Maymun Çiçeği Virüsü (MPV) Nükleik Asit Tespit Kiti

Kit, aşağıdaki bileşenler de dahil olmak üzere 48 testin veya kalite kontrolün işlenmesi için reaktifler içerir:

Reaktif A

ReaktifB

Not: Farklı parti numaralarındaki bileşenler birbirinin yerine kullanılamaz

【Saklama Koşulları ve Raf Ömrü]

1.Reaktif A/B 2-30°C'de saklanabilir ve raf ömrü 10 aydır.

2. Lütfen test tüpü kapağını yalnızca teste hazır olduğunuzda açın.

3.Son kullanma tarihi geçmiş test tüplerini kullanmayınız.

4. Sızıntı tespit tüpü kullanmayın.

【Uygulanabilir Enstrüman]

LC480 PCR analiz sistemi, Gentier 48E Otomatik PCR analiz sistemi, ABI7500 PCR analiz sistemi için uygundur.

【Örnek Gereksinimler]

1.Uygulanabilir numune türleri: boğaz sürüntü örnekleri.

2. Örnekleme çözümü:Doğrulamanın ardından numune toplama için Hangzhou Testsea biyoloji tarafından üretilen normal salin veya Virüs koruma tüpünün kullanılması tavsiye edilir.

boğaz çubuğu:tek kullanımlık steril numune alma çubuğuyla iki taraflı faringeal bademcikleri ve arka faringeal duvarı silin, çubuğu 3 mL numune alma solüsyonu içeren tüpe batırın, kuyruğu atın ve tüp kapağını sıkın.

3. Numune depolama ve teslimatı:Test edilecek numuneler mümkün olan en kısa sürede test edilmelidir.Taşıma sıcaklığı 2~8°C'de tutulmalıdır. 24 saat içinde test edilebilecek numuneler 2°C~8°C'de saklanabilir ve eğer numuneler 24 saat içinde test edilemiyorsa, bu sıcaklıktan daha düşük veya eşit sıcaklıkta saklanmalıdır. -70°C'ye kadar (-70°C'lik saklama koşulu yoksa, geçici olarak -20°C'de saklanabilir), tekrar etmekten kaçının

donma ve çözülme.

4. Numunenin uygun şekilde toplanması, saklanması ve taşınması bu ürünün performansı açısından kritik öneme sahiptir.

【Test metodu]

1. Örnek işleme ve örnek ekleme

1.1 Örnek işleme

Yukarıdaki örnekleme solüsyonunu örneklerle karıştırdıktan sonra, DNA salma reaktifi tüpüne 30μL örnek alın ve eşit şekilde karıştırın.

1.2 Yükleme

20μL sulandırma reaktifini alın ve MPV tespit reaktifine ekleyin, yukarıda işlenmiş örnekten 5μL ekleyin (Pozitif kontrol ve negatif kontrol, örneklere paralel olarak işlenecektir), tüp kapağını kapatın, 2000 rpm'de 10 dakika santrifüj edin. saniye.

2. PCR amplifikasyonu

2.1 Hazırlanan PCR plakasını/tüplerini floresans PCR cihazına yükleyin, Negatif kontrol ve pozitif kontrol her test için ayarlanacaktır.

2.2 Floresan kanal ayarı:

1)MPV tespiti için FAM kanalını seçin;

2) Dahili kontrol gen tespiti için HEX/VIC kanalını seçin;

3.Sonuç analizi

Taban çizgisini negatif kontrolün floresan eğrisinin en yüksek noktasının üzerine ayarlayın.

4.Kalite kontrolü

4.1 Negatif kontrol: FAM, HEX/VIC kanalında Ct değeri algılanmadı veya Ct>40;

4.2 Pozitif kontrol: FAM, HEX/VIC kanalında, Ct≤40;

4.3 Yukarıdaki şartlar aynı deneyde yerine getirilmelidir, aksi halde deney sonuçları geçersiz olur ve deneyin tekrarlanması gerekir.

【Değerin kesilmesi]

Bir numune şu durumlarda pozitif kabul edilir: Hedef sekans Ct≤40, Dahili kontrol geni Ct≤40.

【Sonuçların yorumlanması]

Kalite kontrolü geçtikten sonra kullanıcılar, HEX/VIC kanalındaki her örnek için bir amplifikasyon eğrisi olup olmadığını kontrol etmelidir; eğer varsa ve Ct≤40 ise, bu, dahili kontrol geninin başarıyla amplifiye edildiğini ve bu özel testin geçerli olduğunu gösterir.Kullanıcılar takip analizine devam edebilir:

3. Dahili kontrol geninin amplifikasyonu başarısız olan numuneler için (HEX/VIC

kanal, Ct>40 veya amplifikasyon eğrisi yok), düşük Viral yük veya PCR inhibitörünün varlığı başarısızlığın nedeni olabilir; inceleme numune koleksiyonundan itibaren tekrarlanmalıdır;

4.Pozitif numuneler ve kültürlenmiş virüs için iç kontrol sonuçları etkilenmez;

Negatif olarak test edilen numuneler için iç kontrolün pozitif olarak test edilmesi gerekir, aksi takdirde genel sonuç geçersiz olur ve numune toplama adımından başlayarak incelemenin tekrarlanması gerekir.