SARS-CoV-2 Neutralizing Antibody Detection Kit (ELISA)
【AVSEDD ANVÄNDNING】
SARS-CoV-2 Neutralizing Antibody Detection Kit är en Competitive Enzyme-Linked Immunosorbent Assay (ELISA) avsedd för kvalitativ och semikvantitativ detektion av totala neutraliserande antikroppar mot SARS-CoV-2 i humant serum och plasma. SARS-CoV-2 Neutralizing Antibody Detection Kit kan användas som ett hjälpmedel för att identifiera individer med ett adaptivt immunsvar mot SARS-CoV-2, vilket indikerar nyligen eller tidigare infektion. SARS-CoV-2 Neutralizing Antibody Detection Kit ska inte användas för att diagnostisera akut SARS-CoV-2-infektion.
【INTRODUKTION】
Coronavirusinfektioner inducerar vanligtvis neutraliserande antikroppssvar. Serokonversionsfrekvensen hos COVID-19-patienter är 50 % och 100 % på dag 7 respektive 14 efter symtomdebut. För att presentera kunskap är motsvarande virusneutraliserande antikropp i blod ett erkänt mål för att bestämma antikroppseffektivitet och högre koncentration av den neutraliserande antikroppen indikerar högre skyddseffektivitet. Plackreduktionsneutraliseringstest (PRNT) har blivit erkänd som guldstandarden för att detektera neutraliserande antikroppar. Men på grund av dess låga genomströmning och högre krav för drift, är PRNT inte praktiskt för storskalig serodiagnos och vaccinutvärdering. SARS-CoV-2 Neutralizing Antibody Detection Kit är baserat på Competitive Enzyme-Linked Immunosorbent Assay (ELISA) metodik, som kan detektera den neutraliserande antikroppen i blodprovet samt särskilt få tillgång till koncentrationsnivåerna för denna typ av antikroppar.
【Testprocedur】
1. Prova 120 μL av den beredda hACE2-HRP-lösningen i separata rör.
2. Tillsätt 6 μL kalibratorer, okända prover, kvalitetskontroller i varje rör och blanda väl.
3. Överför 100 μL av varje blandning som bereddes i steg 2 till motsvarande mikroplattbrunnar enligt förutformad testkonfiguration.
3. Täck plattan med Plate Sealer och inkubera vid 37°C i 60 minuter.
4.Ta bort plattförseglaren och tvätta plattan med ungefär 300 μL 1× tvättlösning per brunn fyra gånger.
5.Knacka plattan på en pappershandduk för att avlägsna kvarvarande vätska i brunnarna efter tvättstegen.
6. Tillsätt 100 μL TMB-lösning till varje brunn och inkubera plattan i mörker vid 20 – 25 °C i 20 minuter.
7. Tillsätt 50 μL stopplösning till varje brunn för att stoppa reaktionen.
8. Läs av absorbansen i mikroplattläsaren vid 450 nm inom 10 minuter (630 nm som tillbehör rekommenderas för högre precision.
