Monkeypox Virus (MPV) Nucleic Acid Detection Kit

Ang kit ay naglalaman ng mga reagents para sa pagpoproseso ng 48 na pagsusuri o kontrol sa kalidad, kabilang ang mga sumusunod na bahagi:

Reagent A

ReagentB

Tandaan: Ang mga bahagi ng iba't ibang numero ng batch ay hindi maaaring palitan ng gamit

【Mga Kundisyon sa Pag-iimbak at Buhay ng Shelf】

1. Ang reagent A/B ay maaaring itago sa 2-30°C, at ang shelf life ay 10 buwan.

2. Mangyaring buksan lamang ang takip ng test tube kapag handa ka na para sa pagsusulit.

3.Huwag gumamit ng mga test tube na lampas sa petsa ng pag-expire.

4.Huwag gumamit ng tumutulo na detection tube.

【Naaangkop na Instrumento】

Angkop para sa Angkop para sa LC480 PCR analysis system, Gentier 48E Automatic PCR analysis system, ABI7500 PCR analysis system.

【Mga Sample na Kinakailangan】

1. Naaangkop na mga uri ng sample: mga sample ng pamunas sa lalamunan.

2. Sampling na solusyon:Pagkatapos ng pag-verify, inirerekomendang gumamit ng normal na saline o Virus preservation tube na ginawa ng Hangzhou Testsea biology para sa pagkolekta ng sample.

pamunas sa lalamunan:punasan ang bilateral pharyngeal tonsils at posterior pharyngeal wall ng disposable sterile sampling swab, ilubog ang pamunas sa tubo na naglalaman ng 3mL sampling solution, itapon ang buntot, at higpitan ang takip ng tubo.

3.Sample na imbakan at paghahatid:Ang mga sample na susuriin ay dapat masuri sa lalong madaling panahon.Ang temperatura ng transportasyon ay dapat panatilihin sa 2~8 ℃. Ang mga sample na maaaring masuri sa loob ng 24 na oras ay maaaring maimbak sa 2 ℃~8 ℃ at kung ang mga sample ay hindi masuri sa loob ng 24 na oras, ito ay dapat na naka-imbak sa mas mababa sa o katumbas hanggang -70 ℃ (kung walang kondisyon ng imbakan na -70 ℃, maaari itong pansamantalang itago sa -20 ℃), iwasan ang paulit-ulit

pagyeyelo at pagtunaw.

4. Ang wastong pagkolekta, pag-iimbak, at transportasyon ng sample ay mahalaga sa pagganap ng produktong ito.

【Paraan ng Pagsubok】

1. Pagproseso ng sample at pagdaragdag ng sample

1.1 Pagproseso ng sample

Pagkatapos ihalo ang sampling solution sa itaas sa mga sample, kumuha ng 30μL ng sample sa DNA release reagent tube at ihalo ito nang pantay-pantay.

1.2 Naglo-load

Kumuha ng 20μL ng reconstitution reagent at idagdag ito sa MPV detection reagent, magdagdag ng 5μL ng nasa itaas na naprosesong sample (Ang positibong kontrol at negatibong kontrol ay dapat iproseso nang kahanay ng mga sample), takpan ang takip ng tubo, i-centrifuge ito sa 2000rpm para sa 10 segundo.

2. Pagpapalakas ng PCR

2.1 I-load ang inihandang PCR plate/tube sa fluorescence PCR instrument, Negatibong kontrol at positibong kontrol ang dapat itakda para sa bawat pagsubok.

2.2 Setting ng fluorescent channel:

1)Pumili ng FAM channel para sa MPV detection；

2)Pumili ng HEX/VIC channel para sa internal control gene detection;

3.Pagsusuri ng mga resulta

Itakda ang base line sa itaas ng pinakamataas na punto ng fluorescent curve ng negatibong kontrol.

4. Kontrol ng kalidad

4.1 Negatibong kontrol：Walang Ct value na nakita sa FAM、HEX/VIC channel, o Ct＞40；

4.2 Positibong kontrol：Sa FAM,HEX/VIC channel, Ct≤40；

4.3 Ang mga kinakailangan sa itaas ay dapat matugunan sa parehong eksperimento, kung hindi, ang mga resulta ng pagsubok ay hindi wasto at ang eksperimento ay kailangang ulitin.

【Putulin ang halaga】

Ang isang sample ay itinuturing na positibo kapag: Target na sequence Ct≤40, Ang internal control gene Ct≤40.

【Interpretasyon ng mga resulta】

Kapag naipasa na ang quality control, dapat suriin ng mga user kung mayroong amplification curve para sa bawat sample sa HEX/VIC channel, kung mayroon at may Ct≤40, ipinapahiwatig nito na matagumpay na napalaki ang internal control gene at valid ang partikular na pagsubok na ito.Maaaring magpatuloy ang mga user sa follow up analysis:

3. Para sa mga sample na may amplification ng internal control gene na nabigo (HEX/VIC

channel, Ct ＞40, o walang amplification curve), mababang Viral load o ang pagkakaroon ng PCR inhibitor ay maaaring ang dahilan ng pagkabigo, ang pagsusuri ay dapat na paulit-ulit mula sa koleksyon ng ispesimen;

4. Para sa mga positibong sample at kulturang virus, ang mga resulta ng panloob na kontrol ay hindi nakakaapekto;

Para sa mga sample na nasubok na negatibo, ang panloob na kontrol ay kailangang masuri na positibo kung hindi ang pangkalahatang resulta ay hindi wasto at ang pagsusuri ay kailangang ulitin, simula sa hakbang sa pagkolekta ng ispesimen