Набор для обнаружения антител SARS-COV-2 (ELISA)
【Предполагаемое использование】
Набор для обнаружения антител SARS-COV-2 является конкурентным ферментом, связанным с иммуноферментным анализом (ELISA), предназначенным для качественного и полуколичественного обнаружения общего нейтрализующих антител к SARS-COV-2 в сыворотке и плазме человека. Набор для определения нейтрализующих антител SARSCO-2 может использоваться в качестве помощи при выявлении людей с адаптивным иммунным ответом на SARSCOV-2, что указывает на недавнюю или предварительную инфекцию. Набор для нейтрализующих антител SARS-COV-2 не следует использовать для диагностики острой инфекции SARS-COV-2.
【ВВЕДЕНИЕ】
Инфекции коронавируса обычно вызывают нейтрализующие реакции антител. Показатели сероконверсии у пациентов с COVID-19 составляют 50% и 100% на 7 и 14 день после появления симптомов соответственно. Чтобы представить знания, соответствующее вирусное нейтрализующее антитело в крови является признанным в качестве мишени для определения эффективности антител, а более высокая концентрация нейтрализующего антитела указывает на более высокую эффективность защиты. Тест на нейтрализацию по снижению бляшек (PRNT) распознается в качестве золотого стандарта для обнаружения нейтрализующих антител. Однако из -за его низкой пропускной способности и более высокой потребности в работе PRNT не является практичным для крупномасштабного серодиагностика и оценки вакцины. Набор для определения нейтрализующих антител SARS-COV-2 основан на методологии конкурентного фермента, связанного с иммуноферментным анализом (ELISA), которая может обнаружить нейтрализующее антитело в образце крови, а также специально доступ к уровням концентрации этого типа антитела.
【Процедура тестирования】
1. В отдельных трубках аликвота 120 мкл приготовленного раствора HACE2-HRP.
2. Добавить 6 мкл калибраторов, неизвестных образцов, контроля качества в каждой трубке и хорошо перемешать.
3. Трансфер 100 мкл каждой смеси, приготовленной на шаге 2 в соответствующие микропланшетные скважины в соответствии с предварительно назначенной тестовой конфигурацией.
3. Переверните пластину с помощью герметика пластины и инкубируйте при 37 ° C в течение 60 минут.
4. Сделайте герметик пластины и промойте пластину приблизительными 300 мкл 1 × раствора для промывки на лунку в течение четырех раз.
5. Сделайте тарелку на бумажном полотенце, чтобы удалить остаточную жидкость в лунках после шага.
6. Добавьте 100 мкл раствора TMB в каждую лунку и инкубируйте пластину в темноте при 20-25 ° C в течение 20 минут.
7. Добавьте 50 мкл стоп -раствора в каждую лунку, чтобы остановить реакцию.
8. Прочитайте абсорбцию в считывателе микропланшетов при 450 нм в течение 10 минут (630 нм, как рекомендуется аксессуар для более высокой точной производительности.
