Kit Pengesanan Asid Nukleik Virus Monkeypox (MPV).

Kit mengandungi reagen untuk memproses 48 ujian atau kawalan kualiti, termasuk komponen berikut:

Reagen A

ReagenB

Nota: Komponen nombor kelompok yang berbeza tidak boleh digunakan secara bergantian

【Keadaan Penyimpanan Dan Jangka Hayat】

1.Reagen A/B boleh disimpan pada suhu 2-30°C, dan jangka hayat ialah 10 bulan.

2.Sila buka penutup tabung uji hanya apabila anda sudah bersedia untuk ujian.

3.Jangan gunakan tabung uji melebihi tarikh luput.

4.Jangan gunakan tiub pengesan bocor.

【Instrumen Berkenaan】

Sesuai untuk Sesuai untuk sistem analisis PCR LC480, Sistem analisis PCR Automatik Gentier 48E, sistem analisis PCR ABI7500.

【Keperluan Sampel】

1. Jenis sampel yang berkenaan: sampel sapuan tekak.

2. Penyelesaian pensampelan:Selepas pengesahan, adalah disyorkan untuk menggunakan garam biasa atau tiub pemeliharaan Virus yang dihasilkan oleh biologi Hangzhou Testsea untuk pengumpulan sampel.

sapuan tekak:lap tonsil pharyngeal dua hala dan dinding pharyngeal posterior dengan swab pensampelan steril pakai buang, rendam swab ke dalam tiub yang mengandungi larutan pensampelan 3mL, buang ekor, dan ketatkan penutup tiub.

3. Sampel penyimpanan dan penghantaran:Sampel yang akan diuji hendaklah diuji secepat mungkin.Suhu pengangkutan hendaklah disimpan pada 2~8 ℃. Sampel yang boleh diuji dalam masa 24 jam boleh disimpan pada 2 ℃ ~ 8 ℃ dan jika sampel tidak dapat diuji dalam masa 24 jam, ia harus disimpan pada kurang daripada atau sama. hingga -70 ℃ (jika tiada keadaan penyimpanan -70 ℃, ia boleh disimpan pada -20 ℃ buat sementara waktu), elakkan berulang

pembekuan dan pencairan.

4. Pengumpulan, penyimpanan dan pengangkutan sampel yang betul adalah penting untuk prestasi produk ini.

【Kaedah Pengujian】

1. Pemprosesan sampel dan penambahan sampel

1.1 Pemprosesan sampel

Selepas mencampurkan larutan pensampelan di atas dengan sampel, ambil 30μL sampel ke dalam tiub reagen pembebasan DNA dan gaulkannya secara sekata.

1.2 Memuatkan

Ambil 20μL reagen penyusunan semula dan tambahkannya pada reagen pengesan MPV, tambah 5μL sampel yang diproses di atas (Kawalan positif dan kawalan negatif hendaklah diproses selari dengan sampel), tutup penutup tiub, sentrifuge pada 2000rpm selama 10 detik.

2. Penguatan PCR

2.1 Muatkan plat/tiub PCR yang disediakan ke instrumen PCR pendarfluor, Kawalan negatif dan kawalan positif hendaklah ditetapkan untuk setiap ujian.

2.2 Tetapan saluran pendarfluor：

1)Pilih saluran FAM untuk pengesanan MPV；

2)Pilih saluran HEX/VIC untuk pengesanan gen kawalan dalaman；

3.Analisis keputusan

Tetapkan garis asas di atas titik tertinggi lengkung pendarfluor kawalan negatif.

4. Kawalan kualiti

4.1 Kawalan negatif：Tiada nilai Ct dikesan dalam saluran FAM、HEX/VIC, atau Ct＞40；

4.2 Kawalan positif：Dalam saluran FAM、HEX/VIC, Ct≤40；

4.3 Keperluan di atas harus dipenuhi dalam eksperimen yang sama, jika tidak, keputusan ujian adalah tidak sah dan eksperimen perlu diulang.

【Potong nilai】

Sampel dianggap sebagai positif apabila: Urutan sasaran Ct≤40, Gen kawalan dalaman Ct≤40.

【Tafsiran keputusan】

Setelah kawalan kualiti diluluskan, pengguna harus menyemak sama ada terdapat lengkung amplifikasi untuk setiap sampel dalam saluran HEX/VIC, jika ada dan dengan Ct≤40, ia menunjukkan gen kawalan dalaman berjaya dikuatkan dan ujian khusus ini adalah sah.Pengguna boleh meneruskan analisis susulan:

3.Untuk sampel dengan penguatan gen kawalan dalaman gagal (HEX/VIC

saluran, Ct＞40, atau tiada lengkung amplifikasi), beban Viral yang rendah atau kewujudan perencat PCR boleh menjadi sebab kegagalan, pemeriksaan harus diulang dari pengumpulan spesimen;

4. Bagi sampel positif dan virus berbudaya, keputusan kawalan dalaman tidak menjejaskan;

Bagi sampel yang diuji negatif, kawalan dalaman perlu diuji positif jika tidak, keputusan keseluruhan adalah tidak sah dan pemeriksaan perlu diulang, bermula dari langkah pengumpulan spesimen