Сарс-Ков-2 Антитрозны ачыклау комплекты (Элиса)
【Принцибы】
Сарс-Ков-2 Антиблы ачыклау комплекты конкурент Элиса методикасына нигезләнгән.
Чистартылган рецепторны чистарту доменын (RBD), вирус спекты (лар) протеиныннан һәм кабул итүче күзәнәктән протеин куллану
Рецептор Аче2, бу тест вирус-хуҗа үзара бәйләнешне мимик белән эшләнгән өчен эшләнгән.
Калибраторлар, сыйфат белән идарә итү, серум яки плазма үрнәкләре эремәдә индивидуаль яктан яхшы катнашалар
Cleas2-HRP кече трубаларда алыну белән бәйле буфер. Аннары катнашмалар күчерелә
Оборизацияләнгән рекорды Сарс-С.Б.-РБД фрагменты (RBD) булган микролинг кое
инкубация. 30 минутлык инкубация вакытында, Калибраторларда, QC һәм
Samрнәкләр CACE2 белән көч сынетачак, тупланган RBD мобильләрен коймакларда имуляцияләнгән. Соңыннан
Инкубация, скважина бушлыкны бетерер өчен 4 тапкыр юыла2 - hrp коньюватын бетерү. Чишелеш
Аннары бүлмә температурасында 20 минут эчендә инкубацияләнгән һәм инкубацияләнгән, нәтиҗәдә
зәңгәр төс. Төсләр үсеше 1н HCL өстәлә, һәм сеңдерелүе
450 Нмда үлчәнгән спектрофометрия. Формалашкан төснең интенсивлыгы - пропорциональ
Фермент күләме, һәм шул ук рәвешле конкрет стандартлар күләме белән кире кагыла.
Бирелгән калибрлар белән чагыштыру аша, концентрация
Билгесез үрнәкләрдә антикиларны нейтральләштерә, аннары исәпләнә.
【Кирәкле материаллар, ләкин бирелмәгән】
1. Дистилизацияләнгән яки селкенелгән су
2. Проке торбалар: 10μЛ, 1008L, 2009л һәм 1 мл
3. Бер тапкыр атрибутик киңәшләр
4. 450нм белән сеңдергеч укырга сәләтле микроплия укучысы.
5. Сеңдергеч кәгазь
6. График кәгазе
7. Вортек миксер яки эквивалент
【Күрсәтү һәм саклау】
1. К2-Этаны булган трубаларда тупланган серум һәм плазма үрнәкләре бу комплект өчен кулланылырга мөмкин.
2. Пержилекләрне капларга кирәк һәм 48 сәгатькә кадәр 2 ° C кадәр сакларга мөмкин.
Ишәк алдыннан озын вакыт (6 айга кадәр) урнашкан үрнәкләр туңдырырга тиеш.
Кабат-кабат туңдыру циклыннан сакланыгыз.
Протокол
【Рейгент әзерләү】
1. Барлык реагентлар да суыткычтан чыгарылырга һәм кулланганчы бүлмә температурасына кире кайтырга рөхсәт ителергә тиеш
(20 ° - 25 ° C). Кулланудан соң суыткычта барлык реагентларны саклагыз.
2. Барлык үрнәкләр һәм контроль куллану алдыннан вортекл булырга тиеш.
3. HACE2-HRP чишелеше әзерләү: эретү hace2-hrp туплагыз
Буфер. Мәсәлән, 100 μL HACE2-HRP эретелүе 5.0ML HP эретү Буфер белән туплагыз
HACE2-HRP чишелеше ясагыз.
4. 1.
1:19 томның күләме. Мәсәлән, 20 мл 20 мл, 380 мл селкенелгән яки
Дистилляцияләнгән су 1 × мл 1 × мл.
【Тест процедурасы】
1. Аерым Тубаларда, Аликут әзерләнгән HACE2-HRP чишелеше.
2. 6 μL Калибраторны, билгесез үрнәкләр, һәр трубада сыйфат контроле өстәп, яхшы кушыла.
3.. Everyәр катнашманың 100 в9нгы 2 нче адымда тиешле микрополь скважиналарына әзерләнгән
светофор конфигурациясеннән.
3. Тәлинкәне тәлинкә белән каплагыз һәм 30 минут эчендә 37 ° C-ны кертегез.
4. Дүрт тапкыр, тәлинкәне чыгарып тәлинкәне якынча 300 μL's юу өчен якынча 300 μЛ.
5. Кәгазь сөлгедә тәлинкәдә калдык сөлгедә калдык сөлгеләнү өчен басыгыз.
6. 20 минутка 20 °л тәлалкасын 20 минут эчендә 20 - 25 ° C кертүне өстәгез.
7. Реакцияне туктатыр өчен һәр скважинаны 50 μLL туктату чишелешен өстәгез.
8. 10 минут эчендә микроплинг укучыны 450 NMда укыгыз (аксессуар буларак 630нм
югары төгәллек өчен тәкъдим ителә).