मंकीपॉक्स व्हायरस (MPV) न्यूक्लिक ॲसिड डिटेक्शन किट

किटमध्ये खालील घटकांसह 48 चाचण्या किंवा गुणवत्ता नियंत्रण प्रक्रियेसाठी अभिकर्मक असतात:

अभिकर्मक ए

अभिकर्मकB

टीप: वेगवेगळ्या बॅच क्रमांकांचे घटक एकमेकांना बदलता येत नाहीत

【स्टोरेज अटी आणि शेल्फ लाइफ】

1. अभिकर्मक A/B 2-30°C तापमानात साठवले जाऊ शकते आणि शेल्फ लाइफ 10 महिने आहे.

2. तुम्ही चाचणीसाठी तयार असाल तेव्हाच कृपया टेस्ट ट्यूब कव्हर उघडा.

3. कालबाह्यता तारखेच्या पुढे चाचणी ट्यूब वापरू नका.

4. लीकिंग डिटेक्शन ट्यूब वापरू नका.

【लागू साधन】

LC480 PCR विश्लेषण प्रणाली, Gentier 48E ऑटोमॅटिक PCR विश्लेषण प्रणाली, ABI7500 PCR विश्लेषण प्रणालीसाठी योग्य.

【नमुना आवश्यकता】

1.लागू नमुना प्रकार: घशातील स्वॅबचे नमुने.

2.सॅम्पलिंग सोल्यूशन:पडताळणीनंतर, नमुना संकलनासाठी हँगझोउ टेस्टसी बायोलॉजीद्वारे उत्पादित सामान्य सलाईन किंवा विषाणू संरक्षण ट्यूब वापरण्याची शिफारस केली जाते.

घसा घासणे:डिस्पोजेबल निर्जंतुकीकरण सॅम्पलिंग स्वॅबने द्विपक्षीय फॅरेंजियल टॉन्सिल आणि पोस्टरियरीअर फॅरेंजियल वॉल पुसून टाका, 3mL सॅम्पलिंग सोल्यूशन असलेल्या ट्यूबमध्ये स्वॅब बुडवा, शेपूट टाकून द्या आणि ट्यूब कव्हर घट्ट करा.

3.नमुना स्टोरेज आणि वितरण:तपासले जाणारे नमुने लवकरात लवकर तपासावेत.वाहतुकीचे तापमान 2 ~ 8 ℃ ठेवावे. 24 तासांच्या आत तपासले जाऊ शकणारे नमुने 2 ℃ ~ 8 ℃ वर संग्रहित केले जाऊ शकतात आणि जर नमुने 24 तासांच्या आत तपासले जाऊ शकत नाहीत, तर ते 24 तासांच्या आत किंवा बरोबरीने साठवले जावे. ते -70 ℃ (-70 ℃ ची स्टोरेज स्थिती नसल्यास, ते तात्पुरते -20 ℃ वर साठवले जाऊ शकते), पुनरावृत्ती टाळा

अतिशीत आणि वितळणे.

4. या उत्पादनाच्या कामगिरीसाठी योग्य नमुना संकलन, स्टोरेज आणि वाहतूक महत्त्वपूर्ण आहे.

【चाचणी पद्धत】

1.नमुना प्रक्रिया आणि नमुना जोडणे

1.1 नमुना प्रक्रिया

वरील सॅम्पलिंग सोल्युशन नमुन्यांमध्ये मिसळल्यानंतर, 30μL नमुना डीएनए रिलीझ अभिकर्मक ट्यूबमध्ये घ्या आणि ते समान रीतीने मिसळा.

1.2 लोड होत आहे

20μL पुनर्रचना अभिकर्मक घ्या आणि ते MPV शोध अभिकर्मकामध्ये जोडा, वरील प्रक्रिया केलेल्या नमुन्यातील 5μL जोडा (सकारात्मक नियंत्रण आणि नकारात्मक नियंत्रण नमुन्यांसोबत समांतरपणे प्रक्रिया केली जाईल), ट्यूब कॅप झाकून ठेवा, 2000rpm वर 10 साठी सेंट्रीफ्यूज करा. सेकंद

2. पीसीआर प्रवर्धन

2.1 तयार पीसीआर प्लेट/ट्यूब फ्लूरोसेन्स पीसीआर उपकरणावर लोड करा, प्रत्येक चाचणीसाठी नकारात्मक नियंत्रण आणि सकारात्मक नियंत्रण सेट केले जाईल.

2.2 फ्लोरोसेंट चॅनेल सेटिंग:

1) MPV शोधण्यासाठी FAM चॅनेल निवडा;

2) अंतर्गत नियंत्रण जनुक शोधण्यासाठी HEX/VIC चॅनेल निवडा;

3. परिणाम विश्लेषण

निगेटिव्ह कंट्रोलच्या फ्लोरोसेंट वक्रच्या सर्वोच्च बिंदूच्या वर बेस लाइन सेट करा.

4.गुणवत्ता नियंत्रण

4.1 नकारात्मक नियंत्रण: FAM、HEX/VIC चॅनेल, किंवा Ct＞40； मध्ये कोणतेही Ct मूल्य आढळले नाही

4.2 सकारात्मक नियंत्रण: FAM मध्ये, HEX/VIC चॅनेल, Ct≤40;

4.3 वरील आवश्यकता त्याच प्रयोगात पूर्ण केल्या पाहिजेत, अन्यथा चाचणीचे परिणाम अवैध असतील आणि प्रयोगाची पुनरावृत्ती करावी लागेल.

【कट ऑफ व्हॅल्यू】

नमुना सकारात्मक मानला जातो जेव्हा: लक्ष्य क्रम Ct≤40, अंतर्गत नियंत्रण जनुक Ct≤40.

【परिणामांचे स्पष्टीकरण】

एकदा गुणवत्ता नियंत्रण पास झाल्यानंतर, वापरकर्त्यांनी HEX/VIC चॅनेलमध्ये प्रत्येक नमुन्यासाठी एम्प्लिफिकेशन वक्र आहे का ते तपासले पाहिजे, जर तेथे असेल आणि Ct≤40 असेल तर, हे सूचित करते की अंतर्गत नियंत्रण जनुक यशस्वीरित्या वाढवले ​​गेले आहे आणि ही विशिष्ट चाचणी वैध आहे.वापरकर्ते फॉलोअप विश्लेषणासाठी पुढे जाऊ शकतात:

3. अंतर्गत नियंत्रण जनुकाचे प्रवर्धन अयशस्वी झालेल्या नमुन्यांसाठी (HEX/VIC

चॅनेल, Ct＞40,किंवा कोणतेही प्रवर्धन वक्र नाही), कमी व्हायरल लोड किंवा पीसीआर इनहिबिटरचे अस्तित्व हे अयशस्वी होण्याचे कारण असू शकते, नमुना संकलनातून तपासणीची पुनरावृत्ती करावी;

4.सकारात्मक नमुने आणि सुसंस्कृत व्हायरससाठी, अंतर्गत नियंत्रणाचे परिणाम प्रभावित होत नाहीत;

नकारात्मक चाचणी केलेल्या नमुन्यांसाठी, अंतर्गत नियंत्रणाची सकारात्मक चाचणी करणे आवश्यक आहे अन्यथा एकंदर निकाल अवैध आहे आणि नमुना संकलनाच्या चरणापासून सुरू होणारी परीक्षा पुनरावृत्ती करणे आवश्यक आहे.