Monkeypox Virus (MPV) Kit Deteksi Asam Nukléat

Kit ngandung réagen pikeun ngolah 48 tés atanapi kontrol kualitas, kalebet komponén ieu:

Réagen A

RéagénB

Catetan: Komponén tina nomer bets béda teu bisa dipaké bulak balik

【Kaayaan Panyimpen sareng Kahirupan Rak】

1.Reagent A / B bisa disimpen dina 2-30 ° C, sarta hirup rak téh 10 bulan.

2.Please buka panutup tube test ngan lamun anjeun siap pikeun test.

3. Ulah make tabung tés saluareun tanggal béakna.

4. Ulah make tube deteksi bocor.

【Instrumén lumaku】

Cocog jeung Cocog jeung LC480 sistem analisis PCR, Gentier 48E Sistim analisis PCR otomatis, ABI7500 sistem analisis PCR.

【Syarat Sampel】

jenis sampel 1.Applicable: sampel swabs tikoro.

2. Solusi sampling:Saatos verifikasi, disarankeun nganggo saline normal atanapi tabung pelestarian Virus anu diproduksi ku biologi Hangzhou Testsea pikeun ngumpulkeun sampel.

swab tikoro:usap amandel pharyngeal bilateral jeung tembok pharyngeal posterior kalawan swab sampling steril disposable, neuleumkeun swab kana tabung nu ngandung 3mL solusi sampling, piceun buntut, sarta tighten panutup tabung.

3.Sample gudang sarta pangiriman:Sampel anu bakal diuji kedah diuji pas mungkin.Suhu transportasi kudu dijaga dina 2 ~ 8 ℃. Sampel nu bisa diuji dina 24 jam bisa disimpen dina 2 ℃ ~ 8 ℃ sarta lamun sampel teu bisa diuji dina 24 jam, éta kudu disimpen dina kirang ti atawa sarua. ka -70 ℃ (upami teu aya kaayaan neundeun -70 ℃, éta tiasa disimpen dina -20 ℃ samentawis), ulah diulang deui

katirisan jeung thawing.

4.Proper kempelan sampel, neundeun, sarta transportasi anu kritis kana kinerja produk ieu.

【Métode Tés】

processing 1.Sample jeung tambahan sampel

1.1 Ngolah sampel

Saatos nyampur solusi sampling di luhur sareng conto, cokot 30μL sampel kana tabung réagen pelepasan DNA sareng aduk rata.

1.2 Ngamuat

Candak 20μL réagen reconstitution sareng tambahkeun kana réagen deteksi MPV, tambahkeun 5μL tina conto olahan di luhur (Kadali positip sareng kontrol négatip bakal diolah paralel sareng conto), nutupan tutup tabung, centrifuge dina 2000rpm salami 10 detik.

2. amplifikasi PCR

2.1 Muatkeun piring / tabung PCR anu disiapkeun kana alat PCR fluoresensi, Kontrol négatif sareng kontrol positip kedah diatur pikeun unggal tés.

2.2 Setélan saluran fluoresensi:

1) Pilih saluran FAM pikeun deteksi MPV;

2) Pilih saluran HEX / VIC pikeun deteksi gén kontrol internal;

3. Hasil analisis

Setel garis dasar di luhur titik pangluhurna kurva fluoresensi kontrol négatip.

4.Kadali kualitas

4.1 Kontrol négatif: Teu aya nilai Ct anu dideteksi dina FAM, saluran HEX/VIC, atanapi Ct> 40;

4.2 Kontrol positif: Dina FAM, saluran HEX/VIC, Ct≤40；

4.3 Sarat di luhur kedah dicumponan dina ékspérimén anu sami, upami henteu, hasil tés henteu sah sareng ékspérimén kedah diulang deui.

【Motong nilai】

Sampel dianggap positip nalika: Urutan target Ct≤40, Gén kontrol internal Ct≤40.

【Interprétasi hasil】

Sakali kadali kualitas diliwatan, pamaké kudu mariksa lamun aya hiji kurva amplifikasi pikeun tiap sampel dina HEX / channel VIC, lamun aya tur kalawan Ct≤40, éta dituduhkeun gén kontrol internal ieu hasil amplified jeung test husus ieu valid.Pamaké bisa neruskeun kana analisis nurutan:

3. Pikeun sampel kalawan amplifikasi gén kontrol internal gagal (HEX/VIC

saluran, Ct> 40, atawa euweuh kurva amplifikasi), beban Viral low atawa ayana PCR inhibitor bisa jadi alesan gagalna, ujian kudu terus-terusan tina kumpulan specimen;

4.Pikeun sampel positif jeung virus berbudaya, hasil kontrol internal teu mangaruhan;

Pikeun sampel anu diuji négatip, kontrol internal kedah diuji positip, upami henteu, hasilna sadayana henteu sah sareng pamariksaan kedah diulang deui, mimitian ti léngkah ngumpulkeun spésimén.