SARS-COV-2 neutralizujúca súprava protilátok protilátka (ELISA)
【Zamýšľané použitie】
SPARS-COV-2 neutralizujúca detekčná súprava protilátok je konkurenčný enzýmový imunosorbentný test (ELISA) určený na kvalitatívnu a polo-kvantitatívnu detekciu celkových neutralizačných protilátok proti SARS-COV-2 v ľudskom sére a plazme. Súprava detekcie protilátok SARS-COV-2 sa môže použiť ako pomoc pri identifikácii jednotlivcov s adaptívnou imunitnou reakciou na SARS-COV-2, čo naznačuje nedávnu alebo predchádzajúcu infekciu. Súprava detekcie protilátok SARS-CoV-2 by sa nemala používať na diagnostiku akútnej infekcie SARS-COV-2.
【Zavedenie】
Infekcie koronavírusu zvyčajne indukujú neutralizujúce protilátky. Miera sérokonverzie u pacientov s Covid-19 je 50% a 100% v deň 7 a 14 po nástupe symptómov. Aby sa prezentovali vedomosti, zodpovedajúca vírusová neutralizačná protilátka v krvi je uznávaná ako cieľ na stanovenie účinnosti protilátky a vyššia koncentrácia neutralizačnej protilátky naznačuje vyššiu účinnosť ochrany. Test neutralizácie plakov (PRNT) bol uznávaný ako zlatý štandard na detekciu neutralizačných protilátok. Avšak vďaka svojej nízkej priepustnosti a vyššej požiadavke na prevádzku nie je PRNT praktický pre rozsiahlu sérigózu a hodnotenie vakcíny. Súprava detekcie protilátok SARS-2 neutralizujúca metodológia imunosorbentu spojeného s enzýmom (ELISA), ktorá dokáže detekovať neutralizačnú protilátku vo vzorke krvi, ako aj osobitne prístup k hladinám koncentrácie tohto typu protilátky.
【Skúšobný postup】
1. v samostatných trubiciach, alikvotné 120 ul pripraveného roztoku HACE2-HRP.
2.Add 6 μl kalibrátorov, neznámych vzoriek, kontroly kvality v každej skúmavke a dobre premiešajte.
3. Prepravte 100 ul každej zmesi pripravenej v kroku 2 do zodpovedajúcich jamiek mikroplate podľa vopred konfigurácie testu.
3. Dosku uveďte doštičkou a inkubujte pri 37 ° C počas 60 minút.
4. Doskovo umyte doštičku a doštičku umyte približne 300 μl 1 x premytia roztoku na jamku štyrikrát.
5. Doskovú dosku na papierovom utierke po odstránení zvyškovej kvapaliny v studniach po umytí schodov.
6.Add 100 μl roztoku TMB do každej jamky a inkubujte doštičku v tme pri 20 - 25 ° C počas 20 minút.
7.Add 50 μl zastavovacieho roztoku pre každú jamku, aby sa zastavil reakciu.
8. Prečítajte si absorbanciu v čítačke mikroplatín pri 450 nm do 10 minút (630 nm ako príslušenstvo sa odporúča pre vyššiu presnú výkonnosť.