ICH-CPV-CDV IgG ٹیسٹ کٹ
کینائن انفیکٹیئس ہیپاٹائٹس/پاروو وائرس/ڈسٹیمپر وائرس IgG اینٹی باڈی ٹیسٹ کٹ (ICH/CPV/CDV IgG ٹیسٹ کٹ) کتے کے IgG اینٹی باڈی کی سطح کا نیم مقداری اندازہ لگانے کے لیے ڈیزائن کیا گیا ہے اور کینائن ڈسٹیمپر وائرس (CDV)۔
کٹ کے مشمولات
مشمولات | مقدار |
کارتوس جس میں کلیدی اور ترقی پذیر حل موجود ہیں۔ | 10 |
کلر اسکیل | 1 |
ہدایت نامہ | 1 |
پالتو جانوروں کے لیبلز | 12 |
ڈیزائن اور اصول
ہر کارتوس میں دو اجزاء پیک کیے گئے ہیں: چابی، جو حفاظتی ایلومینیم ورق کے ساتھ بند نیچے والے کمپارٹمنٹ میں ڈیسیکینٹ کے ساتھ جمع کی جاتی ہے، اور حل تیار کرتے ہیں، جو حفاظتی ایلومینیم ورق سے بند اوپر والے کمپارٹمنٹس میں الگ سے جمع ہوتے ہیں۔
ہر کارتوس میں ایک نمونے کی جانچ کے لیے تمام ضروری ری ایجنٹس ہوتے ہیں۔ مختصراً، جب کلید کو اوپر والے ڈبے 1 میں چند منٹ کے لیے داخل کیا جاتا ہے اور انکیوبیٹ کیا جاتا ہے، جس میں خون کا نمونہ جمع کیا گیا ہے، خون کے پتلے نمونے میں مخصوص آئی جی جی اینٹی باڈیز، اگر موجود ہوں تو، آئی سی ایچ، سی پی وی یا داخل کی گئی کلید پر مختلف مجرد دھبوں پر CDV ریکومبیننٹ اینٹیجنز متحرک ہیں۔ پھر کلید کو وقت کے وقفوں پر مرحلہ وار باقی سب سے اوپر والے حصوں میں منتقل کیا جائے گا۔ دھبوں پر پابند مخصوص آئی جی جی اینٹی باڈیز کو اوپر والے کمپارٹمنٹ 3 میں لیبل لگایا جائے گا، جس میں اینٹی کینائن آئی جی جی انزائم کنجوگیٹ ہوتا ہے اور کلیدی پر جامنی نیلے دھبوں کے طور پر پیش کیے گئے حتمی نتائج سب سے اوپر تیار کیے جائیں گے۔
کمپارٹمنٹ 6، جس میں سبسٹریٹ ہوتا ہے۔ تسلی بخش نتیجہ کے لیے، دھونے کے اقدامات متعارف کرائے جاتے ہیں۔ سب سے اوپر والے ٹوکری 2 میں، خون کے نمونے کے اندر غیر محدود IgG اور دیگر مادوں کو ہٹا دیا جائے گا۔ سب سے اوپر والے ٹوکری 4 اور 5 میں، ان باؤنڈڈ یا
اضافی اینٹی کینائن آئی جی جی انزائم کنجوگیٹ کو مناسب طریقے سے ختم کیا جائے گا۔ آخر میں، اوپر والے کمپارٹمنٹ 7 میں، سبسٹریٹ سے تیار کردہ اضافی کروموسوم اور اوپر والے کمپارٹمنٹ 6 میں باؤنڈڈ انزائم کنجوگیٹ کو ہٹا دیا جائے گا۔ کارکردگی کی درستگی کی تصدیق کے لیے، کلید کے اوپری حصے پر ایک کنٹرول پروٹین متعارف کرایا جاتا ہے۔ کامیاب جانچ کے عمل کو ختم کرنے کے بعد جامنی نیلے رنگ میں ایک جگہ نظر آنی چاہیے۔
اسٹوریج
1. کٹ کو عام ریفریجریشن (2~8℃) میں اسٹور کریں۔
کٹ کو منجمد نہ کریں۔
2. کٹ میں غیر فعال حیاتیاتی مواد شامل ہے۔ کٹ کو سنبھالنا ضروری ہے۔
اور مقامی حفظان صحت کی ضروریات کے مطابق نمٹا جاتا ہے۔
ٹیسٹ کا طریقہ کار
ٹیسٹ کرنے سے پہلے تیاری:
1۔ کارتوس کو کمرے کے درجہ حرارت (20℃-30℃)) پر لائیں اور اسے ورک بینچ پر رکھیں جب تک کہ کارٹریج کی دیوار پر موجود تھرمل لیبل سرخ رنگ کا نہ ہوجائے۔
2. چابی رکھنے کے لیے ورک بینچ پر صاف ٹشو پیپر رکھیں۔
3. ایک 10μL ڈسپنسر اور 10μL معیاری پائپیٹ ٹپس تیار کریں۔
4۔ نیچے کے حفاظتی ایلومینیم ورق کو ہٹا دیں اور کارٹریج کے نیچے والے ڈبے سے کلین کو صاف ٹشو پیپر پر ڈال دیں۔
5. کارٹریج کو کام کے بینچ پر سیدھا کھڑا کریں اور تصدیق کریں کہ اوپر والے کمپارٹمنٹ نمبرز کو صحیح سمت میں دیکھا جا سکتا ہے (صحیح نمبر کے ڈاک ٹکٹ آپ کی طرف ہیں)۔ اس بات کو یقینی بنانے کے لیے کارتوس کو ہلکا سا تھپتھپائیں کہ اوپر والے کمپارٹمنٹ میں محلول واپس نیچے کی طرف مڑ جاتے ہیں۔
ٹیسٹ انجام دینا:
1. اوپر والے کمپارٹمنٹ پر حفاظتی ورق کو احتیاط سے انگلی اور انگوٹھے سے بائیں سے دائیں تک کھولیں جب تک کہ صرف اوپر والے ڈبے کو بے نقاب نہ کر دیں۔
2. معیاری 10μL پائپیٹ ٹپ کا استعمال کرتے ہوئے ڈسپنسر سیٹ کے ساتھ ٹیسٹ شدہ خون کا نمونہ حاصل کریں۔
سیرم یا پلازما کی جانچ کے لیے 5μL استعمال کریں۔
پورے خون کی جانچ کے لیے 10μL استعمال کریں۔
EDTA یا heparin anticoagulant tubes پلازما اور پورے خون کو جمع کرنے کے لیے تجویز کی جاتی ہیں۔
3. نمونے کو اوپر والے ڈبے میں جمع کریں 1. پھر اختلاط حاصل کرنے کے لیے ڈسپنسر پلنگر کو کئی بار اٹھائیں اور نیچے کریں (مکسنگ کے دوران ٹپ میں ہلکا نیلا محلول کامیاب نمونہ جمع ہونے کی نشاندہی کرتا ہے)۔
4. کلید کے ہولڈر سے کلید کو انگلی اور انگوٹھے سے احتیاط سے اٹھائیں اور کلید کو اوپر والے کمپارٹمنٹ 1 میں داخل کریں (کنجی کے فروسٹنگ سائیڈ کی تصدیق کریں جو آپ کی طرف ہے، یا اس بات کی تصدیق کریں کہ ہولڈر کا نیم دائرہ دائیں طرف ہے۔ آپ)۔ پھر مکس کریں اور کلید کو اوپر والے ڈبے 1 میں 5 منٹ کے لیے کھڑا کریں۔
5. حفاظتی ورق کو مسلسل دائیں طرف کھولیں جب تک کہ صرف ٹوکری کو بے نقاب نہ کر دیا جائے۔ 2. ہولڈر کے ذریعے کلید اٹھائیں اور چابی کو بے نقاب کمپارٹمنٹ میں داخل کریں 2. پھر کلید کو مکس کریں اور اوپر والے ڈبے 2 میں 1 منٹ کے لیے کھڑا کریں۔
6۔ حفاظتی ورق کو مسلسل دائیں جانب کھولیں جب تک کہ صرف ٹوکری کو بے نقاب نہ کر دیا جائے۔ 3۔ ہولڈر کے ذریعے کلید اٹھائیں اور چابی کو کھلے ہوئے ڈبے میں ڈالیں 3۔ پھر مکس کریں اور کلید کو 5 منٹ تک کمپارٹمنٹ 3 میں رکھیں۔
7. حفاظتی ورق کو دائیں جانب مسلسل کھولیں جب تک کہ صرف ٹوکری کو بے نقاب نہ کر دیا جائے 4. ہولڈر کے ذریعے کلید اٹھائیں اور چابی کو کھلے ہوئے ڈبے میں ڈالیں 4. پھر چابی کو مکس کریں اور اوپر والے ڈبے 4 میں 1 منٹ کے لیے کھڑا کریں۔
8. حفاظتی ورق کو دائیں جانب مسلسل کھولیں جب تک کہ صرف ٹوکری کو بے نقاب نہ کر دیا جائے 5. ہولڈر کے ذریعے کلید اٹھائیں اور چابی کو بے نقاب کمپارٹمنٹ میں ڈالیں 5. پھر چابی کو مکس کریں اور اوپر والے کمپارٹمنٹ 5 میں 1 منٹ کے لیے کھڑا کریں۔
9. حفاظتی ورق کو دائیں جانب مسلسل کھولیں جب تک کہ صرف ٹوکری کو بے نقاب نہ کر دیا جائے 6. ہولڈر کے ذریعے کلید اٹھائیں اور چابی کو کھلے ہوئے ڈبے میں ڈالیں 6. پھر چابی کو مکس کریں اور اوپر والے ڈبے 6 میں 5 منٹ کے لیے کھڑا کریں۔
10۔ حفاظتی ورق کو مسلسل دائیں طرف کھولیں جب تک کہ صرف ٹوکری کو بے نقاب نہ کر دیا جائے۔ 7۔ ہولڈر کے ذریعے کلید اٹھائیں اور چابی کو بے نقاب ڈبے میں ڈالیں 7۔ پھر چابی کو مکس کریں اور اوپر والے کمپارٹمنٹ 7 میں 1 منٹ کے لیے کھڑا کریں۔
11. کلید کو اوپر والے ڈبے 7 سے باہر نکالیں اور نتائج کو پڑھنے سے پہلے اسے ٹشو پیپر پر تقریباً 5 منٹ تک خشک ہونے دیں۔
نوٹس:
کلید کے سامنے والے سرے کے فرسٹنگ سائیڈ کو مت چھونا، جہاں اینٹیجنز اور کنٹرول پروٹین متحرک ہیں (ٹیسٹ اینڈ کنٹرول ریجن)۔
مکس کرتے وقت کلید کے سامنے والے سرے کے دوسرے ہموار سائیڈ کو ہر اوپر والے ڈبے کی اندرونی دیوار پر ٹیک لگا کر ٹیسٹ اور کنٹرول ریجن کو کھرچنے سے گریز کریں۔
مکسنگ کے لیے، ہر اوپر والے ڈبے میں چابی کو 10 بار اٹھانے اور نیچے کرنے کی سفارش کی جاتی ہے۔
کلید کو منتقل کرنے سے پہلے صرف اگلے ایک ٹاپ کمپارٹمنٹ کو بے نقاب کریں۔
اگر ضروری ہو تو، ایک سے زیادہ نمونوں کی جانچ کے لیے فراہم کردہ پالتو جانوروں کے لیبل منسلک کریں۔
امتحان کے نتائج کی ترجمانی کرنا
معیاری کلر اسکیل کے ساتھ کلید پر نتیجے میں دھبوں کو چیک کریں۔
غلط:
کنٹرول اسپاٹ پر کوئی مرئی جامنی نیلا رنگ ظاہر نہیں ہوتا ہے۔
منفی(-)
ٹیسٹ کے مقامات پر کوئی جامنی نیلا رنگ دکھائی نہیں دیتا
مثبت (+)
مرئی جامنی نیلا رنگ ٹیسٹ کے مقامات پر ظاہر ہوتا ہے۔
مخصوص آئی جی جی اینٹی باڈیز کے ٹائٹرز کو تین سطحوں سے واضح کیا جا سکتا ہے۔