Kit Pengesanan Antibodi Meneutralkan SARS-CoV-2 （ELISA)
【PENGGUNAAN YANG DIMAKSUDKAN】
Kit Pengesanan Antibodi Meneutralkan SARS-CoV-2 ialah Ujian Imunosorben Berkaitan Enzim Kompetitif (ELISA) yang bertujuan untuk pengesanan kualitatif dan separa kuantitatif bagi jumlah antibodi peneutral kepada SARS-CoV-2 dalam serum dan plasma manusia. Kit Pengesanan Antibodi Meneutralkan SARS- CoV-2 boleh digunakan sebagai bantuan dalam mengenal pasti individu yang mempunyai tindak balas imun adaptif terhadap SARS- CoV-2, yang menunjukkan jangkitan baru-baru ini atau sebelumnya. Kit Pengesanan Antibodi Meneutralkan SARS-CoV-2 tidak boleh digunakan untuk mendiagnosis jangkitan SARS-CoV-2 akut.
【PENGENALAN】
Jangkitan koronavirus biasanya mendorong tindak balas antibodi yang meneutralkan. Kadar seroconversion dalam pesakit COVID-19 masing-masing adalah 50% dan 100% pada hari ke-7 dan ke-14 selepas simptom. Untuk menyampaikan pengetahuan, antibodi peneutral virus yang sepadan dalam darah diiktiraf sebagai sasaran untuk menentukan keberkesanan antibodi dan kepekatan antibodi peneutral yang lebih tinggi menunjukkan keberkesanan perlindungan yang lebih tinggi. Ujian Peneutralan Pengurangan Plak (PRNT) telah diiktiraf sebagai piawaian emas untuk mengesan antibodi peneutral. Walau bagaimanapun, disebabkan daya pengeluarannya yang rendah dan keperluan operasi yang lebih tinggi, PRNT tidak praktikal untuk serodiagnosis dan penilaian vaksin berskala besar. Kit Pengesanan Antibodi Meneutralkan SARS-CoV-2 adalah berdasarkan metodologi Competitive Enzyme-Linked Immunosorbent Assay (ELISA), yang boleh mengesan antibodi peneutral dalam sampel darah serta mengakses secara khusus tahap kepekatan antibodi jenis ini.
【Prosedur Ujian】
1. Dalam tiub berasingan, aliquot 120μL Penyelesaian hACE2-HRP yang disediakan.
2.Tambahkan 6 μL kalibrator, sampel yang tidak diketahui, kawalan kualiti dalam setiap tiub dan gaul rata.
3. Pindahkan 100μL setiap campuran yang disediakan dalam langkah 2 ke dalam telaga mikroplat yang sepadan mengikut konfigurasi ujian yang telah direka bentuk.
3. Tutup pinggan dengan Plate Sealer dan eramkan pada suhu 37°C selama 60 minit.
4. Tanggalkan Pengedap Plat dan basuh pinggan dengan anggaran 300 μL 1× Larutan Cuci setiap telaga selama empat kali.
5. Ketuk pinggan pada tuala kertas untuk mengeluarkan sisa cecair di dalam telaga selepas langkah mencuci.
6.Tambahkan 100 μL TMB Solution ke dalam setiap perigi dan eramkan plat dalam gelap pada suhu 20 – 25°C selama 20 minit.
7.Tambahkan 50 μL Stop Solution pada setiap perigi untuk menghentikan tindak balas.
8. Baca penyerapan dalam pembaca plat mikro pada 450 nm dalam masa 10 minit (630nm sebagai aksesori disyorkan untuk prestasi ketepatan yang lebih tinggi.
