Monkeypox Virus (MPV) Nukleinsyradetektionskit

Satsen innehåller reagenser för bearbetning av 48 tester eller kvalitetskontroll, inklusive följande komponenter:

Reagens A

ReagensB

Obs: Komponenterna i olika batchnummer kan inte användas omväxlande

【Förvaringsförhållanden och hållbarhet】

1.Reagens A/B kan förvaras vid 2-30°C, och hållbarheten är 10 månader.

2. Öppna endast provrörslocket när du är redo för testet.

3. Använd inte provrör efter utgångsdatumet.

4.Använd inte ett läckagedetektionsrör.

【Tillämpligt instrument】

Lämplig för Lämplig för LC480 PCR-analyssystem, Gentier 48E Automatiskt PCR-analyssystem, ABI7500 PCR-analyssystem.

【Exempel på krav】

1. Tillämpliga provtyper: svalgprover.

2. Provtagningslösning:Efter verifiering rekommenderas det att använda normal koksaltlösning eller viruskonserveringsrör från Hangzhou Testsea biology för provtagning.

halsprovning:torka av bilaterala svalgmandlar och bakre svalgvägg med steril engångspinne, doppa ner pinnen i röret som innehåller 3mL provtagningslösning, kassera svansen och dra åt rörlocket.

3. Provlagring och leverans:Proverna som ska testas bör testas så snart som möjligt.Transporttemperaturen bör hållas vid 2 ~ 8 ℃. Proverna som kan testas inom 24 timmar kan lagras vid 2 ℃ ~ 8 ℃ och om proverna inte kan testas inom 24 timmar bör de lagras vid mindre än eller lika med till -70 ℃ (om det inte finns något lagringsförhållande på -70 ℃ kan det lagras vid -20 ℃ tillfälligt), undvik upprepade

frysning och upptining.

4. Korrekt provinsamling, lagring och transport är avgörande för produktens prestanda.

【Testmetod】

1. Provbearbetning och provtillsats

1.1 Provbearbetning

Efter att ha blandat ovanstående provtagningslösning med prover, ta 30 μL av provet i DNA-reagensröret och blanda det jämnt.

1.2 Laddar

Ta 20 μL av rekonstitutionsreagenset och tillsätt det till MPV-detektionsreagenset, tillsätt 5 μL av det ovan bearbetade provet (den positiva kontrollen och den negativa kontrollen ska behandlas parallellt med proverna), täck över rörlocket, centrifugera det vid 2000 rpm i 10 sekunder.

2. PCR-amplifiering

2.1 Ladda den förberedda PCR-plattan/-rören till fluorescens-PCR-instrumentet. Negativ kontroll och positiv kontroll ska ställas in för varje test.

2.2 Fluorescerande kanalinställning:

1) Välj FAM-kanal för MPV-detektering;

2) Välj HEX/VIC-kanal för intern kontrollgendetektion;

3. Resultatanalys

Ställ in baslinjen ovanför den högsta punkten på den negativa kontrollens fluorescerande kurva.

4.Kvalitetskontroll

4.1 Negativ kontroll: Inget Ct-värde upptäckt i FAM, HEX/VIC-kanalen eller Ct＞40；

4.2 Positiv kontroll: I FAM、HEX/VIC-kanal, Ct≤40；

4.3 Ovanstående krav bör vara uppfyllda i samma experiment, annars är testresultaten ogiltiga och experimentet måste upprepas.

【Gränsvärde】

Ett prov anses vara positivt när: Målsekvensen Ct≤40, den interna kontrollgenen Ct≤40.

【Resultattolkning】

När kvalitetskontrollen har godkänts bör användare kontrollera om det finns en amplifieringskurva för varje prov i HEX/VIC-kanalen, om det finns och med Ct≤40 indikerade det att den interna kontrollgenen har amplifierats framgångsrikt och att just detta test är giltigt.Användare kan gå vidare till uppföljningsanalysen:

3.För prover med amplifiering av internkontrollgenen som misslyckades (HEX/VIC

kanal, Ct＞40, eller ingen amplifieringskurva), låg viral belastning eller förekomsten av PCR-hämmare kan vara orsaken till misslyckandet, undersökningen bör upprepas från provtagningen;

4.För positiva prover och odlat virus påverkar inte resultaten av internkontroll;

För prover som testats negativa måste den interna kontrollen testas positiv annars är det totala resultatet ogiltigt och undersökningen måste upprepas, med början från provtagningssteget