SARS-COV-2 ชุดตรวจจับแอนติบอดีเป็นกลาง （ELISA)

-การใช้งานที่ตั้งใจไว้-

ชุดตรวจจับแอนติบอดี SARS-COV-2 เป็น neutralizing antibody เป็น immunosorbent assay (ELISA) ที่มีการแข่งขันสำหรับการตรวจจับคุณภาพและการตรวจจับแอนติบอดีแบบเป็นกลางรวมถึง SARS-COV-2 ในซีรั่มของมนุษย์และพลาสมา ชุดตรวจจับแอนติบอดี SARS- COV-2 สามารถใช้เป็นตัวช่วยในการระบุบุคคลที่มีการตอบสนองทางภูมิคุ้มกันแบบปรับตัวต่อ SARS- COV-2 ซึ่งบ่งบอกถึงการติดเชื้อล่าสุดหรือก่อนหน้านี้ ชุดตรวจจับแอนติบอดี SARS-COV-2 ไม่ควรใช้ในการวินิจฉัยการติดเชื้อ SARS-COV-2 เฉียบพลัน

-การแนะนำ-

การติดเชื้อ Coronavirus มักจะทำให้เกิดการตอบสนองของแอนติบอดีที่เป็นกลาง อัตรา seroconversion ในผู้ป่วย COVID-19 คือ 50% และ 100% ในวันที่ 7 และ 14 โพสต์อาการเริ่มมีอาการตามลำดับ เพื่อนำเสนอความรู้แอนติบอดีที่เป็นกลางของไวรัสที่สอดคล้องกันในเลือดเป็นที่ยอมรับว่าเป็นเป้าหมายในการกำหนดประสิทธิภาพของแอนติบอดีและความเข้มข้นที่สูงขึ้นของแอนติบอดีที่เป็นกลางแสดงถึงประสิทธิภาพการป้องกันที่สูงขึ้น การทดสอบการวางตัวเป็นกลางของคราบจุลินทรีย์ (PRNT) ได้รับการยอมรับว่าเป็นมาตรฐานทองคำสำหรับการตรวจจับแอนติบอดีที่เป็นกลาง อย่างไรก็ตามเนื่องจากปริมาณงานที่ต่ำและความต้องการที่สูงขึ้นสำหรับการดำเนินงาน PRNT จึงไม่สามารถใช้งานได้สำหรับ serodiagnosis ขนาดใหญ่และการประเมินวัคซีน ชุดตรวจจับแอนติบอดี SARS-COV-2 เป็นกลางขึ้นอยู่กับวิธีการทดสอบอิมมูโนซอร์เบนท์ (ELISA) ที่มีการแข่งขันซึ่งสามารถตรวจจับแอนติบอดีที่เป็นกลางในตัวอย่างเลือดและเข้าถึงระดับความเข้มข้นของแอนติบอดีชนิดนี้เป็นพิเศษ

 -ขั้นตอนการทดสอบ-

1. ในหลอดที่แยกต่างหาก, aliquot 120μlของสารละลาย HACE2-HRP ที่เตรียมไว้

2. ADDD 6 μlของเครื่องสอบเทียบตัวอย่างที่ไม่รู้จักการควบคุมคุณภาพในแต่ละหลอดและผสมให้เข้ากัน

3. การถ่ายโอน100μlของแต่ละส่วนผสมที่เตรียมไว้ในขั้นตอนที่ 2 เป็นหลุมไมโครเพลทที่สอดคล้องกันตามการกำหนดค่าการทดสอบที่ออกแบบไว้ล่วงหน้า

3. ปิดจานด้วยแผ่นปิดผนึกแผ่นและฟักตัวที่ 37 ° C เป็นเวลา 60 นาที

4. ลบเครื่องซีลแผ่นและล้างจานด้วยสารละลายประมาณ 300 ไมโครลิตรของ 1 ×ล้างต่อหลุมสี่ครั้ง

5. แตะจานบนกระดาษเช็ดมือเพื่อกำจัดของเหลวที่เหลือในบ่อน้ำหลังจากล้างขั้นตอน

6. เพิ่ม 100 μlของสารละลาย TMB ไปยังแต่ละหลุมและบ่มจานในที่มืดที่ 20 - 25 ° C เป็นเวลา 20 นาที

7. เพิ่ม 50 μlของการแก้ปัญหาหยุดแต่ละหลุมเพื่อหยุดปฏิกิริยา

8. อ่านการดูดกลืนแสงในเครื่องอ่านไมโครเพลทที่ 450 นาโนเมตรภายใน 10 นาที (630Nm เป็นอุปกรณ์เสริมที่แนะนำสำหรับประสิทธิภาพความแม่นยำที่สูงขึ้น