SARS-CoV-2 న్యూట్రలైజింగ్ యాంటీబాడీ డిటెక్షన్ కిట్ (ELISA)

【ఉద్దేశించిన ఉపయోగం】

SARS-CoV-2 న్యూట్రలైజింగ్ యాంటీబాడీ డిటెక్షన్ కిట్ అనేది ఒక కాంపిటేటివ్ ఎంజైమ్-లింక్డ్ ఇమ్యునోసోర్బెంట్ అస్సే (ELISA) మానవ సీరం మరియు ప్లాస్మాలో SARS-CoV-2కి మొత్తం తటస్థీకరించే ప్రతిరోధకాలను గుణాత్మకంగా మరియు సెమీ-క్వాంటిటేటివ్ డిటెక్షన్ కోసం ఉద్దేశించబడింది. SARS- CoV-2 న్యూట్రలైజింగ్ యాంటీబాడీ డిటెక్షన్ కిట్‌ను SARS- CoV-2కి అనుకూల రోగనిరోధక ప్రతిస్పందన కలిగిన వ్యక్తులను గుర్తించడంలో సహాయంగా ఉపయోగించవచ్చు, ఇది ఇటీవలి లేదా ముందస్తు సంక్రమణను సూచిస్తుంది. తీవ్రమైన SARS-CoV-2 ఇన్ఫెక్షన్‌ని నిర్ధారించడానికి SARS-CoV-2 న్యూట్రలైజింగ్ యాంటీబాడీ డిటెక్షన్ కిట్‌ని ఉపయోగించకూడదు.

【పరిచయం】

కరోనావైరస్ ఇన్ఫెక్షన్లు సాధారణంగా న్యూట్రలైజింగ్ యాంటీబాడీ ప్రతిస్పందనలను ప్రేరేపిస్తాయి. కోవిడ్-19 రోగులలో సెరోకన్వర్షన్ రేట్లు వరుసగా 7వ రోజు మరియు 14వ రోజు లక్షణాల ప్రారంభానికి 50% మరియు 100% ఉంటాయి. జ్ఞానాన్ని అందించడానికి, రక్తంలో సంబంధిత వైరస్ న్యూట్రలైజింగ్ యాంటీబాడీ యాంటీబాడీ సామర్థ్యాన్ని నిర్ణయించడానికి లక్ష్యంగా గుర్తించబడింది మరియు న్యూట్రలైజింగ్ యాంటీబాడీ యొక్క అధిక సాంద్రత అధిక రక్షణ సామర్థ్యాన్ని సూచిస్తుంది. ప్లేక్ రిడక్షన్ న్యూట్రలైజేషన్ టెస్ట్ (PRNT) తటస్థీకరించే ప్రతిరోధకాలను గుర్తించడానికి బంగారు ప్రమాణంగా గుర్తించబడింది. అయినప్పటికీ, దాని తక్కువ నిర్గమాంశ మరియు ఆపరేషన్ కోసం అధిక అవసరం కారణంగా, పెద్ద స్థాయి సెరోడయాగ్నోసిస్ మరియు టీకా మూల్యాంకనం కోసం PRNT ఆచరణాత్మకమైనది కాదు. SARS-CoV-2 న్యూట్రలైజింగ్ యాంటీబాడీ డిటెక్షన్ కిట్ కాంపిటేటివ్ ఎంజైమ్-లింక్డ్ ఇమ్యునోసోర్బెంట్ అస్సే (ELISA) మెథడాలజీపై ఆధారపడి ఉంటుంది, ఇది రక్త నమూనాలోని న్యూట్రలైజింగ్ యాంటీబాడీని గుర్తించగలదు అలాగే ఈ రకమైన యాంటీబాడీ యొక్క ఏకాగ్రత స్థాయిలను ప్రత్యేకంగా యాక్సెస్ చేయగలదు.

 【పరీక్ష విధానం】

1.ప్రత్యేక ట్యూబ్‌లలో, సిద్ధం చేసిన hACE2-HRP సొల్యూషన్‌లో 120μL ఆల్కాట్.

2.ప్రతి ట్యూబ్‌లో 6 μL కాలిబ్రేటర్‌లు, తెలియని నమూనాలు, నాణ్యత నియంత్రణలను జోడించి బాగా కలపండి.

3.ముందుగా రూపొందించిన పరీక్ష కాన్ఫిగరేషన్ ప్రకారం స్టెప్ 2లో తయారుచేసిన ప్రతి మిశ్రమం యొక్క 100μLని సంబంధిత మైక్రోప్లేట్ బావుల్లోకి బదిలీ చేయండి.

3.ప్లేట్ సీలర్‌తో ప్లేట్‌ను కప్పి, 37°C వద్ద 60 నిమిషాల పాటు పొదిగించండి.

4.ప్లేట్ సీలర్‌ను తీసివేసి, ఒక్కో బావికి సుమారు 300 μL 1× వాష్ సొల్యూషన్‌తో ప్లేట్‌ను నాలుగు సార్లు కడగాలి.

5.కడిగిన దశల తర్వాత బావుల్లోని అవశేష ద్రవాన్ని తొలగించడానికి పేపర్ టవల్‌పై ప్లేట్‌ను నొక్కండి.

6.ప్రతి బావికి 100 μL TMB సొల్యూషన్‌ని జోడించి, ప్లేట్‌ను చీకటిలో 20 - 25°C వద్ద 20 నిమిషాల పాటు పొదిగించండి.

7. ప్రతిచర్యను ఆపడానికి ప్రతి బావికి 50 μL స్టాప్ సొల్యూషన్ జోడించండి.

8.మైక్రోప్లేట్ రీడర్‌లో 450 nm వద్ద శోషణను 10 నిమిషాల్లో చదవండి (అధిక ఖచ్చితత్వ పనితీరు కోసం అనుబంధంగా 630nm సిఫార్సు చేయబడింది.