SARS-CoV-2 غير جانبدار اينٽي باڊي ڊيٽيڪشن ڪٽ (ELISA)
【ارادو استعمال】
SARS-CoV-2 غير جانبدار اينٽي باڊي ڊيٽيڪشن ڪٽ هڪ مقابلي واري اينزيم سان ڳنڍيل اميونوسوربينٽ اسسي (ELISA) آهي جنهن جو مقصد انساني سيرم ۽ پلازما ۾ SARS-CoV-2 کي ڪل غير جانبدار اينٽي باڊيز جي ڪيفيت ۽ نيم مقداري پتو لڳائڻ لاءِ آهي. SARS- CoV-2 Neutralizing Antibody Detection Kit ماڻهن کي سڃاڻڻ ۾ مدد جي طور تي استعمال ڪري سگهجي ٿو جيڪي SARS- CoV-2 لاءِ مدافعتي مدافعتي ردعمل جي نشاندهي ڪن ٿا، تازو يا اڳوڻي انفيڪشن جي نشاندهي ڪن ٿا. SARS-CoV-2 Neutralizing Antibody Detection Kit استعمال نه ٿيڻ گهرجي شديد SARS-CoV-2 انفيڪشن جي تشخيص لاءِ.
【تعارف】
ڪورونوايرس انفيڪشن عام طور تي اينٽي باڊي جي ردعمل کي غيرجانبدار بڻائي ٿو. COVID-19 مريضن ۾ seroconversion جي شرح 50% ۽ 100% آهن ڏينهن 7 ۽ 14 پوسٽ جي علامت جي شروعات تي، ترتيب سان. علم پيش ڪرڻ لاءِ، رت ۾ وائرس کي غير جانبدار ڪرڻ واري اينٽي باڊي کي اينٽي باڊي جي افاديت کي طئي ڪرڻ لاءِ هڪ ٽارگيٽ طور سڃاتو وڃي ٿو ۽ غير جانبدار اينٽي باڊي جو وڌيڪ ڪنسنٽريشن اعليٰ تحفظ جي افاديت جي نشاندهي ڪري ٿو. Plaque Reduction Neutralization Test (PRNT) کي غير جانبدار اينٽي باڊيز کي ڳولڻ لاءِ سون جي معيار طور سڃاتو وڃي ٿو. تنهن هوندي به، ان جي گهٽ ذريعي وڃڻ ۽ آپريشن لاءِ اعليٰ گهرج جي ڪري، PRNT وڏي پيماني تي سيروڊائگنوسس ۽ ويڪسين جي تشخيص لاءِ عملي ناهي. SARS-CoV-2 Neutralizing Antibody Detection Kit Competitive Enzyme-Linked Immunosorbent Assay (ELISA) طريقي تي مبني آهي، جيڪا رت جي نموني ۾ غير جانبدار اينٽي باڊي کي ڳولي سگهي ٿي ۽ خاص طور تي هن قسم جي اينٽي باڊي جي ڪنسنٽريشن ليول تائين رسائي ڪري ٿي.
【ٽيسٽ جو طريقو】
1. الڳ ٽيوب ۾، تيار ڪيل hACE2-HRP حل جو 120μL aliquot.
2. هر ٽيوب ۾ 6 μL ڪيليبريٽر، اڻڄاتل نمونا، ڪيفيت ڪنٽرول شامل ڪريو ۽ چڱي طرح ملايو.
3. اسٽيپ 2 ۾ تيار ڪيل هر مرکب جو 100μL اڳواٽ ٺهيل ٽيسٽ جي ترتيب مطابق لاڳاپيل مائڪرو پليٽ ويلز ۾ منتقل ڪريو.
3. پليٽ سيلر سان پليٽ کي ڍڪيو ۽ 60 منٽن لاء 37 ° C تي انڪيوبيٽ ڪريو.
4. پليٽ سيلر کي هٽايو ۽ پليٽ کي 300 μL جي 1× ڌوئيندڙ حل سان چار ڀيرا ڌوء.
5. پليٽ کي ڪاغذ جي تولي تي ٽيپ ڪريو ته جيئن ڌوٻي جي قدمن کان پوءِ کوهن ۾ موجود رهجي ويل مائع کي هٽايو وڃي.
6. هر کوهه ۾ 100 μL TMB حل شامل ڪريو ۽ پليٽ کي اونداهي ۾ 20 - 25 ° C تي 20 منٽن لاءِ انڪيوبيٽ ڪريو.
7. رد عمل کي روڪڻ لاءِ هر کوهه ۾ 50 μL اسٽاپ حل شامل ڪريو.
8. 10 منٽن اندر 450 nm تي مائڪروپليٽ ريڊر ۾ جاذبيت کي پڙهو (630nm جي طور تي Accessory اعلي صحت واري ڪارڪردگي لاء سفارش ڪئي وئي آهي.