SARS-CoV-2 Nötrleştirici Antikor Tespit Kiti (ELISA)
【KULLANIM AMACI]
SARS-CoV-2 Nötrleştirici Antikor Tespit Kiti, insan serumu ve plazmasındaki SARS-CoV-2'ye karşı toplam nötralize edici antikorların niteliksel ve yarı niceliksel tespiti için tasarlanmış bir Rekabetçi Enzim Bağlantılı İmmünosorbent Testidir (ELISA). SARS-CoV-2 Nötralize Edici Antikor Tespit Kiti, SARS-CoV-2'ye karşı adaptif bağışıklık tepkisi olan bireylerin belirlenmesinde yardımcı olarak kullanılabilir; bu, yeni veya önceki enfeksiyonu gösterir. SARS-CoV-2 Nötrleştirici Antikor Tespit Kiti, akut SARS-CoV-2 enfeksiyonunu teşhis etmek için kullanılmamalıdır.
【GİRİİŞ]
Coronavirüs enfeksiyonları tipik olarak nötrleştirici antikor tepkilerini tetikler. COVID-19 hastalarında serokonversiyon oranları semptom başlangıcından sonraki 7. ve 14. günde sırasıyla %50 ve %100'dür. Mevcut bilgilere göre, kandaki karşılık gelen virüs nötrleştirici antikor, antikor etkinliğini belirlemek için bir hedef olarak kabul edilir ve nötrleştirici antikorun daha yüksek konsantrasyonu, daha yüksek koruma etkinliğini gösterir. Plak Azaltma Nötralizasyon Testi (PRNT), nötrleştirici antikorların tespitinde altın standart olarak kabul edilmektedir. Bununla birlikte, düşük verimi ve daha yüksek operasyon gereksinimi nedeniyle PRNT, büyük ölçekli serodiyagnoz ve aşı değerlendirmesi için pratik değildir. SARS-CoV-2 Nötralize Edici Antikor Tespit Kiti, kan örneğindeki nötrleştirici antikoru tespit edebilen ve bu tür antikorların konsantrasyon seviyelerine özel olarak erişebilen Rekabetçi Enzim Bağlantılı İmmünosorbent Testi (ELISA) metodolojisine dayanmaktadır.
【Test Prosedürü]
1. Ayrı tüplerde, hazırlanan hACE2-HRP Solüsyonunun 120μL'lik kısmını bölün.
2. Her tüpe 6 μL kalibratör, bilinmeyen örnekler ve kalite kontrolleri ekleyin ve iyice karıştırın.
3. Adım 2'de hazırlanan her karışımın 100μL'sini önceden tasarlanmış test konfigürasyonuna göre karşılık gelen mikroplaka kuyularına aktarın.
3. Plakayı Plaka Kapatıcı ile kapatın ve 37°C'de 60 dakika inkübe edin.
4. Plaka Kapatıcıyı çıkarın ve plakayı kuyucuk başına yaklaşık 300 μL 1x Yıkama Solüsyonu ile dört kez yıkayın.
5.Yıkama adımlarından sonra kuyucuklarda kalan sıvıyı çıkarmak için plakayı kağıt havlu üzerine hafifçe vurun.
6. Her kuyucuğa 100 μL TMB Solüsyonu ekleyin ve plakayı karanlıkta 20 – 25°C'de 20 dakika inkübe edin.
7.Reaksiyonu durdurmak için her kuyucuğa 50 μL Durdurma Solüsyonu ekleyin.
8. Mikroplak okuyucuda absorbansı 450 nm'de 10 dakika içinde okuyun (Daha yüksek hassasiyet performansı için aksesuar olarak 630 nm önerilir.
