Набір для визначення нуклеїнових кислот вірусу віспи мавп (MPV).

Набір містить реагенти для обробки 48 тестів або контролю якості, включаючи такі компоненти:

Реагент А

РеагентB

Примітка: Компоненти з різними номерами партій не можуть бути взаємозамінними

【Умови зберігання та термін придатності】

1. Реагент A/B можна зберігати при 2-30°C, а термін придатності становить 10 місяців.

2. Будь ласка, відкривайте кришку пробірки лише тоді, коли будете готові до тесту.

3. Не використовуйте пробірки після закінчення терміну придатності.

4. Не використовуйте трубку для виявлення витоку.

【Відповідний інструмент】

Підходить для Підходить для системи аналізу ПЛР LC480, системи автоматичного аналізу ПЛР Gentier 48E, системи аналізу ПЛР ABI7500.

【Зразок вимог】

1. Застосовні типи зразків: зразки мазків із зіва.

2. Розчин для відбору проб:Після перевірки для збору зразків рекомендується використовувати звичайний фізіологічний розчин або пробірку для збереження вірусу, виготовлену Hangzhou Testsea biology.

мазок з горла:протріть двосторонні глоткові мигдалини та задню стінку глотки одноразовим стерильним тампоном для зразків, занурте тампон у пробірку, що містить 3 мл розчину для зразків, викиньте хвостик і затягніть кришку пробірки.

3.Зберігання та доставка зразків:Зразки, що підлягають дослідженню, повинні бути перевірені якомога швидше.Температура транспортування повинна підтримуватися на рівні 2 ~ 8 ℃. Зразки, які можна перевірити протягом 24 годин, можна зберігати при 2 ℃ ~ 8 ℃, а якщо зразки не можуть бути протестовані протягом 24 годин, вони повинні зберігатися при температурі нижче або рівній до -70 ℃ (якщо немає умов зберігання -70 ℃, його можна тимчасово зберігати при -20 ℃), уникайте повторного

заморожування і відтавання.

4. Правильний збір зразків, зберігання та транспортування мають вирішальне значення для ефективності цього продукту.

【Метод тестування】

1. Обробка зразка та додавання зразка

1.1 Обробка зразків

Після змішування вищевказаного розчину зразка зі зразками візьміть 30 мкл зразка в пробірку з реагентом для вивільнення ДНК і рівномірно перемішайте.

1.2 Завантаження

Візьміть 20 мкл реагенту для відновлення та додайте його до реагенту для виявлення MPV, додайте 5 мкл обробленого вище зразка (позитивний контроль і негативний контроль обробляються паралельно зі зразками), закрийте кришку пробірки, центрифугуйте при 2000 об/хв протягом 10 секунд.

2. ПЛР-ампліфікація

2.1 Завантажте підготовлені планшети/пробірки для ПЛР у прилад для флуоресцентної ПЛР. Негативний контроль і позитивний контроль слід встановити для кожного тесту.

2.2 Налаштування флуоресцентного каналу:

1) Виберіть канал FAM для виявлення MPV;

2) Виберіть канал HEX/VIC для виявлення генів внутрішнього контролю；

3. Аналіз результатів

Встановіть базову лінію над найвищою точкою флуоресцентної кривої негативного контролю.

4. Контроль якості

4.1 Негативний контроль: у каналі FAM、HEX/VIC не виявлено значення Ct або Ct>40;

4.2 Позитивний контроль: у каналі FAM、HEX/VIC, Ct≤40;

4.3 Вищевказані вимоги повинні бути виконані в тому самому експерименті, інакше результати тесту є недійсними, і експеримент необхідно повторити.

【Відсічне значення】

Зразок вважається позитивним, якщо: цільова послідовність Ct≤40, ген внутрішнього контролю Ct≤40.

【Інтерпретація результатів】

Після проходження контролю якості користувачі повинні перевірити, чи є крива ампліфікації для кожного зразка в каналі HEX/VIC, якщо вона є та з Ct≤40, це означає, що внутрішній контрольний ген успішно ампліфікований і цей конкретний тест дійсний.Користувачі можуть переходити до подальшого аналізу:

3. Для зразків з невдалою ампліфікацією гена внутрішнього контролю (HEX/VIC

канал, Ct>40 або відсутність кривої ампліфікації), причиною невдачі може бути низьке вірусне навантаження або наявність інгібітору ПЛР, обстеження слід повторити із забору зразка;

4. Для позитивних зразків і культивованого вірусу результати внутрішнього контролю не впливають;

Якщо зразки виявилися негативними, внутрішній контроль повинен бути позитивним, інакше загальний результат є недійсним і перевірку потрібно повторити, починаючи з етапу збору зразків