Kifaa cha Kugundua Kingamwili cha SARS-CoV-2 (ELISA)

【MATUMIZI YALIYOKUSUDIWA】

Kifurushi cha Kugundua Kingamwili cha SARS-CoV-2 ni Kijaribio cha Kingamwili cha Kingamwili chenye Ushindani (ELISA) kinachokusudiwa kutambua ubora na nusu kiasi cha kingamwili za kutoweka kabisa kwa SARS-CoV-2 katika seramu ya damu na plasma ya binadamu. Kifaa cha Kugundua Kinga Mwili cha SARS- CoV-2 kinaweza kutumika kama usaidizi katika kutambua watu walio na mwitikio wa kinga ya mwili kwa SARS-CoV-2, kuonyesha maambukizi ya hivi majuzi au ya awali. Kifaa cha Kugundua Kinga Mwili cha SARS-CoV-2 Kisitumike kutambua maambukizo makali ya SARS-CoV-2.

【UTANGULIZI】

Maambukizi ya Virusi vya Korona kwa kawaida huchochea mwitikio wa kingamwili wa kutoweka. Viwango vya ubadilishaji wa seroconversion katika wagonjwa wa COVID-19 ni 50% na 100% siku ya 7 na 14 baada ya dalili kuanza, mtawaliwa. Ili kuwasilisha maarifa, kingamwili inayolingana ya kupunguza kingamwili katika damu inatambuliwa kama shabaha ya kubainisha ufanisi wa kingamwili na mkusanyiko wa juu wa kingamwili inayopunguza kuashiria ufanisi wa juu wa ulinzi. Jaribio la Kupunguza Uwekaji Uwekaji Nambari (PRNT) limekuwa likitambuliwa kama kiwango cha dhahabu cha kugundua kingamwili zinazopunguza athari. Hata hivyo, kutokana na matokeo yake ya chini na mahitaji ya juu zaidi kwa uendeshaji, PRNT haifai kwa uchunguzi wa kiwango kikubwa cha serodiagnosis na tathmini ya chanjo. Kifaa cha Kugundua Kingamwili cha SARS-CoV-2 kinatokana na mbinu ya Ushindani ya Kingamwili-Inayounganishwa na Kingamwili (ELISA), ambayo inaweza kugundua kingamwili inayopunguza katika sampuli ya damu na pia kufikia viwango vya mkusanyiko wa aina hii ya kingamwili.

 【Utaratibu wa Mtihani】

1.Katika mirija tofauti, aliquot 120μL ya Suluhisho la HACE2-HRP lililotayarishwa.

2.Ongeza 6 μL ya vidhibiti, sampuli zisizojulikana, vidhibiti vya ubora katika kila bomba na uchanganye vizuri.

3.Hamisha 100μL ya kila mchanganyiko uliotayarishwa katika hatua ya 2 hadi kwenye visima vya microplate vinavyolingana kulingana na usanidi wa majaribio ulioundwa mapema.

3. Funika sahani kwa Kifunga Bamba na uangulie kwa joto la 37°C kwa dakika 60.

4.Ondoa Kifunga Bamba na uoshe sahani kwa takriban 300 μL ya 1× Suluhisho la Osha kwa kila kisima kwa mara nne.

5.Gonga sahani kwenye kitambaa cha karatasi ili kuondoa kioevu kilichobaki kwenye visima baada ya hatua za kuosha.

6. Ongeza 100 μL ya Suluhisho la TMB kwa kila kisima na uangulie sahani kwenye giza kwa 20 – 25°C kwa dakika 20.

7.Ongeza 50 μL ya Suluhisho la Kusimamisha kwa kila kisima ili kusimamisha majibu.

8.Soma kifyonzaji katika kisomaji cha mikroplate kwa nm 450 ndani ya dakika 10 (nm 630 kama nyongeza inavyopendekezwa kwa utendakazi wa hali ya juu zaidi.