Monkeypox Virus (MPV) न्यूक्लिक एसिड पत्ता लगाउने किट

किटमा निम्न अवयवहरू सहित ४८ परीक्षण वा गुणस्तर नियन्त्रण प्रशोधनका लागि अभिकर्मकहरू समावेश छन्:

अभिकर्मक ए

अभिकर्मकB

नोट: विभिन्न ब्याच नम्बरहरूको कम्पोनेन्टहरू आदानप्रदान गर्न सकिँदैन

【भण्डारण अवस्था र शेल्फ जीवन】

1.Reagent A/B 2-30°C मा भण्डारण गर्न सकिन्छ, र शेल्फ जीवन 10 महिना हो।

2. कृपया परीक्षणको लागि तयार हुँदा मात्र टेस्ट ट्यूब कभर खोल्नुहोस्।

3. म्याद समाप्ति मिति भन्दा बाहिर परीक्षण ट्यूब प्रयोग नगर्नुहोस्।

4. चुहावट पत्ता लगाउने ट्यूब प्रयोग नगर्नुहोस्।

【लागू हुने साधन】

LC480 PCR विश्लेषण प्रणाली, Gentier 48E स्वचालित PCR विश्लेषण प्रणाली, ABI7500 PCR विश्लेषण प्रणाली को लागी उपयुक्त को लागी उपयुक्त।

【नमूना आवश्यकताहरू】

1. लागू नमूना प्रकारहरू: घाँटी स्वाब नमूनाहरू।

2. नमूना समाधान:प्रमाणीकरण पछि, नमूना सङ्कलनको लागि हांग्जो टेस्टसी जीवविज्ञान द्वारा उत्पादित सामान्य सलाईन वा भाइरस संरक्षण ट्यूब प्रयोग गर्न सिफारिस गरिन्छ।

घाँटी स्वाब:डिस्पोजेबल बाँझ नमूना स्वाबको साथ द्विपक्षीय फरिन्जियल टन्सिल र पोस्टरियर फरिन्जियल भित्ता पुछ्नुहोस्, स्वाबलाई 3mL नमूना समाधान भएको ट्यूबमा डुबाउनुहोस्, पुच्छर खारेज गर्नुहोस्, र ट्यूब कभरलाई कडा गर्नुहोस्।

3. नमूना भण्डारण र वितरण:परीक्षण गरिने नमूनाहरू जतिसक्दो चाँडो परीक्षण गर्नुपर्छ।यातायातको तापक्रम 2 ~ 8 ℃ मा राख्नुपर्छ। 24 घण्टा भित्र परीक्षण गर्न सकिने नमूनाहरू 2 ℃ ~ 8 ℃ मा भण्डारण गर्न सकिन्छ र यदि नमूनाहरू 24 घण्टा भित्र परीक्षण गर्न सकिँदैन भने, यो भन्दा कम वा बराबरमा भण्डारण गर्नुपर्छ। -70 ℃ (यदि त्यहाँ -70 ℃ को कुनै भण्डारण अवस्था छैन भने, यसलाई अस्थायी रूपमा -20 ℃ मा भण्डारण गर्न सकिन्छ), दोहोर्याउनबाट जोगिन

चिसो र गल्ने।

4. उचित नमूना सङ्कलन, भण्डारण, र यातायात यस उत्पादनको प्रदर्शनको लागि महत्वपूर्ण छन्।

【परीक्षण विधि】

1. नमूना प्रशोधन र नमूना थप

1.1 नमूना प्रशोधन

माथिको नमूना समाधानलाई नमूनाहरूसँग मिसाएपछि, नमूनाको 30μL DNA रिलीज अभिकर्मक ट्यूबमा लिनुहोस् र यसलाई समान रूपमा मिलाउनुहोस्।

१.२ लोड हुँदैछ

पुनर्गठन अभिकर्मकको 20μL लिनुहोस् र यसलाई MPV पत्ता लगाउने अभिकर्मकमा थप्नुहोस्, माथिको प्रशोधित नमूनाको 5μL थप्नुहोस् (सकारात्मक नियन्त्रण र नकारात्मक नियन्त्रण नमूनाहरूसँग समानान्तरमा प्रशोधन गरिनेछ), ट्यूब क्याप छोप्नुहोस्, यसलाई 2000rpm मा 10 को लागि सेन्ट्रीफ्यूज गर्नुहोस्। सेकेन्ड।

2. PCR प्रवर्धन

2.1 तयार PCR प्लेट/ट्युबहरू फ्लोरोसेन्स PCR उपकरणमा लोड गर्नुहोस्, प्रत्येक परीक्षणको लागि नकारात्मक नियन्त्रण र सकारात्मक नियन्त्रण सेट गरिनेछ।

2.2 फ्लोरोसेन्ट च्यानल सेटिङ:

1) MPV पत्ता लगाउन FAM च्यानल छनौट गर्नुहोस्;

२) आन्तरिक नियन्त्रण जीन पत्ता लगाउनको लागि HEX/VIC च्यानल छान्नुहोस्；

3. परिणाम विश्लेषण

नकारात्मक नियन्त्रणको फ्लोरोसेन्ट वक्रको उच्चतम बिन्दु माथि आधार रेखा सेट गर्नुहोस्।

4. गुणस्तर नियन्त्रण

4.1 नकारात्मक नियन्त्रण: FAM, HEX/VIC च्यानल, वा Ct＞40; मा कुनै Ct मान फेला परेन

4.2 सकारात्मक नियन्त्रण: FAM, HEX/VIC च्यानल, Ct≤40;

4.3 माथिका आवश्यकताहरू एउटै प्रयोगमा सन्तुष्ट हुनुपर्दछ, अन्यथा परीक्षण परिणामहरू अमान्य हुनेछन् र प्रयोग दोहोर्याउन आवश्यक छ।

【मूल्य कटौती गर्नुहोस्】

नमूनालाई सकारात्मक मानिन्छ जब: लक्ष्य अनुक्रम Ct≤40, आन्तरिक नियन्त्रण जीन Ct≤40।

【परिणाम व्याख्या】

एक पटक गुणस्तर नियन्त्रण पास भएपछि, प्रयोगकर्ताहरूले HEX/VIC च्यानलमा प्रत्येक नमूनाको लागि एम्प्लीफिकेशन कर्भ छ कि छैन जाँच गर्नुपर्छ, यदि त्यहाँ छ र Ct≤40 सँग, यसले आन्तरिक नियन्त्रण जीन सफलतापूर्वक एम्प्लीफाइड भएको संकेत गरेको छ र यो विशेष परीक्षण मान्य छ।प्रयोगकर्ताहरूले अनुगमन विश्लेषण गर्न अगाडि बढ्न सक्छन्:

3. आन्तरिक नियन्त्रण जीनको प्रवर्धन असफल भएको नमूनाहरूको लागि (HEX/VIC

च्यानल, Ct＞40, वा एम्प्लीफिकेशन कर्भ छैन), कम भाइरल लोड वा PCR अवरोधकको अस्तित्व असफलताको कारण हुन सक्छ, नमूना संकलनबाट परीक्षा दोहोर्याउनु पर्छ;

4. सकारात्मक नमूनाहरू र कल्चर गरिएको भाइरसको लागि, आन्तरिक नियन्त्रणको नतिजालाई असर गर्दैन;

नमूना परीक्षण नेगेटिभका लागि, आन्तरिक नियन्त्रण सकारात्मक परीक्षण गर्न आवश्यक छ अन्यथा समग्र परिणाम अमान्य हुनेछ र नमूना सङ्कलन चरणबाट सुरु गरी परीक्षा दोहोर्याउनु पर्छ।