Nucleïnezuurdetectiekit voor Monkeypox Virus (MPV).

De kit bevat reagentia voor het verwerken van 48 tests of kwaliteitscontrole, inclusief de volgende componenten:

Reagens A

ReagensB

Let op: De componenten van verschillende batchnummers kunnen niet door elkaar worden gebruikt

【Opslagomstandigheden en houdbaarheid】

1.Reagens A/B kan worden bewaard bij 2-30 °C en de houdbaarheid is 10 maanden.

2. Open het reageerbuisdeksel pas als u klaar bent voor de test.

3.Gebruik reageerbuisjes niet na de vervaldatum.

4. Gebruik geen lekkende detectiebuis.

【Toepasselijk instrument】

Geschikt voor Geschikt voor LC480 PCR-analysesysteem, Gentier 48E Automatisch PCR-analysesysteem, ABI7500 PCR-analysesysteem.

【Voorbeeldvereisten】

1. Toepasselijke monstertypen: monsters van keeluitstrijkjes.

2. Bemonsteringsoplossing:Na verificatie wordt aanbevolen om voor de monsterafname een normaal zoutoplossing- of virusconserveringsbuisje te gebruiken, geproduceerd door Hangzhou Testsea Biology.

keel staafje:Veeg de bilaterale keelamandelen en de achterste keelholtewand af met een steriel wegwerpmonstermonster, dompel het staafje onder in het buisje met 3 ml monsteroplossing, gooi de staart weg en draai het buisdeksel vast.

3. Monsteropslag en levering:De te testen monsters moeten zo snel mogelijk worden getest.De transporttemperatuur moet op 2 ~ 8 ℃ worden gehouden. De monsters die binnen 24 uur kunnen worden getest, kunnen worden opgeslagen bij 2 ℃ ~ 8 ℃ en als de monsters niet binnen 24 uur kunnen worden getest, moeten ze worden opgeslagen op minder dan of gelijk aan tot -70℃ (als er geen opslagconditie van -70℃ is, kan deze tijdelijk worden opgeslagen bij -20℃), vermijd herhaald

invriezen en ontdooien.

4. Een juiste monstername, opslag en transport zijn van cruciaal belang voor de prestaties van dit product.

【Testmethode】

1. Monsterverwerking en monstertoevoeging

1.1 Monsterverwerking

Na het mengen van de bovenstaande bemonsteringsoplossing met monsters, neemt u 30 μl van het monster in de DNA-reagensbuis en mengt u dit gelijkmatig.

1.2 Laden

Neem 20 μl van het reconstitutiereagens en voeg dit toe aan het MPV-detectiereagens, voeg 5 μl van het hierboven verwerkte monster toe (de positieve controle en de negatieve controle moeten parallel met de monsters worden verwerkt), bedek de buisdop en centrifugeer het gedurende 10 minuten bij 2000 tpm. seconden.

2. PCR-amplificatie

2.1 Laad de voorbereide PCR-plaat/buisjes in het fluorescentie-PCR-instrument. Voor elke test moeten de negatieve controle en de positieve controle worden ingesteld.

2.2 Fluorescentiekanaalinstelling:

1) Kies FAM-kanaal voor MPV-detectie;

2) Kies het HEX/VIC-kanaal voor gendetectie voor interne controle;

3. Resultatenanalyse

Stel de basislijn boven het hoogste punt van de fluorescentiecurve van de negatieve controle in.

4. Kwaliteitscontrole

4.1 Negatieve controle: geen Ct-waarde gedetecteerd in FAM, HEX/VIC-kanaal, of Ct＞40；

4.2 Positieve controle: in FAM, HEX/VIC-kanaal, Ct≤40;

4.3 Aan de bovenstaande vereisten moet in hetzelfde experiment worden voldaan, anders zijn de testresultaten ongeldig en moet het experiment worden herhaald.

【Waarde afsnijden】

Een monster wordt als positief beschouwd wanneer: Doelsequentie Ct≤40, Het interne controlegen Ct≤40.

【Resultaten interpretatie】

Zodra de kwaliteitscontrole is doorlopen, moeten gebruikers controleren of er een amplificatiecurve is voor elk monster in het HEX/VIC-kanaal. Als dat zo is en met Ct≤40, geeft dit aan dat het interne controlegen met succes is geamplificeerd en dat deze specifieke test geldig is.Gebruikers kunnen doorgaan met de vervolganalyse:

3. Voor monsters waarbij de amplificatie van het interne controlegen is mislukt (HEX/VIC

kanaal, Ct>40 of geen amplificatiecurve), lage virale belasting of de aanwezigheid van een PCR-remmer kunnen de reden van het falen zijn; het onderzoek moet worden herhaald vanaf de monsterverzameling;

4. Voor positieve monsters en gekweekte virussen zijn de resultaten van de interne controle niet van invloed;

Voor negatief geteste monsters moet de interne controle positief worden getest, anders is het algehele resultaat ongeldig en moet het onderzoek worden herhaald, te beginnen bij de stap van het verzamelen van het monster.