Kit ta' Individwazzjoni ta' Antikorpi Newtralizzanti SARS-CoV-2 (ELISA)
【UŻU INTENZJONAT】
SARS-CoV-2 Neutralizing Antibody Detection Kit huwa Kompetittiv Enzyme Linked Immunosorbent Assay (ELISA) maħsub għal skoperta kwalitattiva u semi-kwantitattiva ta 'antikorpi newtralizzanti totali għal SARS-CoV-2 fis-serum u fil-plażma tal-bniedem. Is-SARS-CoV-2 Newtraliizing Antibody Detection Kit jista 'jintuża bħala għajnuna fl-identifikazzjoni ta' individwi b'rispons immuni adattiv għal SARS-CoV-2, li jindika infezzjoni reċenti jew preċedenti. Il-Kit ta' Sejbien ta' Antikorpi Neutralizzanti SARS-CoV-2 m'għandux jintuża biex tiġi djanjostikata infezzjoni akuta minn SARS-CoV-2.
【INTRODUZZJONI】
L-infezzjonijiet tal-koronavirus tipikament jinduċu risponsi ta’ antikorpi newtralizzanti. Ir-rati ta’ serokonverżjoni f’pazjenti COVID-19 huma 50% u 100% fil-jum 7 u 14 wara l-bidu tas-sintomi, rispettivament. Biex tippreżenta l-għarfien, antikorp newtralizzanti tal-virus korrispondenti fid-demm huwa rikonoxxut bħala mira għad-determinazzjoni tal-effikaċja tal-antikorpi u konċentrazzjoni ogħla tal-antikorp newtralizzanti tindika effikaċja ta 'protezzjoni ogħla. It-Test tan-Newtralizzazzjoni tat-Tnaqqis tal-Plakka (PRNT) ġie rikonoxxut bħala l-istandard tad-deheb għall-iskoperta ta 'antikorpi newtralizzanti. Madankollu, minħabba l-fluss baxx tiegħu u r-rekwiżit ogħla għat-tħaddim, PRNT mhuwiex prattiku għal serodijanjosi fuq skala kbira u valutazzjoni tal-vaċċin. Il-Kit ta 'Sejbien ta' Antikorpi Newtralizzanti SARS-CoV-2 huwa bbażat fuq metodoloġija Kompetittiva ta 'Assaġġi Immunosorbenti Marbuta ma' Enżimi (ELISA), li tista' tiskopri l-antikorp newtralizzanti fil-kampjun tad-demm kif ukoll taċċessa b'mod speċjali l-livelli ta 'konċentrazzjoni ta' dan it-tip ta 'antikorp.
【Proċedura tat-Test】
1.F'tubi separati, alikwott 120μL tas-Soluzzjoni ppreparata hACE2-HRP.
2.Żid 6 μL ta 'kalibraturi, kampjuni mhux magħrufa, kontrolli ta' kwalità f'kull tubu u ħawwad sew.
3. Ittrasferixxi 100μL ta 'kull taħlita ppreparata fil-pass 2 fi bjar tal-mikroplate korrispondenti skont il-konfigurazzjoni tat-test iddisinjata minn qabel.
3.Għatti l-pjanċa bi Plate Sealer u inkuba f'37°C għal 60 minuta.
4.Neħħi l-Plate Sealer u aħsel il-pjanċa b'madwar 300 μL ta' 1× Wash Solution għal kull bir għal erba' darbiet.
5.Tektek il-pjanċa fuq xugaman tal-karta biex tneħħi l-likwidu residwu fil-bjar wara l-passi tal-ħasil.
6.Żid 100 μL ta' Soluzzjoni TMB f'kull bir u inkuba l-pjanċa fid-dlam f'20 – 25°C għal 20 minuta.
7.Żid 50 μL ta 'Stop Solution ma' kull bir biex twaqqaf ir-reazzjoni.
8.Aqra l-assorbiment fil-qarrej tal-mikroplate f'450 nm fi żmien 10 minuti (630nm bħala aċċessorju huwa rakkomandat għal prestazzjoni ta 'preċiżjoni ogħla.
