മങ്കിപോക്സ് വൈറസ് (MPV) ന്യൂക്ലിക് ആസിഡ് ഡിറ്റക്ഷൻ കിറ്റ്

ഇനിപ്പറയുന്ന ഘടകങ്ങൾ ഉൾപ്പെടെ 48 ടെസ്റ്റുകൾ അല്ലെങ്കിൽ ഗുണനിലവാര നിയന്ത്രണം പ്രോസസ്സ് ചെയ്യുന്നതിനുള്ള റിയാഗൻ്റുകൾ കിറ്റിൽ അടങ്ങിയിരിക്കുന്നു:

റീജൻ്റ് എ

റീജൻ്റ്B

ശ്രദ്ധിക്കുക: വ്യത്യസ്‌ത ബാച്ച് നമ്പറുകളുടെ ഘടകങ്ങൾ പരസ്പരം മാറ്റി ഉപയോഗിക്കാനാവില്ല

【സംഭരണ ​​വ്യവസ്ഥകളും ഷെൽഫ് ജീവിതവും】

1. റീജൻ്റ് എ/ബി 2-30 ഡിഗ്രി സെൽഷ്യസിൽ സൂക്ഷിക്കാം, ഷെൽഫ് ആയുസ്സ് 10 മാസമാണ്.

2. നിങ്ങൾ ടെസ്റ്റിന് തയ്യാറാകുമ്പോൾ മാത്രം ടെസ്റ്റ് ട്യൂബ് കവർ തുറക്കുക.

3.കാലഹരണ തീയതിക്ക് അപ്പുറം ടെസ്റ്റ് ട്യൂബുകൾ ഉപയോഗിക്കരുത്.

4. ചോർച്ച കണ്ടെത്തൽ ട്യൂബ് ഉപയോഗിക്കരുത്.

【ബാധകമായ ഉപകരണം】

LC480 PCR വിശകലന സംവിധാനം, Gentier 48E ഓട്ടോമാറ്റിക് PCR വിശകലന സംവിധാനം, ABI7500 PCR വിശകലന സംവിധാനം എന്നിവയ്ക്ക് അനുയോജ്യം.

【സാമ്പിൾ ആവശ്യകതകൾ】

1. ബാധകമായ സാമ്പിൾ തരങ്ങൾ: തൊണ്ടയിലെ സ്വാബ് സാമ്പിളുകൾ.

2. സാമ്പിൾ പരിഹാരം:പരിശോധിച്ചുറപ്പിച്ചതിന് ശേഷം, സാമ്പിൾ ശേഖരണത്തിനായി ഹാങ്‌സൗ ടെസ്റ്റ്‌സി ബയോളജി നിർമ്മിച്ച സാധാരണ സലൈൻ അല്ലെങ്കിൽ വൈറസ് സംരക്ഷണ ട്യൂബ് ഉപയോഗിക്കാൻ ശുപാർശ ചെയ്യുന്നു.

തൊണ്ടയിലെ സ്വാബ്:ഡിസ്പോസിബിൾ അണുവിമുക്തമായ സാംപ്ലിംഗ് സ്വാബ് ഉപയോഗിച്ച് ഉഭയകക്ഷി തൊണ്ടയിലെ ടോൺസിലുകളും പിൻഭാഗത്തെ തൊണ്ടയിലെ ഭിത്തിയും തുടയ്ക്കുക, 3mL സാമ്പിൾ ലായനി അടങ്ങിയ ട്യൂബിലേക്ക് സ്വാബ് മുക്കുക, വാൽ ഉപേക്ഷിക്കുക, ട്യൂബ് കവർ ശക്തമാക്കുക.

3.സാമ്പിൾ സംഭരണവും വിതരണവും:പരിശോധിക്കേണ്ട സാമ്പിളുകൾ എത്രയും വേഗം പരിശോധിക്കണം.ഗതാഗത താപനില 2~8℃ ആയി സൂക്ഷിക്കണം. 24 മണിക്കൂറിനുള്ളിൽ പരിശോധിക്കാൻ കഴിയുന്ന സാമ്പിളുകൾ 2℃~8℃-ൽ സൂക്ഷിക്കാം, 24 മണിക്കൂറിനുള്ളിൽ സാമ്പിളുകൾ പരിശോധിക്കാൻ കഴിയുന്നില്ലെങ്കിൽ, അത് അതിൽ കുറവോ തുല്യമോ ആയി സൂക്ഷിക്കണം. -70℃ വരെ (-70℃ സ്റ്റോറേജ് അവസ്ഥ ഇല്ലെങ്കിൽ, അത് താൽക്കാലികമായി -20℃ ൽ സംഭരിക്കാം), ആവർത്തിക്കുന്നത് ഒഴിവാക്കുക

മരവിപ്പിക്കലും ഉരുകലും.

4. ശരിയായ സാമ്പിൾ ശേഖരണം, സംഭരണം, ഗതാഗതം എന്നിവ ഈ ഉൽപ്പന്നത്തിൻ്റെ പ്രകടനത്തിന് നിർണായകമാണ്.

【ടെസ്റ്റിംഗ് രീതി】

1.സാമ്പിൾ പ്രോസസ്സിംഗും സാമ്പിൾ കൂട്ടിച്ചേർക്കലും

1.1 സാമ്പിൾ പ്രോസസ്സിംഗ്

മേൽപ്പറഞ്ഞ സാമ്പിൾ ലായനി സാമ്പിളുകളുമായി കലർത്തിയ ശേഷം, സാമ്പിളിൻ്റെ 30μL ഡിഎൻഎ റിലീസ് റീജൻ്റ് ട്യൂബിലേക്ക് എടുത്ത് തുല്യമായി കലർത്തുക.

1.2 ലോഡ് ചെയ്യുന്നു

20μL റീകോൺസ്റ്റിറ്റ്യൂഷൻ റീജൻ്റ് എടുത്ത് MPV ഡിറ്റക്ഷൻ റിയാജൻ്റിലേക്ക് ചേർക്കുക, മുകളിൽ പ്രോസസ്സ് ചെയ്ത സാമ്പിളിൻ്റെ 5μL ചേർക്കുക (പോസിറ്റീവ് കൺട്രോളും നെഗറ്റീവ് കൺട്രോളും സാമ്പിളുകൾക്ക് സമാന്തരമായി പ്രോസസ്സ് ചെയ്യും), ട്യൂബ് തൊപ്പി മൂടുക, 2000rpm-ൽ 10-ന് സെൻട്രിഫ്യൂജ് ചെയ്യുക. സെക്കൻ്റുകൾ.

2. പിസിആർ ആംപ്ലിഫിക്കേഷൻ

2.1 ഫ്ലൂറസെൻസ് PCR ഉപകരണത്തിലേക്ക് തയ്യാറാക്കിയ PCR പ്ലേറ്റ്/ട്യൂബുകൾ ലോഡ് ചെയ്യുക, ഓരോ ടെസ്റ്റിനും നെഗറ്റീവ് നിയന്ത്രണവും പോസിറ്റീവ് നിയന്ത്രണവും സജ്ജീകരിക്കും.

2.2 ഫ്ലൂറസെൻ്റ് ചാനൽ ക്രമീകരണം:

1)എംപിവി കണ്ടെത്തലിനായി FAM ചാനൽ തിരഞ്ഞെടുക്കുക

2)ആന്തരിക നിയന്ത്രണ ജീൻ കണ്ടെത്തലിനായി HEX/VIC ചാനൽ തിരഞ്ഞെടുക്കുക

3. ഫലങ്ങളുടെ വിശകലനം

നെഗറ്റീവ് കൺട്രോളിൻ്റെ ഫ്ലൂറസൻ്റ് കർവിൻ്റെ ഏറ്റവും ഉയർന്ന പോയിൻ്റിന് മുകളിൽ അടിസ്ഥാന രേഖ സജ്ജമാക്കുക.

4. ഗുണനിലവാര നിയന്ത്രണം

4.1 നെഗറ്റീവ് നിയന്ത്രണം: FAM,HEX/VIC ചാനലിൽ Ct മൂല്യമൊന്നും കണ്ടെത്തിയില്ല, അല്ലെങ്കിൽ Ct＞40;

4.2 പോസിറ്റീവ് നിയന്ത്രണം: FAM, HEX/VIC ചാനലിൽ, Ct≤40;

4.3 മേൽപ്പറഞ്ഞ ആവശ്യകതകൾ അതേ പരീക്ഷണത്തിൽ തൃപ്‌തിപ്പെടുത്തണം, അല്ലാത്തപക്ഷം പരിശോധനാ ഫലങ്ങൾ അസാധുവാകുകയും പരീക്ഷണം ആവർത്തിക്കുകയും വേണം.

【മൂല്യം മുറിക്കുക】

ഒരു സാമ്പിൾ പോസിറ്റീവ് ആയി കണക്കാക്കുമ്പോൾ: ടാർഗെറ്റ് സീക്വൻസ് Ct≤40, ആന്തരിക നിയന്ത്രണ ജീൻ Ct≤40.

【ഫലങ്ങളുടെ വ്യാഖ്യാനം】

ഗുണനിലവാര നിയന്ത്രണം പാസായിക്കഴിഞ്ഞാൽ, ഉപയോക്താക്കൾ HEX/VIC ചാനലിലെ ഓരോ സാമ്പിളിനും ഒരു ആംപ്ലിഫിക്കേഷൻ കർവ് ഉണ്ടോ എന്ന് പരിശോധിക്കണം, Ct≤40 ഉണ്ടെങ്കിൽ, ആന്തരിക നിയന്ത്രണ ജീൻ വിജയകരമായി വർദ്ധിപ്പിച്ചതായും ഈ പ്രത്യേക പരിശോധന സാധുതയുള്ളതാണെന്നും ഇത് സൂചിപ്പിക്കുന്നു.ഉപയോക്താക്കൾക്ക് തുടർന്നുള്ള വിശകലനത്തിലേക്ക് പോകാം:

3.ആന്തരിക നിയന്ത്രണ ജീനിൻ്റെ ആംപ്ലിഫിക്കേഷൻ ഉള്ള സാമ്പിളുകൾക്കായി പരാജയപ്പെട്ടു (HEX/VIC

ചാനൽ, Ct＞40, അല്ലെങ്കിൽ ആംപ്ലിഫിക്കേഷൻ കർവ് ഇല്ല), കുറഞ്ഞ വൈറൽ ലോഡോ PCR ഇൻഹിബിറ്ററിൻ്റെ അസ്തിത്വമോ പരാജയത്തിന് കാരണമാകാം, സാമ്പിൾ ശേഖരണത്തിൽ നിന്ന് പരിശോധന ആവർത്തിക്കണം;

4. പോസിറ്റീവ് സാമ്പിളുകൾക്കും സംസ്ക്കരിച്ച വൈറസിനും, ആന്തരിക നിയന്ത്രണത്തിൻ്റെ ഫലങ്ങൾ ബാധിക്കില്ല;

സാമ്പിളുകൾ നെഗറ്റീവ് ആയി പരിശോധിച്ചാൽ, ആന്തരിക നിയന്ത്രണം പോസിറ്റീവ് ആണെന്ന് പരിശോധിക്കേണ്ടതുണ്ട്, അല്ലാത്തപക്ഷം മൊത്തത്തിലുള്ള ഫലം അസാധുവാണ്, കൂടാതെ സാമ്പിൾ ശേഖരണ ഘട്ടം മുതൽ പരീക്ഷ ആവർത്തിക്കേണ്ടതുണ്ട്.