Kit ta 'Sejbien ta' Antikorpi Sars-Cov-2 Neutralizing （ELISA)
【Użu maħsub】
Kit ta 'skoperta ta' antikorpi li jinnewtralizzaw SARS-CoV-2 huwa analiżi ta 'immunosorbenti marbuta ma' l-enzima kompetittiva (ELISA) maħsuba għal skoperta kwalitattiva u semi-kwantitattiva ta 'antikorpi newtralizzanti totali għal SARS-Cov-2 fis-serum uman u fil-plażma. Il-kit ta 'skoperta ta' antikorpi li jinnewtralizza s-SARS-COV-2 jista 'jintuża bħala għajnuna fl-identifikazzjoni ta' individwi b'reazzjoni immuni adattattiva għal SARS-COV-2, li jindika infezzjoni riċenti jew minn qabel. Il-kit ta 'skoperta ta' antikorpi li jinnewtralizza SARS-CoV-2 m'għandux jintuża biex jiddijanjostika infezzjoni akuta ta 'SARS-Cov-2.
【Introduzzjoni】
Infezzjonijiet tal-koronavirus tipikament jikkawżaw risponsi ta 'antikorpi newtralizzanti. Ir-rati ta 'serokonverżjoni f'pazjenti COVID-19 huma 50% u 100% fil-jum 7 u 14 wara l-bidu tas-sintomi, rispettivament. Biex tippreżenta l-għarfien, l-antikorpi li jinnewtralizzaw il-virus korrispondenti fid-demm huwa rikonoxxut bħala mira għad-determinazzjoni tal-effikaċja tal-antikorpi u konċentrazzjoni ogħla tal-antikorpi newtralizzanti jindikaw effikaċja ta 'protezzjoni ogħla. It-test tan-newtralizzazzjoni tat-tnaqqis tal-plakka (PRNT) ġie rikonoxxut bħala l-istandard tad-deheb għall-iskoperta ta 'antikorpi newtralizzanti. Madankollu, minħabba l-fluss baxx tagħha u r-rekwiżit ogħla għall-operazzjoni, il-PRNT mhuwiex prattiku għal serodijosi fuq skala kbira u evalwazzjoni tal-vaċċini. Il-kit ta 'skoperta ta' antikorpi li jinnewtralizza SARS-CoV-2 huwa bbażat fuq metodoloġija ta 'test immunosorbenti marbuta ma' l-enzimi (ELISA) kompetittiva, li tista 'tiskopri l-antikorpi newtralizzanti fil-kampjun tad-demm kif ukoll aċċess apposta għall-livelli ta' konċentrazzjoni ta 'dan it-tip ta' antikorpi.
【Proċedura tat-test】
1. F'tubi separati, alikwot ta '120μl tas-soluzzjoni ppreparata ta' HACE2-HRP.
2. Add 6 μl ta 'kalibraturi, kampjuni mhux magħrufa, kontrolli ta' kwalità f'kull tubu u ħawwad sewwa.
3.Transfer 100μL ta 'kull taħlita mħejjija fil-pass 2 f'bjar tal-microplate korrispondenti skond il-konfigurazzjoni tat-test predisinjata.
3.Cover il-pjanċa bis-siġillatur tal-pjanċa u inkuba f'37 ° C għal 60 minuta.
4.Remove il-pjanċa li tissiġilla u aħsel il-pjanċa b'300 μL approssimattiv ta '1 × soluzzjoni tal-ħasil kull bir għal erba' darbiet.
5.Tap il-pjanċa fuq xugaman tal-karta biex tneħħi likwidu residwu fil-bjar wara l-ħasil tal-passi.
6.Add 100 μl ta 'soluzzjoni TMB għal kull bir u inkuba l-pjanċa fid-dlam f'20 - 25 ° C għal 20 minuta.
7.Add 50 μl ta 'soluzzjoni ta' waqfien għal kull bir biex twaqqaf ir-reazzjoni.
8. Aqra l-assorbenza fil-qarrej tal-microplate f'450 nm fi żmien 10 minuti (630nm bħala aċċessorju huwa rrakkomandat għal prestazzjoni ta 'preċiżjoni ogħla.
