yoki Virusni saqlash naychasidan foydalanish tavsiya etiladi.

tomoq tayoqchasi:ikki tomonlama faringeal bodomsimon bezlarni va faringeal orqa devorni bir martalik steril namuna olish tampon bilan artib oling, tamponni 3 ml namuna olish eritmasi bo'lgan naychaga botiring, dumini tashlang va naycha qopqog'ini mahkamlang.

3. Namunani saqlash va yetkazib berish:Sinov qilinadigan namunalar imkon qadar tezroq sinovdan o'tkazilishi kerak.Tashish harorati 2 ~ 8 ℃ darajasida saqlanishi kerak. 24 soat ichida sinovdan o'tkazilishi mumkin bo'lgan namunalar 2 ℃ ~ 8 ℃ haroratda saqlanishi mumkin va agar namunalar 24 soat ichida sinovdan o'tkazilmasa, u kamroq yoki teng darajada saqlanishi kerak. -70 ℃ gacha (agar -70 ℃ saqlash sharti bo'lmasa, u vaqtincha -20 ℃ da saqlanishi mumkin), takrorlashdan saqlaning

muzlash va eritish.

4.To'g'ri namuna yig'ish, saqlash va tashish ushbu mahsulotning ishlashi uchun juda muhimdir.

【Sinov usuli】

1.Namunani qayta ishlash va namunani qo'shish

1.1 Namunalarni qayta ishlash

Yuqoridagi namuna olish eritmasini namunalar bilan aralashtirgandan so'ng, 30 mkL namunani DNK ajratuvchi reagent trubasiga oling va uni teng ravishda aralashtiring.

1.2 Yuklash

20 mkl qayta tiklash reagentini oling va uni MPV aniqlash reaktiviga qo'shing, yuqorida qayta ishlangan namunadan 5 mkL qo'shing (musbat nazorat va manfiy nazorat namunalar bilan parallel ravishda qayta ishlanishi kerak), trubka qopqog'ini yoping, uni 2000 rpm tezlikda 10 marta santrifüj qiling. soniya.

2. PCR amplifikatsiyasi

2.1 Tayyorlangan PCR plastinkasini/naychalarini floresan PCR asbobiga yuklang, har bir sinov uchun salbiy nazorat va ijobiy nazorat o'rnatilishi kerak.

2.2 Floresan kanal sozlamalari:

1) MPVni aniqlash uchun FAM kanalini tanlang;

2) Ichki nazorat genini aniqlash uchun HEX/VIC kanalini tanlang;

3. Natijalarni tahlil qilish

Asosiy chiziqni salbiy nazoratning lyuminestsent egri chizig'ining eng yuqori nuqtasiga o'rnating.

4.Sifat nazorati

4.1 Salbiy nazorat: FAM, HEX/VIC kanalida Ct qiymati aniqlanmadi yoki Ct＞40；

4.2 Ijobiy nazorat: FAM, HEX/VIC kanalida, Ct≤40；

4.3 Yuqoridagi talablar bir xil tajribada bajarilishi kerak, aks holda sinov natijalari haqiqiy emas va tajribani takrorlash kerak.

【Qiymatni kesish】

Namuna quyidagi hollarda ijobiy deb hisoblanadi: maqsadli ketma-ketlik Ct≤40, ichki nazorat geni Ct≤40.

【Natijalarni talqin qilish】

Sifat nazoratidan o'tgandan so'ng, foydalanuvchilar HEX/VIC kanalidagi har bir namuna uchun kuchaytirish egri chizig'i mavjudligini tekshirishlari kerak, agar mavjud bo'lsa va Ct≤40 bo'lsa, bu ichki nazorat geni muvaffaqiyatli kuchaytirilganligini va bu maxsus testning haqiqiyligini ko'rsatadi.Foydalanuvchilar keyingi tahlilga o'tishlari mumkin:

3.Ichki nazorat genining kuchaytirilishi bajarilmagan namunalar uchun (HEX/VIC

kanal, Ct＞40 yoki kuchaytirish egri chizig'i yo'q), kam Virusli yuk yoki PCR inhibitori mavjudligi muvaffaqiyatsizlikka sabab bo'lishi mumkin, tekshirish namunalar to'plamidan takrorlanishi kerak;

4.Ijobiy namunalar va ekilgan viruslar uchun ichki nazorat natijalari ta'sir qilmaydi;

Salbiy sinovdan o'tgan namunalar uchun ichki nazorat ijobiy sinovdan o'tkazilishi kerak, aks holda umumiy natija noto'g'ri bo'ladi va namunani yig'ish bosqichidan boshlab tekshiruvni takrorlash kerak.