SARS-COV-2 Neutraliserande antikroppsdetekteringssats （ELISA)
【Avsedd användning】
SARS-COV-2 Neutraliserande antikroppsdetekteringssats är ett konkurrenskraftigt enzymbundet immunosorbentanalys (ELISA) avsedd för kvalitativ och halvkvantitativ detektion av totala neutraliserande antikroppar mot SARS-CoV-2 i humant serum och plasma. SARS-COV-2 neutraliserande antikroppsdetekteringssats kan användas som ett hjälpmedel för att identifiera individer med ett adaptivt immunsvar mot SARS-COV-2, vilket indikerar nyligen eller tidigare infektion. SARS-COV-2 neutraliserande antikroppsdetekteringssats bör inte användas för att diagnostisera akut SARS-CoV-2-infektion.
【INTRODUKTION】
Koronavirusinfektioner inducerar vanligtvis neutraliserande antikroppssvar. Serokonversionsgraden hos covid-19-patienter är 50% och 100% på dag 7 respektive 14 efter symptom. För att presentera kunskap är motsvarande virusneutraliserande antikropp i blod ett erkänt som ett mål för att bestämma antikroppseffektivitet och högre koncentration av den neutraliserande antikroppen indikerar högre skyddseffektivitet. Plackreduktion Neutraliseringstest (PRNT) har erkänts som guldstandarden för att detektera neutraliserande antikroppar. På grund av dess låga genomströmning och högre krav på drift är PRNT emellertid inte praktiskt för storskalig serodiagnos och vaccinutvärdering. SARS-COV-2-neutraliserande antikroppsdetekteringssats är baserat på konkurrenskraftig enzymbunden immunosorbentanalys (ELISA) -metodik, som kan upptäcka den neutraliserande antikroppen i blodprov samt speciellt åtkomst till koncentrationsnivåerna för denna typ av antikropp.
【Testförfarande】
1. I separata rör är alikvot 120 ul av den beredda HACE2-HRP-lösningen.
2. Lägg till 6 μl kalibratorer, okända prover, kvalitetskontroller i varje rör och blanda väl.
3. Överför 100 ul av varje blandning framställd i steg 2 till motsvarande mikroplattbrunnar enligt förutsatt testkonfiguration.
3. Täck plattan med platttätaren och inkubera vid 37 ° C under 60 minuter.
4. Ta bort platttätaren och tvätta plattan med ungefär 300 ul 1 × tvättlösning per brunn i fyra gånger.
5. Tappa plattan på pappershandduken för att ta bort återstående vätska i brunnarna efter tvättsteg.
6.Add 100 ul TMB -lösning på varje brunn och inkubera plattan i mörker vid 20 - 25 ° C under 20 minuter.
7. Tillägg 50 μl stopplösning till varje brunn för att stoppa reaktionen.
8.Läs absorbansen hos mikroplattläsare vid 450 nm inom 10 minuter (630 nm eftersom tillbehör rekommenderas för högre precisionsprestanda.
