Kit de detectare a acidului nucleic al virusului variolei maimuței (MPV).

Kitul conține reactivi pentru procesarea a 48 de teste sau controlul calității, inclusiv următoarele componente:

Reactivul A

ReactivB

Notă: Componentele diferitelor numere de lot nu pot fi utilizate în mod interschimbabil

【Condiții de depozitare și termen de valabilitate】

1.Reactivul A/B poate fi depozitat la 2-30°C, iar termenul de valabilitate este de 10 luni.

2. Vă rugăm să deschideți capacul eprubetei numai când sunteți gata pentru test.

3. Nu utilizați eprubete după data de expirare.

4. Nu utilizați un tub de detectare a scurgerilor.

【Instrument aplicabil】

Potrivit pentru Sistem de analiză PCR LC480, Sistem de analiză PCR automat Gentier 48E, sistem de analiză PCR ABI7500.

【Cerințe pentru mostre】

1.Tipuri de mostre aplicabile: probe de tampoane în gât.

2. Soluție de eșantionare:După verificare, se recomandă utilizarea salină normală sau tub de conservare a virusului produs de Hangzhou Testsea biology pentru colectarea probelor.

tampon pentru gat:ștergeți amigdalele faringiene bilaterale și peretele posterior faringian cu un tampon steril de unică folosință, scufundați tamponul în tubul care conține 3 ml de soluție de prelevare, aruncați coada și strângeți capacul tubului.

3. Depozitarea și livrarea probelor:Probele care urmează să fie testate trebuie testate cât mai curând posibil.Temperatura de transport ar trebui să fie menținută la 2 ~ 8 ℃. Probele care pot fi testate în 24 de ore pot fi depozitate la 2 ℃ ~ 8 ℃ iar dacă probele nu pot fi testate în 24 de ore, ar trebui să fie depozitate la o temperatură mai mică sau egală. până la -70℃ (dacă nu există o condiție de depozitare de -70℃, poate fi stocat temporar la -20℃), evitați repetarea

îngheț și dezgheț.

4.Colectarea, depozitarea și transportul adecvate a probelor sunt esențiale pentru performanța acestui produs.

【Metoda de testare】

1. Prelucrarea probelor și adăugarea probelor

1.1 Prelucrarea probelor

După ce amestecați soluția de prelevare de mai sus cu probe, luați 30 μL de probă în tubul de reactiv de eliberare ADN și amestecați-o uniform.

1.2 Încărcare

Luați 20μL de reactiv de reconstituire și adăugați-l la reactivul de detectare MPV, adăugați 5μL din proba procesată mai sus (controlul pozitiv și controlul negativ vor fi procesate în paralel cu probele), acoperiți capacul tubului, centrifugați-l la 2000 rpm timp de 10 secunde.

2. Amplificare PCR

2.1 Încărcați placa/tuburile PCR pregătite pe instrumentul PCR cu fluorescență, controlul negativ și controlul pozitiv trebuie setat pentru fiecare test.

2.2 Setarea canalului fluorescent:

1) Alegeți canalul FAM pentru detectarea MPV;

2) Alegeți canalul HEX/VIC pentru detectarea genelor de control intern;

3.Analiza rezultatelor

Setați linia de bază deasupra punctului cel mai înalt al curbei fluorescente a controlului negativ.

4.Controlul calității

4.1 Control negativ: Nicio valoare Ct detectată în canalul FAM, HEX/VIC sau Ct＞40；

4.2 Control pozitiv: în canalul FAM、HEX/VIC, Ct≤40；

4.3 Cerințele de mai sus ar trebui să fie îndeplinite în același experiment, în caz contrar, rezultatele testului sunt invalide și experimentul trebuie repetat.

【Limită de tăiere】

O probă este considerată pozitivă atunci când: Secvența țintă Ct≤40, Gena de control intern Ct≤40.

【Interpretarea rezultatelor】

Odată ce controlul de calitate este trecut, utilizatorii ar trebui să verifice dacă există o curbă de amplificare pentru fiecare probă în canalul HEX/VIC, dacă există și cu Ct≤40, aceasta a indicat că gena de control intern este amplificată cu succes și acest test special este valabil.Utilizatorii pot trece la analiza ulterioară:

3. Pentru probele cu amplificarea genei de control intern eșuate (HEX/VIC

canal, Ct＞40, sau nicio curbă de amplificare), încărcătură virală scăzută sau existența inhibitorului PCR ar putea fi motivul eșecului, examinarea trebuie repetată din colectarea probei;

4. Pentru probele pozitive și virusul cultivat, rezultatele controlului intern nu afectează;

Pentru probele testate negative, controlul intern trebuie să fie testat pozitiv, în caz contrar, rezultatul general este invalid și examinarea trebuie repetată, începând cu etapa de recoltare a probei.