ชุดตรวจกรดนิวคลีอิกไวรัส Monkeypox (MPV)

ชุดประกอบด้วยรีเอเจนต์สำหรับการประมวลผลการทดสอบหรือการควบคุมคุณภาพ 48 รายการ รวมถึงส่วนประกอบต่อไปนี้:

รีเอเจนต์ A

รีเอเจนต์B

หมายเหตุ: ส่วนประกอบของหมายเลขแบทช์ที่แตกต่างกันไม่สามารถใช้แทนกันได้

-สภาพการเก็บรักษาและอายุการเก็บรักษา-

1.Reagent A/B สามารถเก็บไว้ที่อุณหภูมิ 2-30°C และอายุการเก็บรักษา 10 เดือน

2.โปรดเปิดฝาครอบหลอดทดลองเฉพาะเมื่อคุณพร้อมสำหรับการทดสอบเท่านั้น

3.ห้ามใช้หลอดทดลองเกินวันหมดอายุ

4.อย่าใช้ท่อตรวจจับการรั่ว

-เครื่องมือที่ใช้บังคับ-

เหมาะสำหรับ เหมาะสำหรับระบบวิเคราะห์ LC480 PCR, ระบบวิเคราะห์ PCR อัตโนมัติ Gentier 48E, ระบบวิเคราะห์ PCR ABI7500

-ข้อกำหนดตัวอย่าง-

1.ประเภทตัวอย่างที่เกี่ยวข้อง: ตัวอย่างผ้าเช็ดลำคอ

2. โซลูชันการสุ่มตัวอย่าง:หลังจากการตรวจสอบแล้ว ขอแนะนำให้ใช้น้ำเกลือปกติหรือหลอดเก็บรักษาไวรัสที่ผลิตโดย Hangzhou Testsea Biology ในการเก็บตัวอย่าง

ไม้กวาดคอ:เช็ดต่อมทอนซิลคอหอยทวิภาคีและผนังคอหอยด้านหลังด้วยสำลีเก็บตัวอย่างปลอดเชื้อแบบใช้แล้วทิ้ง จุ่มสำลีลงในหลอดที่บรรจุสารละลายเก็บตัวอย่างขนาด 3 มล. ทิ้งส่วนหางออก และขันฝาครอบหลอดให้แน่น

3.การจัดเก็บตัวอย่างและการจัดส่ง:ตัวอย่างที่จะทดสอบควรได้รับการทดสอบโดยเร็วที่สุดควรเก็บอุณหภูมิในการขนส่งไว้ที่ 2~8°C ตัวอย่างที่สามารถทดสอบได้ภายใน 24 ชั่วโมงสามารถเก็บไว้ที่ 2°C~8°C และหากไม่สามารถทดสอบตัวอย่างได้ภายใน 24 ชั่วโมง ควรเก็บไว้ที่อุณหภูมิน้อยกว่าหรือเท่ากับ ถึง -70°C (หากไม่มีสภาวะการเก็บรักษาที่ -70°C สามารถเก็บไว้ที่ -20°C ชั่วคราวได้) หลีกเลี่ยงการทำซ้ำ

การแช่แข็งและการละลาย

4. การเก็บตัวอย่าง การจัดเก็บ และการขนส่งอย่างเหมาะสมมีความสำคัญต่อประสิทธิภาพของผลิตภัณฑ์นี้

-วิธีการทดสอบ-

1.การประมวลผลตัวอย่างและการเติมตัวอย่าง

1.1 การประมวลผลตัวอย่าง

หลังจากผสมสารละลายเก็บตัวอย่างข้างต้นกับตัวอย่างแล้ว ให้นำตัวอย่าง 30μL ลงในหลอดรีเอเจนต์ที่ปล่อย DNA และผสมให้เข้ากัน

1.2 กำลังโหลด

นำรีเอเจนต์สำหรับคืนสภาพ 20μL แล้วเติมลงในรีเอเจนต์การตรวจจับ MPV เติม 5μL ของตัวอย่างที่ผ่านการประมวลผลข้างต้น (กลุ่มควบคุมเชิงบวกและกลุ่มควบคุมเชิงลบจะต้องดำเนินการควบคู่ไปกับตัวอย่าง) ปิดฝาหลอด แล้วปั่นแยกที่ 2000 รอบต่อนาทีเป็นเวลา 10 วินาที

2. การขยาย PCR

2.1 ใส่แผ่น/ท่อ PCR ที่เตรียมไว้ไปยังเครื่องมือ PCR เรืองแสง โดยจะต้องตั้งค่าการควบคุมเชิงลบและการควบคุมเชิงบวกสำหรับการทดสอบแต่ละครั้ง

2.2 การตั้งค่าช่องฟลูออเรสเซนต์：

1) เลือกช่อง FAM สำหรับการตรวจจับ MPV;

2) เลือกช่อง HEX/VIC สำหรับการตรวจจับยีนควบคุมภายใน

3.การวิเคราะห์ผลลัพธ์

ตั้งค่าเส้นฐานเหนือจุดสูงสุดของเส้นโค้งเรืองแสงของตัวควบคุมเชิงลบ

4.การควบคุมคุณภาพ

4.1 การควบคุมเชิงลบ: ไม่พบค่า Ct ในช่อง FAM、 HEX/VIC หรือ Ct > 40;

4.2 การควบคุมเชิงบวก：ในช่อง FAM、HEX/VIC, Ct≤40;

4.3 ควรปฏิบัติตามข้อกำหนดข้างต้นในการทดลองเดียวกัน มิฉะนั้นผลการทดสอบไม่ถูกต้องและจำเป็นต้องทำการทดสอบซ้ำ

-ตัดค่า-

ตัวอย่างจะถือว่าเป็นบวกเมื่อ: ลำดับเป้าหมาย Ct≤40 ยีนควบคุมภายใน Ct≤40

-การตีความผลลัพธ์-

เมื่อผ่านการควบคุมคุณภาพแล้ว ผู้ใช้ควรตรวจสอบว่ามีกราฟการขยายสำหรับแต่ละตัวอย่างในช่อง HEX/VIC หรือไม่ หากมีและด้วย Ct≤40 แสดงว่ายีนควบคุมภายในขยายได้สำเร็จ และการทดสอบเฉพาะนี้ถูกต้องผู้ใช้สามารถดำเนินการวิเคราะห์ติดตามผลได้:

3.สำหรับตัวอย่างที่มีการขยายยีนควบคุมภายในล้มเหลว (HEX/VIC

Channel, Ct>40 หรือไม่มีเส้นโค้งการขยายสัญญาณ) ปริมาณไวรัสต่ำ หรือการมีอยู่ของสารยับยั้ง PCR อาจเป็นสาเหตุของความล้มเหลว ควรตรวจสอบซ้ำจากการเก็บตัวอย่าง

4.สำหรับตัวอย่างที่เป็นบวกและไวรัสที่เพาะเลี้ยง ผลลัพธ์ของการควบคุมภายในจะไม่ส่งผลกระทบต่อ

สำหรับตัวอย่างที่ทดสอบเป็นลบ การควบคุมภายในจะต้องได้รับการทดสอบในเชิงบวก มิฉะนั้นผลลัพธ์โดยรวมจะไม่ถูกต้องและจำเป็นต้องทำการตรวจสอบซ้ำ โดยเริ่มจากขั้นตอนการเก็บตัวอย่าง