SARS-CoV-2 د انټي باډي کشف کټ بې طرفه کول (ELISA)
【اراده کارول】
د SARS-CoV-2 بې طرفه کولو انټي باډي کشف کټ د رقابتي انزایم سره تړلی امیونوسوربینټ معاینه (ELISA) دی چې هدف یې د انسان سیرم او پلازما کې SARS-CoV-2 ته د بشپړ بې طرفه انټي باډي کیفي او نیم کمیتي کشف لپاره دی. د SARS-CoV-2 بې طرفه کولو انټي باډي کشف کټ د SARS-CoV-2 سره د انتفاعي معافیت غبرګون سره د اشخاصو پیژندلو کې د مرستې په توګه کارول کیدی شي ، چې وروستي یا مخکیني انتان په ګوته کوي. د SARS-CoV-2 بې طرفه کولو انټي باډي کشف کټ باید د حاد SARS-CoV-2 انفیکشن تشخیص لپاره ونه کارول شي.
【پیژندنه】
د کورونویرس انتانات معمولا د انټي باډي بې طرفه غبرګون هڅوي. د COVID-19 ناروغانو کې د سیرو تبادلې نرخ په ترتیب سره په 7 او 14 ورځو کې د نښې پیل کیدو وروسته په ترتیب سره 50٪ او 100٪ دي. د پوهې د وړاندې کولو لپاره، په وینه کې د انټي باډي غیر جانبدار کولو اړوند ویروس د انټي باډي اغیزمنتوب ټاکلو لپاره د هدف په توګه پیژندل شوی او د بې طرفه کولو انټي باډي لوړ غلظت د لوړ محافظت موثریت په ګوته کوي. د پلاک کمولو بې طرفه کولو ازموینه (PRNT) د بې طرفه انټي باډونو کشف کولو لپاره د سرو زرو معیار په توګه پیژندل شوی. په هرصورت، د دې د ټیټ تولید او د عملیاتو لپاره د لوړې اړتیا له امله، PRNT د لوی پیمانه سیروډیاګوسس او واکسین ارزونې لپاره عملي ندي. د SARS-CoV-2 بې طرفه کولو انټي باډي کشف کټ د رقابتي انزایم سره تړلي امیونوسوربینټ اسسي (ELISA) میتودولوژي پراساس دی ، کوم چې کولی شي د وینې نمونې کې بې طرفه انټي باډي کشف کړي او په ځانګړي توګه د دې ډول انټي باډي غلظت کچې ته لاسرسی ومومي.
【د ازموینې طرزالعمل】
1. په جلا ټیوبونو کې، د چمتو شوي HACE2-HRP محلول 120μL aliquot.
2. په هر ټیوب کې 6 μL کیلیبریټرونه، نامعلومې نمونې، د کیفیت کنټرول اضافه کړئ او ښه مخلوط کړئ.
3. په 2 مرحله کې چمتو شوي هر مخلوط 100μL د مخکینۍ ډیزاین شوي ازموینې ترتیب سره سم ورته مایکروپلیټ څاګانو ته انتقال کړئ.
3. پلیټ د پلیټ سیلر سره پوښ کړئ او د 60 دقیقو لپاره په 37 سانتي ګراد کې سینګار کړئ.
4. د پلیټ سیلر لرې کړئ او پلیټ د شاوخوا 300 μL 1× واش محلول سره د څلور ځله لپاره ومینځئ.
5. پلیټ د کاغذ په تولیه کې ټپ کړئ ترڅو د پښو مینځلو وروسته په څاه کې پاتې مایع لرې کړي.
6. هر څاه ته 100 μL TMB محلول اضافه کړئ او پلیټ د 20 دقیقو لپاره په 20 - 25 ° C کې په تیاره کې ښخ کړئ.
7. هر څاه ته 50 μL Stop محلول اضافه کړئ ترڅو د عکس العمل مخه ونیسي.
8. په 10 دقیقو کې په 450 nm کې د مایکروپلیټ ریډر کې جذب ولولئ (630nm د لاسرسي په توګه د لوړ دقیق فعالیت لپاره وړاندیز کیږي.
