SARS-CoV-2 Kubadilisha Kitengo cha Ugunduzi wa Antibody （ELISA)

【Matumizi yaliyokusudiwa】

SARS-COV-2 Kitengo cha kugundua antibody cha kugundua ni ushindani wa enzyme iliyounganishwa na enzyme (ELISA) iliyokusudiwa kwa kugundua ubora na nusu ya antibodies jumla ya antibodies kwa SARS-CoV-2 katika seramu ya binadamu na plasma. Kitengo cha kugundua antibody cha SARS- COV-2 kinaweza kutumika kama msaada katika kutambua watu walio na majibu ya kinga ya mwili kwa SARS- COV-2, inayoonyesha maambukizi ya hivi karibuni au ya hapo awali. Kitengo cha kugundua antibody cha SARS-2 cha kugundua haipaswi kutumiwa kugundua maambukizi ya papo hapo ya SARS-CoV-2.

【Utangulizi】

Maambukizi ya coronavirus kawaida husababisha majibu ya antibody. Viwango vya seroconversion katika wagonjwa wa COVID-19 ni 50% na 100% kwa siku 7 na 14 baada ya dalili, mtawaliwa. Ili kuwasilisha maarifa, virusi vinavyolingana vya kuzuia antibody katika damu ni kutambuliwa kama lengo la kuamua ufanisi wa antibody na mkusanyiko wa juu wa antibody inayoonyesha athari ya juu ya ulinzi. Mtihani wa Kupunguza Upungufu wa Plaque (PRNT) umekuwa ukitambuliwa kama kiwango cha dhahabu cha kugundua antibodies za kutengenezea. Walakini, kwa sababu ya upungufu wake wa chini na hitaji la juu la operesheni, PRNT sio vitendo kwa serodiagnosis kubwa na tathmini ya chanjo. Kitengo cha kugundua antibody cha SARS-2 cha kugundua ni msingi wa mbinu ya ushindani ya enzyme iliyounganishwa na enzyme (ELISA), ambayo inaweza kugundua antibody ya kutofautisha katika sampuli ya damu na pia kufikia viwango vya mkusanyiko wa aina hii ya antibody.

 【Utaratibu wa mtihani】

1.Katika zilizopo tofauti, aliquot 120μl ya suluhisho la Hace2-HRP lililoandaliwa.

2.Add 6 μL ya calibrators, sampuli zisizojulikana, udhibiti wa ubora katika kila bomba na uchanganye vizuri.

3.Transfer 100μL ya kila mchanganyiko ulioandaliwa katika hatua ya 2 ndani ya visima vinavyolingana vya microplate kulingana na usanidi wa mtihani uliopangwa.

3.Coshe sahani na sealer ya sahani na incubate kwa 37 ° C kwa dakika 60.

4.Kuweka muuzaji wa sahani na osha sahani na takriban 300 μL ya suluhisho la safisha 1 × kwa kila kisima kwa mara nne.

5.Tafuta sahani kwenye kitambaa cha karatasi ili kuondoa kioevu cha mabaki kwenye visima baada ya hatua za kuosha.

6.Add 100 μL ya suluhisho la TMB kwa kila kisima na kuingiza sahani kwenye giza saa 20 - 25 ° C kwa dakika 20.

7.Add 50 μL ya suluhisho la kusimamisha kwa kila kisima kuzuia majibu.

8. Soma uwekaji katika msomaji wa microplate kwa 450 nm ndani ya dakika 10 (630nm kama nyongeza inapendekezwa kwa utendaji wa hali ya juu.