Monkeypox Virus (MPV) nukleinsyredeteksjonssett

Settet inneholder reagenser for behandling av 48 tester eller kvalitetskontroll, inkludert følgende komponenter:

Reagens A

ReagensB

Merk: Komponentene til forskjellige batchnumre kan ikke brukes om hverandre

【Lagringsforhold og holdbarhet】

1.Reagens A/B kan lagres ved 2-30°C, og holdbarheten er 10 måneder.

2. Vennligst åpne reagensrørdekselet først når du er klar for testen.

3. Ikke bruk reagensglass etter utløpsdatoen.

4. Ikke bruk et deteksjonsrør for lekkasje.

【Gjeldende instrument】

Passer for Passer for LC480 PCR-analysesystem, Gentier 48E Automatisk PCR-analysesystem, ABI7500 PCR-analysesystem.

【Eksempelkrav】

1.Gjeldende prøvetyper: svelgprøver.

2. Prøvetakingsløsning:Etter verifisering anbefales det å bruke vanlig saltvanns- eller virusbevaringsrør produsert av Hangzhou Testsea biology for prøvetaking.

halsprøve:tørk av bilaterale svelgmandler og bakre svelgvegg med steril engangsprøvetakingsserviett, dypp vattpinne ned i røret som inneholder 3mL prøvetakingsløsning, kast halen og stram til rørdekselet.

3. Prøvelagring og levering:Prøvene som skal testes bør testes så snart som mulig.Transporttemperaturen bør holdes på 2 ~ 8 ℃. Prøvene som kan testes innen 24 timer kan lagres ved 2 ℃ ~ 8 ℃, og hvis prøvene ikke kan testes innen 24 timer, bør de lagres ved mindre enn eller lik til -70 ℃ (hvis det ikke er noen lagringsforhold på -70 ℃, kan det lagres ved -20 ℃ midlertidig), unngå gjentatte

frysing og tining.

4.Riktig prøvesamling, lagring og transport er avgjørende for ytelsen til dette produktet.

【Testmetode】

1. Prøvebehandling og prøvetilsetning

1.1 Prøvebehandling

Etter å ha blandet prøveløsningen ovenfor med prøver, ta 30 μL av prøven inn i DNA-frigjøringsreagensrøret og bland det jevnt.

1.2 Lasting

Ta 20μL av rekonstitueringsreagensen og tilsett den til MPV-deteksjonsreagensen, tilsett 5μL av den behandlede prøven ovenfor (den positive kontrollen og den negative kontrollen skal behandles parallelt med prøvene), dekk til rørlokket, sentrifuger den ved 2000 rpm i 10 sekunder.

2. PCR-amplifikasjon

2.1 Last den forberedte PCR-platen/-rørene til fluorescens-PCR-instrumentet. Negativ kontroll og positiv kontroll skal stilles inn for hver test.

2.2 Fluorescerende kanalinnstilling:

1) Velg FAM-kanal for MPV-deteksjon;

2) Velg HEX/VIC-kanal for internkontrollgendeteksjon;

3.Resultatanalyse

Sett grunnlinjen over det høyeste punktet på den negative kontrollens fluorescerende kurve.

4. Kvalitetskontroll

4.1 Negativ kontroll: Ingen Ct-verdi oppdaget i FAM、HEX/VIC-kanalen, eller Ct＞40；

4.2 Positiv kontroll: I FAM、HEX/VIC-kanal, Ct≤40；

4.3 Kravene ovenfor bør tilfredsstilles i samme forsøk, ellers er testresultatene ugyldige og forsøket må gjentas.

【Kutt av verdi】

En prøve anses som positiv når: Målsekvens Ct≤40, Internkontrollgenet Ct≤40.

【Resultattolkning】

Når kvalitetskontrollen er bestått, bør brukerne sjekke om det er en amplifikasjonskurve for hver prøve i HEX/VIC-kanalen, hvis det er det, og med Ct≤40 indikerte det at internkontrollgenet er vellykket amplifisert og denne spesielle testen er gyldig.Brukere kan gå videre til oppfølgingsanalysen:

3. For prøver med mislykket amplifikasjon av internkontrollgenet (HEX/VIC

kanal, Ct＞40, eller ingen amplifikasjonskurve), lav viral belastning eller eksistensen av PCR-hemmer kan være årsaken til feilen, undersøkelsen bør gjentas fra prøvesamlingen;

4.For positive prøver og dyrket virus påvirker ikke resultatene av internkontroll;

For prøver testet negative, må internkontrollen testes positiv ellers er det totale resultatet ugyldig og undersøkelsen må gjentas, med start fra prøvetakingstrinnet