ସାର୍ମୋଡି ଡିଟର୍ନ ଡିଟେକ୍ଟିଟ୍ କିଟ୍ (ଏଲିସା) ନିରପେକ୍ଷ |
【ନୀତି】
ଆଣ୍ଟିବଡି ଡିଟେକ୍ଟ କିଟ୍ ନିରପେକ୍ଷ ଏଲାଇସା ପଦ୍ଧତି ଉପରେ ଆଧାରିତ |
ସରକାରୀ ସ୍ପିଙ୍ଗର ବାନ୍ଧିବା ଡୋମେନ୍ (RBD) ବ୍ୟବହାର କରି, ଭାଇରାଲ ସ୍ପାଇକ୍ (ଗୁଡିକ) ପ୍ରୋଟିନ୍ ଏବଂ ହୋଷ୍ଟ ସେଲ୍ |
Resାସାପକ୍ଟର ACE2, ଏହି ପରୀକ୍ଷଣରେ ଜୀବାଣୁ ହୋଷ୍ଟକୁ ନିରପେକ୍ଷ ସଂଯୋଗକୁ ଅନୁକରଣ କରିବା ପାଇଁ ଡିଜାଇନ୍ କରାଯାଇଛି |
କାଲିବ୍ରେଟର୍, ଗୁଣାତ୍ମକ ନିୟନ୍ତ୍ରଣ, ଏବଂ ସେରମ୍ କିମ୍ବା ପ୍ଲାଜମା ନମୁନାଗୁଡ଼ିକ ପୃଥକ ଭାବରେ ମିଶ୍ରିତ ମିଶ୍ରିତ |
BECE2-HRP କନଜୁଗର ଧାରଣ କରିଥିବା ବଫର୍ ଛୋଟ ଟ୍ୟୁବ୍ରେ ଆଲିକେଟ୍ | ତେବେ ମିଶ୍ରଣକୁ ସ୍ଥାନାନ୍ତରିତ ହୋଇଛି |
ମାଇକ୍ରୋପ୍ଲେଟ୍ କୂଅଗୁଡିକ ଅସ୍ଥିର ପୁନ brabilitive Rears-cov-2 rbd ଖଣ୍ଡ (RBD) ଧାରଣ କରିଥାଏ |
ଇନକ୍ୟୁବେସନ୍ 30 ମିନିଟର ଇନକ୍ୟୁବେସନ୍ ସମୟରେ, ଆରବୀମାନଙ୍କୁ କଲିବଟର୍, qc ଏବଂ
ସ୍ dros ିଡିରେ rbd ରେ ପ୍ରାଥମିକ ବାନ୍ଧିବା ପାଇଁ ନମୁନା hesce2-hrp ସହିତ ପ୍ରତିଦ୍ୱନ୍ଦ୍ୱିତା କରିବ | ପରେ
ଇନକ୍ୟୁବେସନ୍, ୟୁନୁଟୋାଉନ୍ HESS2-HRP କନଜୁଗାଟ ହଟାଇବା ପାଇଁ କୂଅରେ 4 ଥର ଧୋଇଥାଏ | ଏହାର ସମାଧାନ
କୋଠରୀ ତାପମାତ୍ରାରେ 20 ମିନିଟ୍ ପାଇଁ TMB ଯୋଡା ଯାଇଛି ଏବଂ ବିକାଶରେ ପରିଣତ ହୁଏ |
ନୀଳ ରଙ୍ଗ ରଙ୍ଗ ବିକାଶ 1N hcl ର ଯୋଗ ସହିତ ଅଟକି ଯାଇଛି, ଏବଂ ଅବଶୋଷଣ ହେଉଛି |
450 nm ରେ ସ୍ପେକ୍ଟ୍ରୋଫୋଟୋମୋମେଟ୍ରିକ୍ ମାପ | ଗଠିତ ରଙ୍ଗର ତୀବ୍ରତା ହେଉଛି ଆନୁପାତିକ |
ଉପସ୍ଥିତ ଥିବା ଏନଜାଇମର ପରିମାଣ, ଏବଂ ସମାନ ଭାବରେ ଆସୁଥିବା ମାନକ ପରିମାଣ ସହିତ ଜଡିତ |
ପ୍ରଦାନ କରାଯାଇଥିବା କାଲିବ୍ରେଟରମାନଙ୍କ ଦ୍ୱାରା ଗଠିତ କାଲିବ୍ରେସନ୍ ବକ୍ରଗୁଡିକ ସହିତ ତୁଳନାତ୍ମକ ଭାବରେ, ଏକାଗ୍ରତା |
ଅଜ୍ଞାତ ନମୁନାରେ ଆଣ୍ଟିବଡିଗୁଡ଼ିକୁ ନିରପେକ୍ଷ କରିବା ତାପରେ ଗଣନା କରାଯାଏ |
【ସାମଗ୍ରୀ ଆବଶ୍ୟକ କିନ୍ତୁ ପ୍ରଦାନ କରାଯାଇ ନାହିଁ |】
1 ଅବିଙ୍ଗିତ କିମ୍ବା ଡିଓନାଇଜଡ୍ ଜଳ |
୨। ସଠିକତା ପାଇପେଟ୍: 10μl, 100μl, 200μl ଏବଂ 1 ମିଲି |
3 ଡିସପୋଜେବଲ୍ ପାଇପେଟ୍ ଟିପ୍ସ |
4। ମାଇକ୍ରୋପ୍ଲେଟ୍ ପାଠକ 450NM ରେ ଅବଶୋଷଣ ପ reading ିବାରେ ସକ୍ଷମ |
5। ଅବଶୋଷଣ କାଗଜ |
6। ଗ୍ରାଫ୍ କାଗଜ |
7 ଭର୍ଟେକ୍ସ ମିକ୍ସର୍ କିମ୍ବା ସମାନ |
【ନମୁନା ସଂଗ୍ରହ ଏବଂ ସଂରକ୍ଷଣ |】
1। ସେବାରେ ସଂଗୃହିତ ଟ୍ୟୁବରେ ସଂଗୃହିତ ଟ୍ୟୁବ୍ସରେ ସଂଗୃହିତ K2-Edta ଏହି କିଟ୍ ପାଇଁ ବ୍ୟବହୃତ ହୋଇପାରେ |
2। ନିର୍ଦ୍ଦିଷ୍ଟ ହେବା ଉଚିତ ଏବଂ ଅନୁଧ୍ୟାନ କରିବା ପୂର୍ବରୁ 48 ଘଣ୍ଟା ପର୍ଯ୍ୟନ୍ତ 48 ଘଣ୍ଟା ପର୍ଯ୍ୟନ୍ତ ଗଚ୍ଛିତ ହୋଇପାରେ |
ଏକ ଦୀର୍ଘ ସମୟ ପାଇଁ ନମୁନାଗୁଡିକ (6 ମାସ ପର୍ଯ୍ୟନ୍ତ) (20 ° C ରେ ଏକ ଥରେ -20 ° C ରେ ଥରେ ଫ୍ରିଜ୍ ହେବା ଉଚିତ୍ |
ବାରମ୍ବାର ଫ୍ରିଜ୍-ଥୋ ଚକ୍ରରୁ ଦୂରେଇ ରୁହନ୍ତୁ |
ପ୍ରୋଟୋକଲ୍
【ନିର୍ଯ୍ୟାତନା ପ୍ରସ୍ତୁତି】
1 ସମସ୍ତ ରେଗେରେନ୍ସ ଫ୍ରିଜ୍ ଠାରୁ ବାହାରିବା ଏବଂ ବ୍ୟବହାର ପୂର୍ବରୁ କୋଠରୀ ତାପମାତ୍ରାକୁ ଫେରିବାକୁ ଅନୁମତି ଦେବା ଜରୁରୀ |
(20 ° 20 ° C) କୁ 25 ° C) | ବ୍ୟବହାର ପରେ ରେଫ୍ରିଜରେଟରରେ ସମସ୍ତ ରେଜେଣ୍ଟକୁ ସେଭ୍ କରନ୍ତୁ |
2 ସମସ୍ତ ନମୁନା ଏବଂ ନିୟନ୍ତ୍ରଣ ବ୍ୟବହାର ପୂର୍ବରୁ ଭର୍ଟେକ୍ସଡ୍ ହେବା ଉଚିତ୍ |
3 HACE2-HRP ସମାଧାନ ପ୍ରସ୍ତୁତି: DILUET HACE2-HRP କୁ 1 ରେ ଏକାଗ୍ରତା |
ବଫର୍ ଉଦାହରଣ ସ୍ୱରୂପ, HACE2-HECE2-HRP କୁ HACE2-HRP ସହିତ 5.0ML ର 5.0ml ସହିତ ଏକାଗ୍ରତା |
ଏକ HACE2-HRP ସମାଧାନ କର |
4। 1 × ଧୋଇଥିବା ସମାଧାନ ପ୍ରସ୍ତୁତି: ଏକ ସହିତ ଡିଓନାଇଜଡ୍ କିମ୍ବା ଡିଷ୍ଟିଲ୍ ପାଣି ସହିତ 20 × on ସ ot ଼ୁଥିବା ସମାଧାନକୁ ମିଶ୍ରିତ କରନ୍ତୁ |
1:19 ର ଭଲ୍ୟୁମ୍ ଅନୁପାତ | ଉଦାହରଣ ସ୍ୱରୂପ, 20 ML 20 ML କୁ 380 ML ର 380 ମିଲିଜ୍ ସହିତ ହ୍ରାସ କରନ୍ତୁ କିମ୍ବା |
1 × ଧୋଇବା ଷ୍ଟ୍ରୋଲ୍ ର 400 ML ତିଆରି କରିବାକୁ ଡିଷ୍ଟିଲ୍ ପାଣି |
【ପରୀକ୍ଷା ପ୍ରଣାଳୀ】
1 ଅଲଗା ଟ୍ୟୁବ୍ ରେ, ପ୍ରସ୍ତୁତ Hace2-hrp ସମାଧାନର 120μl |
୨। ପ୍ରତ୍ୟେକ ଟ୍ୟୁବରେ ଅଡଖ ବିଶିଷ୍ଟ ନମୁନା, ଅଜଣା ନମୁନା, ଅଥବା ସ୍ତରରେ ନିୟନ୍ତ୍ରଣ ମିଶ୍ରଣ କରନ୍ତୁ |
3। ପ୍ରତ୍ୟେକ ମିଶ୍ରଣକୁ ଅନୁରୂପ ମାଇକ୍ରୋପ୍ଲେଟ୍ କୂଅରେ ପ୍ରସ୍ତୁତ ହୋଇଥିବା ସମସ୍ତ ମିଶ୍ରଣକୁ ସ୍ଥାନାନ୍ତର କରନ୍ତୁ |
ପରୀକ୍ଷା ପରୀକ୍ଷା ନିର୍ଦ୍ଧାରଣ କରିବାକୁ |
3 ପ୍ଲେଟ୍ ସିଲର୍ ସହିତ ପ୍ଲେଟ୍ ସେଲର ଏବଂ 37 ମିନିଟ୍ ପାଇଁ ଇନପୁଟ୍ କରନ୍ତୁ |
4 ଥଟ୍ ସିଲର୍ କା remover ୍ଚାନ୍ତୁ ଏବଂ ଫିଲ୍ଟକୁ ଚାରିଥର 1 L ଧୋଇବା ସମାଧାନ ସହିତ 1 L ଧୋଇବା ସମାଧାନ କରନ୍ତୁ |
5 ୱାଟର ଷ୍ଟେପ୍ ଷ୍ଟେପ୍ ର ଷ୍ଟାଫ୍ ହ୍ୱାଇଡରେ ଅବଶିଷ୍ଟ ତରଳଗୁଡିକ ଅପସାରଣ କରିବାକୁ କାଗଜ ଟାୱେଲରେ ପ୍ଲାଟ୍ ଟ୍ୟାପ୍ କରନ୍ତୁ |
6। ପ୍ରତ୍ୟେକ କୂଅ ପାଇଁ 100 ରୁ TMB ସମାଧାନର 100 μL ଯୋଡନ୍ତୁ ଏବଂ 20 ମିନିଟ୍ ପାଇଁ 20 - 25 ° C ରେ ପ୍ଲେଟକୁ ଇନପୁଟ୍ କରନ୍ତୁ |
7 ପ୍ରତିକ୍ରିୟାକୁ ବନ୍ଦ କରିବା ପାଇଁ ପ୍ରତ୍ୟେକ କୂଅକୁ ଷ୍ଟପ୍ ସମାଧାନର 50 ଟି STOL ସମାଧାନ ଯୋଡନ୍ତୁ |
8। 10 ମିନିଟ ମଧ୍ୟରେ 450 nm (accixm ଭାବରେ 630nm) ମଧ୍ୟରେ ଅସଙ୍ଗତ ପାଠକ ଭାବରେ ଅବଶୋଷଣ ପ Read ଼ନ୍ତୁ |
ଉଚ୍ଚ ସଠିକତା କାର୍ଯ୍ୟଦକ୍ଷତା ପାଇଁ ସୁପାରିଶ କରାଯାଇଛି) |