Набор для обнаружения нуклеиновых кислот вируса оспы обезьян (MPV)

Набор содержит реагенты для проведения 48 тестов или контроля качества, в том числе следующие компоненты:

Реагент А

РеагентB

Примечание. Компоненты разных номеров партий не могут использоваться взаимозаменяемо.

【Условия хранения и срок годности】

1. Реагент A/B можно хранить при температуре 2–30°C, срок годности составляет 10 месяцев.

2. Открывайте крышку пробирки только тогда, когда вы готовы к тесту.

3. Не используйте пробирки с истекшим сроком годности.

4. Не используйте трубку для обнаружения утечек.

【Применимый инструмент】

Подходит для системы анализа ПЦР LC480, автоматической системы анализа ПЦР Gentier 48E, системы анализа ПЦР ABI7500.

【Образцы требований】

1. Применимые типы образцов: образцы мазков из зева.

2. Решение для отбора проб:После проверки для сбора образцов рекомендуется использовать обычный физиологический раствор или пробирку для консервации вирусов производства Hangzhou Testsea biology.

мазок из горла:протрите двусторонние глоточные миндалины и заднюю стенку глотки одноразовым стерильным тампоном для отбора проб, погрузите тампон в пробирку, содержащую 3 мл раствора для отбора проб, выбросьте хвостик и затяните крышку пробирки.

3. Хранение и доставка образцов:Образцы, подлежащие тестированию, должны быть протестированы как можно скорее.Температура транспортировки должна поддерживаться на уровне 2 ~ 8 ℃. Образцы, которые можно протестировать в течение 24 часов, можно хранить при температуре 2 ℃ ~ 8 ℃, а если образцы не могут быть проверены в течение 24 часов, их следует хранить при температуре ниже или равной до -70 ℃ (если нет условий хранения -70 ℃, временно можно хранить при -20 ℃), избегайте повторения

замораживание и оттаивание.

4. Правильный сбор, хранение и транспортировка образцов имеют решающее значение для эффективности этого продукта.

【Метод тестирования】

1.Обработка образцов и добавление образцов

1.1 Обработка проб

После смешивания вышеуказанного раствора для отбора проб с образцами возьмите 30 мкл образца в пробирку с реагентом для высвобождения ДНК и равномерно перемешайте.

1.2 Загрузка

Возьмите 20 мкл реагента для восстановления и добавьте его к реагенту для обнаружения MPV, добавьте 5 мкл обработанного выше образца (положительный контроль и отрицательный контроль должны обрабатываться параллельно с образцами), закройте пробирку крышкой, центрифугируйте при 2000 об/мин в течение 10 секунды.

2. ПЦР-амплификация

2.1 Загрузите подготовленные планшеты/пробирки для ПЦР в прибор для флуоресцентной ПЦР. Для каждого теста необходимо установить отрицательный и положительный контроль.

2.2 Настройка люминесцентного канала:

1) Выберите канал FAM для обнаружения MPV;

2) Выберите канал HEX/VIC для обнаружения гена внутреннего контроля;

3.Анализ результатов

Установите базовую линию выше самой высокой точки флуоресцентной кривой отрицательного контроля.

4.Контроль качества

4.1 Отрицательный контроль: значение Ct не обнаружено в канале FAM, HEX/VIC или Ct>40;

4.2 Положительный контроль: в канале FAM、HEX/VIC, Ct≤40；

4.3 Вышеуказанные требования должны быть выполнены в одном и том же эксперименте, в противном случае результаты испытаний недействительны и эксперимент необходимо повторить.

【Отрезанное значение】

Образец считается положительным, если: Целевая последовательность Ct≤40, Ген внутреннего контроля Ct≤40.

【Интерпретация результатов】

После прохождения контроля качества пользователи должны проверить, существует ли кривая амплификации для каждого образца в канале HEX/VIC. Если она есть, и при Ct≤40 это указывает на то, что внутренний контрольный ген успешно амплифицирован и этот конкретный тест действителен.Пользователи могут перейти к последующему анализу:

3.Для образцов с неудачной амплификацией гена внутреннего контроля (HEX/VIC

канал, Ct>40 или отсутствие кривой амплификации), низкая вирусная нагрузка или наличие ингибитора ПЦР могут быть причиной неудачи, исследование следует повторить из взятого образца;

4. На положительные образцы и культивированный вирус результаты внутреннего контроля не влияют;

Если пробы дали отрицательный результат, внутренний контроль должен дать положительный результат, в противном случае общий результат будет недействительным, и исследование необходимо повторить, начиная с этапа сбора образцов.