Sarotra-CoV-2 Neutralizing Antibody Detection Kit (ELISA)
【TORO LALAN'NY】
Ny Kit Detection Antibody Neutralizing SARS-CoV-2 dia mifototra amin'ny fomba fiasa ELISA mifaninana.
Mampiasa domaine binding receptor voadio (RBD), proteinina avy amin'ny proteinina spike viral (S) ary ny sela mpampiantrano
receptor ACE2, ity fitsapana ity dia natao hanahaka ny fifandraisana tsy miandany amin'ny viriosy.
Ny calibrators, ny fanaraha-maso ny kalitao, ary ny santionan'ny serum na plasma dia mifangaro tsara amin'ny dilution
buffer misy conjugate hACE2-HRP nalaina tao anaty fantsona kely.Avy eo dia afindra ao ny fangaro
ny lavadrano microplate misy sombin-tsofina SARS-CoV-2 RBD tsy mihetsika (RBD) ho an'ny
incubation.Nandritra ny incubation 30 minitra, ny antibody manokana RBD ao amin'ny calibrators, QC ary
Ny santionany dia hifaninana amin'ny hACE2-HRP amin'ny famatorana manokana ny RBD tsy mihetsika ao anaty lavadrano.rehefa
ny incubation dia sasana in-4 ny fantsakana mba hanesorana ny conjugate hACE2-HRP tsy mifatotra.Vahaolana ny
TMB dia ampiana sy incubation mandritra ny 20 minitra amin'ny mari-pana amin'ny efitrano, ka miteraka a
loko manga.Atsahatra ny fivoaran'ny loko miaraka amin'ny 1N HCl, ary ny absorbance dia
refesina amin'ny spectrophotometric amin'ny 450 nm.Ny hamafin'ny loko miforona dia mifandanja amin'ny
ny habetsahan'ny anzima misy, ary mifamatotra amin'ny habetsahan'ny fenitra notsapaina tamin'ny fomba mitovy.
Amin'ny alàlan'ny fampitahana amin'ny curve calibration noforonin'ny calibrators nomena, ny fifantohana amin'ny
kajy avy eo ny antibody neutralizing ao amin'ny santionany tsy fantatra.
【ILAINA NY FITAOVANA FA TSY OMENA】
1. Rano voadio na deionized
2. Pipetta mazava tsara: 10μL, 100μL, 200μL ary 1 mL
3. Torohevitra pipette azo ampiasaina
4. Microplate mpamaky mahay mamaky absorbance amin'ny 450nm.
5. Taratasy mitroka
6. Taratasy grafofaonina
7. Vortex mixer na mitovy aminy
【FANONTANIANA SY FITORIANA SPECIMEN】
1. Ny santionan'ny serum sy Plasma voaangona ao anaty fantsona misy K2-EDTA dia azo ampiasaina amin'ity kitapo ity.
2. Ny santionany dia tokony hafenina ary azo tehirizina hatramin'ny 48 ora amin'ny 2 °C - 8 °C alohan'ny hanaovana fitiliana.
Ny santionany voatazona mandritra ny fotoana lava kokoa (hatramin'ny 6 volana) dia tokony hatsipy indray mandeha monja amin'ny -20 ° C alohan'ny hanaovana fitiliana.
Halaviro ny tsingerina fampangatsiahana miverimberina.
fifanarahana
【Fiomanana Reagent】
1. Ny reagents rehetra dia tsy maintsy esorina ao anaty vata fampangatsiahana ary avela hiverina amin'ny mari-pana alohan'ny fampiasana
(20° hatramin’ny 25°C).Tehirizo ao anaty vata fampangatsiahana ny reagents rehetra aorian'ny fampiasana azy.
2. Ny santionany sy ny fanaraha-maso rehetra dia tokony ho vortex alohan'ny fampiasana.
3. Fiomanana vahaolana hACE2-HRP: Esory ny fifantohana hACE2-HRP amin'ny tahan'ny dilution 1: 51 miaraka amin'ny Dilution
Buffer.Ohatra, levona 100 μL ny hACE2-HRP concentrate miaraka amin'ny 5.0mL ny HRP Dilution Buffer ho
manaova vahaolana hACE2-HRP.
4. 1× Fanasana Vahaolana Fanomanana: Atsobohy amin'ny rano deionized na distillé ny vahaolana 20×
tahan'ny volume 1:19.Ohatra, levona 20 mL of 20× Wash Solution miaraka amin'ny 380 mL deionized na
rano voadio mba hanaovana 400 mL amin'ny 1× Vahaolana.
【Fomba fitsapana】
1. Amin'ny fantsona misaraka, aliquot 120μL ny vahaolana hACE2-HRP voaomana.
2. Ampio calibrators 6 μL, santionany tsy fantatra, fanaraha-maso ny kalitao isaky ny fantsona ary afangaro tsara.
3. Afindrao 100μL ny fangaro tsirairay voaomana amin'ny dingana 2 ho any amin'ny lavadrano microplate mifanaraka amin'izany.
ho an'ny fanahafana fitsapana efa nomanina.
3. Sarony amin'ny Plate Sealer ny lovia ary atsofoka amin'ny 37°C mandritra ny 30 minitra.
4. Esory ny tombo-kase Plate ary sasao amin'ny 300 μL eo ho eo amin'ny Vahaolana 1 × Wash isaky ny lavadrano inefatra ny takelaka.
5. Apetaho amin'ny lamba famaohana ny takelaka mba hanesorana ny sisa tavela amin'ny fantsakana aorian'ny fanasana.
6. Ampio 100 μL TMB Solution ny lavadrano tsirairay ary atsipazo ao anaty maizina ny takelaka amin'ny 20 - 25 ° C mandritra ny 20 minitra.
7. Ampio 50 μL Stop Solution ny fantsakana tsirairay mba hampitsaharana ny fanehoan-kevitra.
8. Vakio ny absorbance ao amin'ny microplate mpamaky amin'ny 450 nm ao anatin'ny 10 minitra (630nm toy ny accessory dia
soso-kevitra ho an'ny fampandehanana mazava tsara kokoa).
