ਸਾਰਸ-ਕੋਵ -2 ਐਂਟੀਬਾਡੀ ਡਾਈਟਕਸ਼ਨ ਕਿੱਟ (ਏਲੀਸਾ) ਨੂੰ ਨਿਰਪੱਖ ਕਰ ਰਿਹਾ ਹੈ
【ਸਿਧਾਂਤ】
ਸਾਰਸ-ਕੋਵ -2 ਨੇ ਐਂਟੀਬਾਡੀ ਡਾਈਟਲਿਜ਼ ਕਿੱਟ ਨੂੰ ਬੇਇੱਜ਼ਤੀ ਕਰਦਿਆਂ ਪ੍ਰਤੀਯੋਗੀ ਅਲੀਸਾ ਵਿਧੀ 'ਤੇ ਅਧਾਰਤ ਹੈ.
ਸ਼ੁੱਧ ਰੀਸੈਪਟਰ ਬਾਈਡਿੰਗ ਡੋਮੇਨ (ਆਰਬੀਡੀ) ਦੀ ਵਰਤੋਂ ਵਾਇਰਲ ਸਪਾਈਕ (ਜ਼) ਪ੍ਰੋਟੀਨ ਅਤੇ ਹੋਸਟ ਸੈੱਲ ਤੋਂ ਪ੍ਰੋਟੀਨ
ਇਸ ਤੋਂ ਇਲਾਵਾ, ਇਹ ਟੈਸਟ ਵਾਇਰਸ-ਹੋਸਟ ਨੂੰ ਨਿਰਪੱਖ ਗੱਲਬਾਤ ਨੂੰ ਨਕਲ ਕਰਨ ਲਈ ਤਿਆਰ ਕੀਤਾ ਗਿਆ ਹੈ.
ਕੈਲੀਬਰੇਟਰਸ, ਗੁਣਵੱਤਾ ਨਿਯੰਤਰਣ, ਅਤੇ ਸੀਰਮ ਜਾਂ ਪਲਾਜ਼ਮਾ ਦੇ ਨਮੂਨੇ ਵੱਖਰੇ ਤੌਰ 'ਤੇ ਚੰਗੀ ਤਰ੍ਹਾਂ ਮਿਲਾਉਂਦੇ ਹਨ
ਛੋਟੇ ਟਿ .ਬਾਂ ਵਿੱਚ ਹੈਸ 2-ਐਚਆਰਪੀ ਕੰਨਗੇਟ ਵਿੱਚ ਬਫਰ ਹੈ. ਫਿਰ ਮਿਸ਼ਰਣ ਵਿੱਚ ਤਬਦੀਲ ਕੀਤੇ ਜਾਂਦੇ ਹਨ
ਇਮੋਬਿਲਾਈਜ਼ਡ ਰੇਸ਼ਮ-ਕੋਵ-ਕੋਵ-ਕੋਵ-ਕੋਵ-ਕੋਵ -2 ਆਰਬੀਡੀ ਫ੍ਰੈਗਡ (ਆਰਬੀਡੀ) ਰੱਖਣ ਵਾਲੇ ਮਾਈਕਰੋਪਲੇਟ ਦੇ ਵੈਲਸ
ਪ੍ਰਫੁੱਲਤ. 30 ਮਿੰਟ ਦੇ ਪ੍ਰਫੁੱਲਤ ਦੇ ਦੌਰਾਨ, ਕੈਲੀਬਰੇਟਰਾਂ ਵਿੱਚ ਆਰਬੀਡੀ ਖਾਸ ਐਂਟੀਬਾਡੀ, QC ਅਤੇ
ਨਮੂਨਿਆਂ ਨੂੰ ਖੂਹਾਂ ਵਿੱਚ ਸੁਧਾਰਿਆ ਗਿਆ ਖਾਸ ਬਾਈਡਿੰਗ ਲਈ ਨਮੂਨਿਆਂ ਦਾਇਰੇ ਵਿੱਚ ਮੁਕਾਬਲਾ ਕਰਨਗੇ. ਬਾਅਦ
ਪ੍ਰਫੁੱਲਤ ਕਰਨਾ, ਖੂਹਾਂ ਨੂੰ ਬੇਕਾਬੂ ਹੈਸ 2-ਐਚਆਰਪੀ ਸੰਜੋਗ ਨੂੰ ਹਟਾਉਣ ਲਈ 4 ਵਾਰ ਧੋਤੇ ਜਾਂਦੇ ਹਨ. ਦਾ ਹੱਲ
ਟੀਐਮਬੀ ਨੂੰ ਫਿਰ ਜੋੜਿਆ ਜਾਂਦਾ ਹੈ ਅਤੇ ਕਮਰੇ ਦੇ ਤਾਪਮਾਨ ਤੇ 20 ਮਿੰਟ ਲਈ ਪ੍ਰਫੁੱਲਤ ਹੁੰਦਾ ਹੈ, ਨਤੀਜੇ ਵਜੋਂ ਏ ਦਾ ਵਿਕਾਸ ਹੁੰਦਾ ਹੈ
ਨੀਲਾ ਰੰਗ. ਰੰਗ ਵਿਕਾਸ 1 ਐਨ ਐੱਚ ਐੱਲ ਦੇ ਜੋੜ ਦੇ ਨਾਲ ਰੋਕਿਆ ਜਾਂਦਾ ਹੈ, ਅਤੇ ਸਮਾਈ ਹੈ
450 ਐਨ.ਐਮ. ਦੇ ਰੰਗ ਦੀ ਤੀਬਰਤਾ ਅਨੁਪਾਤ ਹੈ
ਪਾਚਕ ਦੀ ਮਾਤਰਾ, ਅਤੇ ਉਸੇ ਤਰ੍ਹਾਂ ਦੇ ਅਸੰਭਵ ਮਾਪਦੰਡਾਂ ਦੀ ਮਾਤਰਾ ਨਾਲ ਉਲਝਣ ਨਾਲ ਸਬੰਧਤ ਹੈ.
ਮੁਹੱਈਆ ਕਰਵਾਈ ਕੈਲੀਬਰੇਟਰਾਂ ਦੁਆਰਾ ਬਣਾਈ ਗਈ ਕੈਲੀਬਰੇਟਰਾਂ ਦੁਆਰਾ ਬਣਾਈ ਗਈ ਕੈਲੀਬ੍ਰੇਸ਼ਨ ਕਰਵ ਦੁਆਰਾ
ਅਣਜਾਣ ਨਮੂਨੇ ਵਿੱਚ ਐਂਟੀਬਾਡੀਜ਼ ਨੂੰ ਬੇਲੋੜਾ ਕਰਨਾ ਫਿਰ ਗਣਨਾ ਕੀਤੀ ਜਾਂਦੀ ਹੈ.
【ਸਮੱਗਰੀ ਲੋੜੀਂਦੀ ਪਰ ਪ੍ਰਦਾਨ ਨਹੀਂ ਕੀਤੀ ਗਈ】
1. ਡਰੇਡ ਜਾਂ ਡੀਯੋਨਾਈਜ਼ਡ ਪਾਣੀ
2. ਸ਼ੁੱਧਤਾ ਪਾਈਪੇਟਸ: 10μl, 100μl, 200μl ਅਤੇ 1 ਮਿ.ਲੀ.
3. ਡਿਸਪੋਸੇਬਲ ਪਾਈਪੇਟ ਸੁਝਾਅ
4. ਮਾਈਕ੍ਰੋਪਲੇਟ ਰੀਡਰ 450nm ਤੇ ਜਜ਼ਬ ਨੂੰ ਪੜ੍ਹਨ ਦੇ ਸਮਰੱਥ.
5. ਜਜ਼ਬ ਕਾਗਜ਼
6. ਗ੍ਰਾਫ ਪੇਪਰ
7. ਵੋਟੈਕਸ ਮਿਕਸਰ ਜਾਂ ਇਸਦੇ ਬਰਾਬਰ
【ਨਮੂਨਾ ਇਕੱਤਰ ਕਰਨ ਅਤੇ ਸਟੋਰੇਜ】
1. ਸੀਰਮ ਅਤੇ ਪਲਾਜ਼ਮਾ ਦੇ ਨਮੂਨੇ ਜੋ ਕੇ 2-ਏਟਟਾ ਵਿੱਚ ਇਕੱਤਰ ਕੀਤੇ ਗਏ ਪਲਾਜ਼ਮਾ ਦੇ ਨਮੂਨੇ ਇਸ ਕਿੱਟ ਲਈ ਵਰਤੇ ਜਾ ਸਕਦੇ ਹਨ.
2. ਨਮੂਨਿਆਂ ਨੂੰ ਕੈਪ ਕੀਤਾ ਜਾਣਾ ਚਾਹੀਦਾ ਹੈ ਅਤੇ ਸਹਾਇਤਾ ਕਰਨ ਤੋਂ 48 ਘੰਟਿਆਂ ਤੱਕ 48 ਘੰਟੇ ਤੱਕ 2 ° C - 8 ° C ਤੇ ਸਟੋਰ ਕੀਤਾ ਜਾ ਸਕਦਾ ਹੈ.
ਵਿਸਤ੍ਰਿਤ ਸਮੇਂ ਤੋਂ ਲੰਬੇ ਸਮੇਂ ਲਈ ਰੱਖੇ ਗਏ (6 ਮਹੀਨਿਆਂ ਤੱਕ) ਸਿਰਫ ਇਕ ਵਾਰ -20 ° C ਤੇ ਅਸਾਨ ਹੋਣ ਤੋਂ ਪਹਿਲਾਂ ਹੀ ਜੰਮਿਆ ਹੋਣਾ ਚਾਹੀਦਾ ਹੈ.
ਦੁਹਰਾਇਆ ਫ੍ਰੀਜ਼-ਪਿਘਰਾਂ ਤੋਂ ਪਰਹੇਜ਼ ਕਰੋ.
ਪ੍ਰੋਟੋਕੋਲ
【ਰੀਜੈਂਟ ਤਿਆਰੀ】
1. ਸਾਰੇ ਰੀਫ੍ਰਿਜਰੇਸ਼ਨ ਤੋਂ ਬਾਹਰ ਕੱ .ੇ ਜਾਣ ਅਤੇ ਵਰਤੋਂ ਤੋਂ ਪਹਿਲਾਂ ਕਮਰੇ ਦੇ ਤਾਪਮਾਨ ਤੇ ਵਾਪਸ ਜਾਣ ਦੀ ਆਗਿਆ ਦੇਣੀ ਚਾਹੀਦੀ ਹੈ
(20 ° ਤੋਂ 25 ਡਿਗਰੀ ਸੈਲਸੀਅਸ). ਵਰਤੋਂ ਤੋਂ ਤੁਰੰਤ ਬਾਅਦ ਫਰਿੱਜ ਵਿੱਚ ਸਾਰੇ ਰੀਐਜੈਂਟਾਂ ਨੂੰ ਸੁਰੱਖਿਅਤ ਕਰੋ.
2. ਸਾਰੇ ਨਮੂਨਿਆਂ ਅਤੇ ਨਿਯੰਤਰਣ ਵਰਤੋਂ ਤੋਂ ਪਹਿਲਾਂ ਵਿਰਲਾਪ ਕੀਤੇ ਜਾਣੇ ਚਾਹੀਦੇ ਹਨ.
3. ਹੈਸ 2-ਐਚਆਰਪੀ ਘੋਲ ਦੀ ਤਿਆਰੀ: ਡਿਲੂਟ ਹੈਸ 2-ਐਚਆਰਪੀ ਨੂੰ 1: 51 ਪਤਲੇ ਪਤਨ ਅਨੁਪਾਤ
ਬਫਰ. ਉਦਾਹਰਣ ਦੇ ਲਈ, ਐਚਆਰਪੀ ਡਿਸਪੁੱਟ ਬਫਰ ਦੀ 5.0 ਮਿ.0 ਐਮਐਲ ਦੇ ਨਾਲ ਹੈਸ 2-ਐਚਆਰਪੀ ਦੇ 100 ਡਾਲਰ ਦਾ ਨਿਲ ਕਰੋ
ਇੱਕ ਹੈਸ 2-ਐਚਆਰਪੀ ਹੱਲ ਬਣਾਓ.
4. 1 × ਧੋਣ ਦਾ ਹੱਲ ਤਿਆਰੀ: ਦੇ ਨਾਲ 20 × ਧੋਣ ਦੇ ਘੋਲ ਨਾਲ 20 × ਧੋਣਾ ਘੋਲ
1:19 ਦਾ ਵਾਲੀਅਮ ਅਨੁਪਾਤ. ਉਦਾਹਰਣ ਦੇ ਲਈ, 20 ਮਿ.ਲੀ. 20 ਮਿਲੀਲੀ ਨੂੰ 20 ਮਿ.ਲੀ. ਦੇ ਨਾਲ ਦੇ 380 ਮਿ.ਲੀਅਨ ਜਾਂ
400 ਮਿ.ਲੀ. ਦੇ 400 ਮਿ.ਲੀ. ਬਣਾਉਣ ਲਈ ਡਿਸਟਿਲਡ ਪਾਣੀ.
【ਟੈਸਟ ਵਿਧੀ】
1. ਵੱਖਰੇ ਟਿ ims ਬ ਵਿੱਚ, ਤਿਆਰ ਹੈਸ 2-ਐਚਆਰਪੀ ਹੱਲ ਦੇ 120000 ਛਾਲਾਂ ਵਿੱਚ.
2. ਹਰੇਕ ਟਿ .ਬ ਵਿੱਚ ਅਣਪਛਾਤੇ ਨਮੂਨੇ, ਅਣਪਛਾਤੇ ਨਮੂਨੇ, ਗੁਣਵੱਤਾ ਨਿਯੰਤਰਣ ਸ਼ਾਮਲ ਕਰੋ.
3. ਕਦਮ 2 ਵਿੱਚ ਤਿਆਰ ਕੀਤੇ ਮਾਈਕ੍ਰੋਪਲੇਟ ਖੂਹਾਂ ਵਿੱਚ ਤਿਆਰ ਕੀਤੇ ਮਾਈਕ੍ਰੋਪਲੇਟ ਖੂਹਾਂ ਵਿੱਚ ਤਿਆਰ ਕੀਤੇ ਗਏ ਹਰੇਕ ਮਿਸ਼ਰਣ ਦਾ 100 ਮਿਲੀਅਨ ਟ੍ਰਾਂਸਫਰ ਕਰੋ
ਟੈਸਟ ਕੌਂਫਿਗਰੇਸ਼ਨ ਨੂੰ ਨਿਰਧਾਰਤ ਕਰਨ ਲਈ.
3. ਪਲੇਟ ਨੂੰ ਪਲੇਟ ਸੀਲਰ ਨਾਲ cover ੱਕੋ ਅਤੇ 30 ਮਿੰਟਾਂ ਲਈ 37 ਡਿਗਰੀ ਸੈਲਸੀਅਸ ਕੇ ਰੱਖੋ.
4. ਪਲੇਟ ਸੀਲਰ ਨੂੰ ਹਟਾਓ ਅਤੇ ਪਲੇਟ ਨੂੰ ਲਗਭਗ 300 ਡਾਲਰ 1 × ਧੋਣ ਦਾ ਘੋਲ ਪ੍ਰਤੀ ਸ਼ੂਗਰ ਕਰੋ.
5. ਕਪੜੇ ਧੋਣ ਤੋਂ ਬਾਅਦ ਖੂਹਾਂ ਵਿੱਚ ਰਹਿੰਦ-ਖੂੰਹਦ ਨੂੰ ਛੱਡਣ ਲਈ ਕਾਗਜ਼ ਦੇ ਤੌਲੀਏ ਤੇ ਪਲੇਟ ਨੂੰ ਟੈਪ ਕਰੋ.
6. ਹਰੇਕ ਚੰਗੀ ਤਰ੍ਹਾਂ ਟੀਐਮਬੀ ਦੇ 100 RLS ਦਾ 100 RLL ਸ਼ਾਮਲ ਕਰੋ ਅਤੇ ਪਲੇਟ ਨੂੰ 20 ਮਿੰਟ ਲਈ 20 ਤੇ ਰੱਖੋ.
7. ਪ੍ਰਤੀਕ੍ਰਿਆ ਨੂੰ ਰੋਕਣ ਲਈ ਹਰੇਕ ਖੂਹ ਨੂੰ ਰੋਕਣ ਲਈ ਹਰੇਕ ਖੂਹ ਨੂੰ ਰੋਕਣ ਲਈ 50 ll ਸ਼ਾਮਲ ਕਰੋ.
8. ਮਾਈਕ੍ਰੋਲੇਟ ਰੀਡਰ ਵਿਚਲੇ ਸਮਾਈ ਨੂੰ 10 ਮਿੰਟਾਂ ਦੇ ਅੰਦਰ 450 ਐਨ.ਐਮ. (630nM ਦੇ ਤੌਰ ਤੇ ਐਕਸੈਸਰੀ ਹੈ)
ਉੱਚ ਸ਼ੁੱਧਤਾ ਕਾਰਗੁਜ਼ਾਰੀ ਲਈ ਸਿਫਾਰਸ਼ ਕੀਤੀ).