SARS-CoV-2 ਨਿਊਟਰਲਾਈਜ਼ਿੰਗ ਐਂਟੀਬਾਡੀ ਡਿਟੈਕਸ਼ਨ ਕਿੱਟ (ELISA)
【ਇਰਾਦਾ ਵਰਤੋਂ】
SARS-CoV-2 ਨਿਊਟਰਲਾਈਜ਼ਿੰਗ ਐਂਟੀਬਾਡੀ ਡਿਟੈਕਸ਼ਨ ਕਿੱਟ ਇੱਕ ਪ੍ਰਤੀਯੋਗੀ ਐਨਜ਼ਾਈਮ-ਲਿੰਕਡ ਇਮਯੂਨੋਸੋਰਬੈਂਟ ਅਸੇ (ELISA) ਹੈ ਜੋ ਮਨੁੱਖੀ ਸੀਰਮ ਅਤੇ ਪਲਾਜ਼ਮਾ ਵਿੱਚ SARS-CoV-2 ਲਈ ਕੁੱਲ ਨਿਰਪੱਖ ਐਂਟੀਬਾਡੀਜ਼ ਦੀ ਗੁਣਾਤਮਕ ਅਤੇ ਅਰਧ-ਗੁਣਾਤਮਕ ਖੋਜ ਲਈ ਹੈ। SARS- CoV-2 ਨਿਊਟਰਲਾਈਜ਼ਿੰਗ ਐਂਟੀਬਾਡੀ ਡਿਟੈਕਸ਼ਨ ਕਿੱਟ ਨੂੰ SARS- CoV-2 ਪ੍ਰਤੀ ਅਨੁਕੂਲ ਪ੍ਰਤੀਰੋਧਕ ਪ੍ਰਤੀਕਿਰਿਆ ਵਾਲੇ ਵਿਅਕਤੀਆਂ ਦੀ ਪਛਾਣ ਕਰਨ ਵਿੱਚ ਸਹਾਇਤਾ ਵਜੋਂ ਵਰਤਿਆ ਜਾ ਸਕਦਾ ਹੈ, ਜੋ ਕਿ ਹਾਲ ਹੀ ਵਿੱਚ ਜਾਂ ਪਹਿਲਾਂ ਦੀ ਲਾਗ ਨੂੰ ਦਰਸਾਉਂਦਾ ਹੈ। SARS-CoV-2 ਨਿਊਟਰਲਾਈਜ਼ਿੰਗ ਐਂਟੀਬਾਡੀ ਡਿਟੈਕਸ਼ਨ ਕਿੱਟ ਦੀ ਵਰਤੋਂ ਤੀਬਰ SARS-CoV-2 ਇਨਫੈਕਸ਼ਨ ਦੀ ਜਾਂਚ ਲਈ ਨਹੀਂ ਕੀਤੀ ਜਾਣੀ ਚਾਹੀਦੀ।
【ਜਾਣ-ਪਛਾਣ】
ਕੋਰੋਨਵਾਇਰਸ ਦੀ ਲਾਗ ਆਮ ਤੌਰ 'ਤੇ ਐਂਟੀਬਾਡੀ ਪ੍ਰਤੀਕ੍ਰਿਆਵਾਂ ਨੂੰ ਬੇਅਸਰ ਕਰਨ ਲਈ ਪ੍ਰੇਰਿਤ ਕਰਦੀ ਹੈ। ਕੋਵਿਡ-19 ਦੇ ਮਰੀਜ਼ਾਂ ਵਿੱਚ 7ਵੇਂ ਅਤੇ 14ਵੇਂ ਦਿਨ ਲੱਛਣ ਸ਼ੁਰੂ ਹੋਣ ਤੋਂ ਬਾਅਦ ਕ੍ਰਮਵਾਰ 50% ਅਤੇ 100% ਸੀਰੋਕਨਵਰਜ਼ਨ ਦਰਾਂ ਹਨ। ਗਿਆਨ ਨੂੰ ਪੇਸ਼ ਕਰਨ ਲਈ, ਖੂਨ ਵਿੱਚ ਐਂਟੀਬਾਡੀ ਨੂੰ ਬੇਅਸਰ ਕਰਨ ਵਾਲੇ ਵਾਇਰਸ ਨੂੰ ਐਂਟੀਬਾਡੀ ਦੀ ਪ੍ਰਭਾਵਸ਼ੀਲਤਾ ਨੂੰ ਨਿਰਧਾਰਤ ਕਰਨ ਲਈ ਇੱਕ ਟੀਚੇ ਵਜੋਂ ਮਾਨਤਾ ਪ੍ਰਾਪਤ ਹੈ ਅਤੇ ਨਿਊਟ੍ਰਲਾਈਜ਼ਿੰਗ ਐਂਟੀਬਾਡੀ ਦੀ ਉੱਚ ਤਵੱਜੋ ਉੱਚ ਸੁਰੱਖਿਆ ਪ੍ਰਭਾਵ ਨੂੰ ਦਰਸਾਉਂਦੀ ਹੈ। ਪਲੇਕ ਰਿਡਕਸ਼ਨ ਨਿਊਟ੍ਰਲਾਈਜ਼ੇਸ਼ਨ ਟੈਸਟ (ਪੀਆਰਐਨਟੀ) ਨੂੰ ਬੇਅਸਰ ਐਂਟੀਬਾਡੀਜ਼ ਦਾ ਪਤਾ ਲਗਾਉਣ ਲਈ ਸੋਨੇ ਦੇ ਮਿਆਰ ਵਜੋਂ ਮਾਨਤਾ ਦਿੱਤੀ ਗਈ ਹੈ। ਹਾਲਾਂਕਿ, ਇਸਦੇ ਘੱਟ ਥ੍ਰੋਪੁੱਟ ਅਤੇ ਓਪਰੇਸ਼ਨ ਲਈ ਉੱਚ ਲੋੜਾਂ ਦੇ ਕਾਰਨ, ਪੀਆਰਐਨਟੀ ਵੱਡੇ ਪੱਧਰ 'ਤੇ ਸੇਰੋਡਾਇਗਨੋਸਿਸ ਅਤੇ ਵੈਕਸੀਨ ਦੇ ਮੁਲਾਂਕਣ ਲਈ ਵਿਹਾਰਕ ਨਹੀਂ ਹੈ। SARS-CoV-2 ਨਿਊਟਰਲਾਈਜ਼ਿੰਗ ਐਂਟੀਬਾਡੀ ਡਿਟੈਕਸ਼ਨ ਕਿੱਟ ਪ੍ਰਤੀਯੋਗੀ ਐਨਜ਼ਾਈਮ-ਲਿੰਕਡ ਇਮਯੂਨੋਸੋਰਬੈਂਟ ਅਸੇ (ELISA) ਵਿਧੀ 'ਤੇ ਅਧਾਰਤ ਹੈ, ਜੋ ਖੂਨ ਦੇ ਨਮੂਨੇ ਵਿੱਚ ਨਿਊਟ੍ਰਲਾਈਜ਼ਿੰਗ ਐਂਟੀਬਾਡੀ ਦਾ ਪਤਾ ਲਗਾ ਸਕਦੀ ਹੈ ਅਤੇ ਨਾਲ ਹੀ ਇਸ ਕਿਸਮ ਦੇ ਐਂਟੀਬਾਡੀ ਦੇ ਗਾੜ੍ਹਾਪਣ ਪੱਧਰ ਤੱਕ ਵਿਸ਼ੇਸ਼ ਤੌਰ 'ਤੇ ਪਹੁੰਚ ਕਰ ਸਕਦੀ ਹੈ।
【ਟੈਸਟ ਦੀ ਪ੍ਰਕਿਰਿਆ】
1. ਵੱਖਰੇ ਟਿਊਬਾਂ ਵਿੱਚ, ਤਿਆਰ ਕੀਤੇ hACE2-HRP ਘੋਲ ਦਾ ਅਲੀਕੋਟ 120μL।
2. ਹਰੇਕ ਟਿਊਬ ਵਿੱਚ 6 μL ਕੈਲੀਬ੍ਰੇਟਰ, ਅਣਜਾਣ ਨਮੂਨੇ, ਗੁਣਵੱਤਾ ਨਿਯੰਤਰਣ ਸ਼ਾਮਲ ਕਰੋ ਅਤੇ ਚੰਗੀ ਤਰ੍ਹਾਂ ਮਿਲਾਓ।
3. ਪੂਰਵ-ਡਿਜ਼ਾਈਨ ਕੀਤੇ ਟੈਸਟ ਕੌਂਫਿਗਰੇਸ਼ਨ ਦੇ ਅਨੁਸਾਰ ਪੜਾਅ 2 ਵਿੱਚ ਤਿਆਰ ਕੀਤੇ ਹਰੇਕ ਮਿਸ਼ਰਣ ਦਾ 100μL ਅਨੁਸਾਰੀ ਮਾਈਕ੍ਰੋਪਲੇਟ ਖੂਹਾਂ ਵਿੱਚ ਟ੍ਰਾਂਸਫਰ ਕਰੋ।
3. ਪਲੇਟ ਨੂੰ ਪਲੇਟ ਸੀਲਰ ਨਾਲ ਢੱਕੋ ਅਤੇ 37°C 'ਤੇ 60 ਮਿੰਟਾਂ ਲਈ ਪ੍ਰਫੁੱਲਤ ਕਰੋ।
4. ਪਲੇਟ ਸੀਲਰ ਨੂੰ ਹਟਾਓ ਅਤੇ ਪਲੇਟ ਨੂੰ ਲਗਭਗ 300 μL 1× ਵਾਸ਼ ਘੋਲ ਪ੍ਰਤੀ ਖੂਹ ਨਾਲ ਚਾਰ ਵਾਰ ਧੋਵੋ।
5. ਕਦਮ ਧੋਣ ਤੋਂ ਬਾਅਦ ਖੂਹਾਂ ਵਿੱਚ ਬਚੇ ਹੋਏ ਤਰਲ ਨੂੰ ਹਟਾਉਣ ਲਈ ਕਾਗਜ਼ ਦੇ ਤੌਲੀਏ 'ਤੇ ਪਲੇਟ ਨੂੰ ਟੈਪ ਕਰੋ।
6. ਹਰੇਕ ਖੂਹ ਵਿੱਚ 100 μL TMB ਘੋਲ ਸ਼ਾਮਲ ਕਰੋ ਅਤੇ ਪਲੇਟ ਨੂੰ ਹਨੇਰੇ ਵਿੱਚ 20 - 25 ° C 'ਤੇ 20 ਮਿੰਟਾਂ ਲਈ ਪ੍ਰਫੁੱਲਤ ਕਰੋ।
7. ਪ੍ਰਤੀਕ੍ਰਿਆ ਨੂੰ ਰੋਕਣ ਲਈ ਹਰੇਕ ਖੂਹ ਵਿੱਚ 50 μL ਸਟਾਪ ਸਲਿਊਸ਼ਨ ਸ਼ਾਮਲ ਕਰੋ।
8. 10 ਮਿੰਟਾਂ ਦੇ ਅੰਦਰ 450 nm 'ਤੇ ਮਾਈਕ੍ਰੋਪਲੇਟ ਰੀਡਰ ਵਿੱਚ ਸੋਖਣ ਨੂੰ ਪੜ੍ਹੋ (ਉੱਚ ਸ਼ੁੱਧਤਾ ਪ੍ਰਦਰਸ਼ਨ ਲਈ ਐਕਸੈਸਰੀ ਵਜੋਂ 630nm ਦੀ ਸਿਫਾਰਸ਼ ਕੀਤੀ ਜਾਂਦੀ ਹੈ।