Maýmynlar wirusy (MPV) Nuklein kislotasyny kesgitlemek toplumy

Kitapda aşakdaky synaglary goşmak bilen 48 synagy gaýtadan işlemek ýa-da hil gözegçiligi üçin reagentler bar:

Reagent A.

ReagentB

Bellik: Dürli partiýa sanlarynyň böleklerini biri-biri bilen ulanyp bolmaýar

【Saklamak şertleri we ýaramlylyk möhleti】

1.Ragent A / B 2-30 ° C-de saklanyp bilner we ýaramlylyk möhleti 10 aý.

2. Synag turbasynyň gapagyny diňe synaga taýyn bolanyňyzda açyň.

3. Synag turbalaryny möhletiniň gutarýan möhletinden artyk ulanmaň.

4. Syzdyryjy kesgitleýji turbany ulanmaň.

【Ulanylýan gural】

LC480 PCR derňew ulgamy, Gentier 48E Awtomatiki PCR derňew ulgamy, ABI7500 PCR derňew ulgamy üçin amatly.

【Nusga talaplary】

1. Ulanylýan nusga görnüşleri: bokurdak çişleri.

2.Saýlaw çözgüdi:Barlagdan soň, nusga ýygnamak üçin Hangzhou Testsea biologiýasy tarapyndan öndürilen adaty duzly ýa-da Wirusy saklaýan turbany ulanmak maslahat berilýär.

bokurdak çalmak:Ikitaraplaýyn faringeal tonzillerini we yzky farynge diwaryny bir gezek ulanylýan steril nusga alma süpürgiç bilen süpüriň, 3mL nusga alma ergini bolan turba çümdüriň, guýrugyny taşlaň we turbanyň gapagyny berkidiň.

3. Saklamak we eltip bermek:Synag ediljek nusgalary mümkin boldugyça gysga wagtda barlamaly.Daşaýyş temperaturasy 2 ~ 8 at derejesinde saklanmalydyr. 24 sagadyň dowamynda synag edilip bilinjek nusgalary 2 ℃ ~ 8 at saklap bolýar we nusgalary 24 sagadyň dowamynda synagdan geçirip bolmaýan bolsa, az ýa-da deň derejede saklanmalydyr. -70 to çenli (-70 of saklaýyş ýagdaýy ýok bolsa, -20 at wagtlaýyn saklanyp bilner), gaýtalanmazlyk

doňdurma we eremek.

4. Dogry nusga ýygnamak, saklamak we daşamak bu önümiň öndürijiligi üçin möhümdir.

【Synag usuly】

1.Saýlaw gaýtadan işlemek we nusga goşmak

1.1 Nusga gaýtadan işlemek

Aboveokardaky nusga alma çözgüdini nusgalar bilen garyşdyranyňyzdan soň, 30μL nusgany DNK goýberýän reagent turbasyna alyň we deň derejede garmaly.

1.2 adingüklemek

Dikeldiş reagentinden 20μL alyň we MPV kesgitleýji reagentine goşuň, ýokardaky gaýtadan işlenen nusgadan 5μL goşuň (Oňyn gözegçilik we otrisatel gözegçilik nusgalar bilen paralel işlener), turbanyň gapagyny ýapyň, 2000rpm-de 10-a sentrifugasiýa ediň sekunt.

2. PCR güýçlendirmek

2.1 Taýýarlanan PCR plastinkasyny / turbalaryny floresan PCR guralyna ýükläň, her synag üçin negatiw gözegçilik we oňyn gözegçilik kesgitlener.

2.2 Floresan kanal sazlamasy ：

1) MPV kesgitlemek üçin FAM kanalyny saýlaň ；

2) Içerki gözegçilik genini kesgitlemek üçin HEX / VIC kanalyny saýlaň ；

3. Netijeleriň derňewi

Esasy çyzgyny otrisatel dolandyryşyň floresan egrisiniň iň ýokary nokadyndan düzüň.

4. Hil gözegçiligi

4.1 ativearamaz gözegçilik F FAM 、 HEX / VIC kanalynda ýa-da Ct ＞ 40 C Ct bahasy tapylmady

4.2 Oňyn gözegçilik F FAM-da 、 HEX / VIC kanalynda, Ct≤40 ；

4.3 aboveokardaky talaplar şol bir synagda kanagatlandyrylmalydyr, ýogsam synag netijeleri nädogry we synag gaýtalanmalydyr.

【Bahany kesiň】

Mysal üçin oňyn hasaplanýar: Maksat yzygiderliligi Ct≤40, Içerki gözegçilik geni Ct≤40.

【Netijeleri düşündirmek】

Hil gözegçiligi geçenden soň, ulanyjylar HEX / VIC kanalynda her nusga üçin güýçlendiriji egriniň bardygyny ýa-da ýokdugyny barlamaly, Ct≤40 bar bolsa we içerki gözegçilik geniniň üstünlikli güýçlendirilendigini we bu aýratyn synagyň dogrudygyny görkezýär.Ulanyjylar indiki derňewi dowam etdirip bilerler:

3. Içerki gözegçilik genini güýçlendirmek bilen nusgalar üçin şowsuz boldy (HEX / VIC

kanal, Ct ＞ 40, ýa-da güýçlendiriji egrilik ýok), pes wirusly ýük ýa-da PCR inhibitorynyň bolmagy şowsuzlygyň sebäbi bolup biler, synag nusgalary ýygyndysyndan gaýtalanmalydyr;

4. Oňyn nusgalar we medeniýetli wirus üçin içerki gözegçilik netijeleri täsir etmeýär;

Negativearamaz synagdan geçen nusgalar üçin içerki gözegçilik polo positiveitel synagdan geçirilmeli, ýogsam umumy netije nädogry we synag nusgalaryny ýygnamak ädiminden başlap gaýtalanmaly.