Zestaw do wykrywania kwasu nukleinowego wirusa ospy małp (MPV).

Zestaw zawiera odczynniki do przygotowania 48 testów lub kontroli jakości, w tym następujące elementy:

Odczynnik A

OdczynnikB

Uwaga: Składniki o różnych numerach serii nie mogą być stosowane zamiennie

【Warunki przechowywania i okres przydatności do spożycia】

1. Odczynnik A/B można przechowywać w temperaturze 2-30°C, a okres ważności wynosi 10 miesięcy.

2. Proszę otwierać pokrywkę probówki tylko wtedy, gdy jesteś gotowy do testu.

3. Nie używaj probówek po upływie daty ważności.

4. Nie używaj rurki wykrywającej nieszczelność.

【Obowiązujący instrument】

Nadaje się do Nadaje się do systemu analizy PCR LC480, automatycznego systemu analizy PCR Gentier 48E, systemu analizy PCR ABI7500.

【Przykładowe wymagania】

1. Obowiązujące typy próbek: próbki wymazów z gardła.

2. Rozwiązanie do pobierania próbek:Po weryfikacji do pobierania próbek zaleca się użycie zwykłej soli fizjologicznej lub probówki do konserwacji wirusów wyprodukowanej przez firmę Hangzhou Testsea biologii.

wymaz z gardła:przetrzeć obustronne migdałki gardłowe i tylną ścianę gardła jednorazowym sterylnym wacikiem, zanurzyć wymazówkę w probówce zawierającej 3 ml roztworu do pobierania próbek, wyrzucić ogon i dokręcić pokrywkę probówki.

3. Przykładowe przechowywanie i dostawa:Próbki przeznaczone do badania należy zbadać jak najszybciej.Temperaturę transportu należy utrzymywać na poziomie 2 ~ 8 ℃. Próbki, które można przetestować w ciągu 24 godzin, można przechowywać w temperaturze 2 ℃ ~ 8 ℃, a jeśli próbek nie można zbadać w ciągu 24 godzin, należy je przechowywać w temperaturze niższej lub równej do -70 ℃ (jeśli warunki przechowywania nie wynoszą -70 ℃, można je tymczasowo przechowywać w temperaturze -20 ℃), unikać powtarzania

zamrażanie i rozmrażanie.

4. Prawidłowe pobieranie, przechowywanie i transport próbek mają kluczowe znaczenie dla działania tego produktu.

【Metoda testowania】

1. Przetwarzanie próbek i dodawanie próbek

1.1 Przetwarzanie próbek

Po zmieszaniu powyższego roztworu do pobierania próbek z próbkami, należy pobrać 30 µl próbki do probówki z odczynnikiem uwalniającym DNA i równomiernie wymieszać.

1.2 Ładowanie

Pobrać 20 μL odczynnika do rekonstytucji i dodać go do odczynnika do wykrywania MPV, dodać 5 μL powyższej przygotowanej próbki (kontrola dodatnia i kontrola ujemna powinny być przetwarzane równolegle z próbkami), zakryć probówkę, odwirować przy 2000 obr./min przez 10 sekundy.

2. Amplifikacja PCR

2.1 Załaduj przygotowaną płytkę/probówki do PCR do urządzenia do fluorescencyjnego PCR. Dla każdego testu należy ustawić kontrolę ujemną i kontrolę dodatnią.

2.2 Ustawienie kanału fluorescencyjnego:

1) Wybierz kanał FAM do wykrywania MPV;

2) Wybierz kanał HEX/VIC do wykrywania genów kontroli wewnętrznej;

3.Analiza wyników

Ustawić linię bazową powyżej najwyższego punktu krzywej fluorescencji kontroli ujemnej.

4.Kontrola jakości

4.1 Kontrola ujemna: Nie wykryto wartości Ct w kanale FAM, HEX/VIC lub Ct＞40；

4.2 Kontrola dodatnia: w kanale FAM, HEX/VIC, Ct≤40;

4.3 Powyższe wymagania powinny być spełnione w tym samym eksperymencie, w przeciwnym razie wyniki testu będą nieważne i należy powtórzyć doświadczenie.

【Wartość odcięcia】

Próbkę uznaje się za pozytywną, gdy: Sekwencja docelowa Ct≤40, Gen kontroli wewnętrznej Ct≤40.

【Interpretacja wyników】

Po przejściu kontroli jakości użytkownicy powinni sprawdzić, czy dla każdej próbki w kanale HEX/VIC istnieje krzywa amplifikacji, jeśli tak, a przy Ct≤40 oznacza to, że gen kontroli wewnętrznej został pomyślnie amplifikowany i ten konkretny test jest ważny.Użytkownicy mogą przejść do dalszej analizy:

3. Dla próbek z amplifikacją genu kontroli wewnętrznej nie powiodła się (HEX/VIC

kanał, Ct>40 lub brak krzywej amplifikacji), niskie miano wirusa lub obecność inhibitora PCR może być przyczyną niepowodzenia, badanie należy powtórzyć z pobranej próbki;

4. W przypadku próbek pozytywnych i wyhodowanych wirusów wyniki kontroli wewnętrznej nie mają wpływu;

W przypadku próbek, które uzyskały wynik negatywny, należy uzyskać wynik pozytywny kontroli wewnętrznej, w przeciwnym razie ogólny wynik jest nieważny i badanie należy powtórzyć, zaczynając od etapu pobierania próbki