Kit de detecção de anticorpos neutralizantes SARS-CoV-2 （ELISA)
【Uso pretendido】
O kit de detecção de anticorpos neutralizantes SARS-CoV-2 é um ensaio de imunossorvente ligado a enzima competitivo (ELISA) destinado à detecção qualitativa e semi-quantitativa de anticorpos neutralizantes totais para SARS-CoV-2 no soro humano e plasma. O kit de detecção de anticorpos neutralizantes Sars-Cov-2 pode ser usado como um auxílio na identificação de indivíduos com uma resposta imune adaptativa ao SARSCOV-2, indicando infecção recente ou anterior. O kit de detecção de anticorpos neutralizantes SARS-CoV-2 não deve ser usado para diagnosticar a infecção aguda de SARS-CoV-2.
【INTRODUÇÃO】
As infecções por coronavírus normalmente induzem respostas neutralizantes de anticorpos. As taxas de soroconversão em pacientes com Covid-19 são 50% e 100% no início do dia 7 e 14 após o início dos sintomas, respectivamente. Para apresentar o conhecimento, o anticorpo neutralizador de vírus correspondente no sangue é reconhecido como alvo para determinar a eficácia do anticorpo e maior concentração do anticorpo neutralizante indicam maior eficácia de proteção. O teste de neutralização de redução da placa (PRNT) está sendo reconhecido como o padrão -ouro para detectar anticorpos neutralizantes. No entanto, devido ao seu baixo rendimento e maior requisito de operação, o PRNT não é prático para serodiagnóstico em larga escala e avaliação da vacina. O kit de detecção de anticorpos neutralizantes SARS-CoV-2 é baseado na metodologia competitiva de ensaio imunossorvente ligado à enzima (ELISA), que pode detectar o anticorpo neutralizante na amostra de sangue, além de acessar especialmente os níveis de concentração desse tipo de anticorpo.
【Procedimento de teste】
1. Em tubos separados, alíquota 120μL da solução preparada de HACE2-HRP.
2.Add 6 μl de calibradores, amostras desconhecidas, controles de qualidade em cada tubo e misture bem.
3.Transfere 100μl de cada mistura preparada na etapa 2 nos poços de microplacas correspondentes de acordo com a configuração de teste pré -projetada.
3. Escover a placa com selador de placa e incubar a 37 ° C por 60 minutos.
4. Remova o selador da placa e lave a placa com aproximadamente 300 μl de solução de lavagem 1 × por poço por quatro vezes.
5.Coste a placa na toalha de papel para remover o líquido residual nos poços após as etapas de lavagem.
6. ADD que 100 μL de solução TMB para cada poço e incubam a placa no escuro a 20 a 25 ° C por 20 minutos.
7.Add 50 μl de solução de parada para cada poço para interromper a reação.
8. Leia a absorvância no leitor de microplacas a 450 nm em 10 minutos (630Nm, conforme o acessório é recomendado para maior desempenho de precisão.
