Маҷмӯаи муайянкунии кислотаи нуклеинӣ вируси маймун (MPV).

Маҷмӯа дорои реагентҳо барои коркарди 48 санҷиш ё назорати сифат, аз ҷумла ҷузъҳои зерин мебошад:

Реактив А

РеактивB

Эзоҳ: Қисмҳои рақамҳои гуногуни партия наметавонанд ба ҷои ҳамдигар истифода шаванд

【Шароити нигоҳдорӣ ва мӯҳлати нигоҳдорӣ】

1.Reagent A/B-ро дар ҳарорати 2-30°C нигоҳ доштан мумкин аст ва мӯҳлати нигоҳдорӣ 10 моҳ аст.

2. Лутфан, сарпӯши пробиркаро танҳо вақте кушоед, ки шумо ба санҷиш омодаед.

3.Турбаҳои озмоиширо пас аз гузаштани мӯҳлати истифода истифода набаред.

4.Тубури ошкоркунандаи ихроҷро истифода набаред.

【Воситаи татбиқшаванда】

Муносиб барои Муносиб барои системаи таҳлили PCR LC480, системаи таҳлили автоматии Gentier 48E, системаи таҳлили PCR ABI7500.

【Талаботи намунавӣ】

1.Намудҳои намунаи татбиқшаванда: намунаҳои тампонҳои гулӯ.

2. Ҳалли намунавӣ:Пас аз санҷиш, тавсия дода мешавад, ки барои ҷамъоварии намуна аз шӯри муқаррарӣ ё найчаи нигоҳдории вирус, ки аз ҷониби Hangzhou Testsea biology истеҳсол шудааст, истифода шавад.

тампончаи гулӯ:бодомакҳои дуҷонибаи ҳалқ ва девори ақибро бо тампони намунаи якдафъаина хушк кунед, тампонро ба найчаи дорои маҳлули намунаи 3 мл ғӯтонед, думашро партоед ва сарпӯши найчаро маҳкам кунед.

3. Нигоҳдорӣ ва таҳвили намуна:Намунаҳое, ки бояд санҷида шаванд, бояд ҳарчи зудтар санҷида шаванд.Ҳарорати интиқол бояд дар 2 ~ 8 ℃ нигоҳ дошта шавад. Намунаҳое, ки дар давоми 24 соат озмоиш карда мешаванд, метавонанд дар 2 ℃ ~ 8 ℃ нигоҳ дошта шаванд ва агар намунаҳо дар давоми 24 соат озмоиш карда нашаванд, он бояд дар камтар аз ё баробар нигоҳ дошта шавад. то -70 ℃ (агар ҳолати нигоҳдории -70 ℃ мавҷуд набошад, онро дар -20 ℃ муваққатан нигоҳ доштан мумкин аст), такрор нашавед

ях кардан ва об кардан.

4.Ҷамъоварии дурусти намуна, нигоҳдорӣ ва интиқол барои иҷрои ин маҳсулот муҳиманд.

【Усули санҷиш】

1.Коркарди намуна ва илова кардани намуна

1.1 Коркарди намуна

Пас аз омехта кардани маҳлули дар боло гирифташуда бо намунаҳо, 30 мкл намунаро ба найчаи реагенти ДНК гузоред ва онро баробар омехта кунед.

1.2 Боркунӣ

20 мкл реагенти барқарорсозӣ гиред ва онро ба реагенти муайянкунандаи MPV илова кунед, 5 мкл намунаи дар боло коркардшударо илова кунед (Назорати мусбӣ ва манфӣ бояд дар баробари намунаҳо коркард карда шаванд), сарпӯши қубурро пӯшонед, онро дар 2000 rpm барои 10 центрифуга кунед. сония.

2. Амплификацияи ПТР

2.1 Плитаи/найҳои ПТР-и омодашударо ба асбоби флуоресцентии ПЗР бор кунед. Барои ҳар як санҷиш назорати манфӣ ва назорати мусбат муқаррар карда мешавад.

2.2 Танзими канали флуоресцентӣ:

1) Барои муайян кардани MPV канали FAM-ро интихоб кунед;

2) Барои муайян кардани генҳои назорати дохилӣ канали HEX/VIC-ро интихоб кунед;

3. Таҳлили натиҷаҳо

Хатти асосиро болотар аз баландтарин нуқтаи каҷи флуоресценти назорати манфӣ насб кунед.

4. Назорати сифат

4.1 Назорати манфӣ: Дар канали FAM, HEX/VIC ё Ct＞40； арзиши Ct муайян карда нашудааст.

4.2 Назорати мусбӣ: Дар канали FAM, HEX/VIC, Ct≤40；

4.3 Талаботи дар боло зикршуда бояд дар ҳамон озмоиш қонеъ карда шаванд, дар акси ҳол натиҷаҳои санҷиш беэътибор дониста мешаванд ва таҷрибаро такрор кардан лозим меояд.

【Арзишро буред】

Намуна дар ҳолатҳои зерин мусбат ҳисобида мешавад: пайдарпаии мақсаднок Ct≤40, Ген назорати дохилӣ Ct≤40.

【Тафсири натиҷаҳо】

Пас аз гузаштани назорати сифат, корбарон бояд тафтиш кунанд, ки оё дар канали HEX/VIC барои ҳар як намуна хати пурқувваткунӣ мавҷуд аст, агар мавҷуд бошад ва бо Ct≤40, ин нишон медиҳад, ки гени назорати дохилӣ бомуваффақият тақвият ёфтааст ва ин санҷиш дуруст аст.Истифодабарандагон метавонанд ба таҳлили минбаъда идома диҳанд:

3.Барои намунаҳое, ки ампификацияи гени назорати дохилӣ ноком шуданд (HEX/VIC

канал, Ct＞40, ё каҷи пурқувват нест), сарбории пасти вирусӣ ё мавҷудияти ингибитори ПТР метавонад сабаби нокомӣ бошад, ташхис бояд аз ҷамъоварии намуна такрор шавад;

4. Барои намунаҳои мусбӣ ва вируси парваришшуда, натиҷаҳои назорати дохилӣ таъсир намерасонанд;

Барои намунаҳое, ки манфӣ санҷида шудаанд, назорати дохилӣ бояд мусбат санҷида шавад, вагарна натиҷаи умумӣ беэътибор аст ва аз марҳилаи ҷамъоварии намуна сар карда, санҷиш такрор карда мешавад.