Beždžionių raupų viruso (MPV) nukleorūgščių aptikimo rinkinys

Rinkinyje yra reagentai, skirti apdoroti 48 bandymus arba kokybės kontrolei, įskaitant šiuos komponentus:

Reagentas A

ReagentasB

Pastaba: skirtingų partijų numerių komponentai negali būti naudojami pakaitomis

【Laikymo sąlygos ir tinkamumo laikas】

1.Reagentas A/B gali būti laikomas 2–30°C temperatūroje, o tinkamumo laikas – 10 mėnesių.

2. Mėgintuvėlio dangtelį atidarykite tik tada, kai būsite pasiruošę tyrimui.

3. Nenaudokite mėgintuvėlių pasibaigus tinkamumo laikui.

4. Nenaudokite nuotėkio aptikimo vamzdelio.

【Taikoma priemonė】

Tinka LC480 PGR analizės sistemai, Gentier 48E automatinei PGR analizės sistemai, ABI7500 PGR analizės sistemai.

【Pavyzdiniai reikalavimai】

1. Taikomi pavyzdžių tipai: gerklės tepinėlių mėginiai.

2. Mėginių ėmimo tirpalas:Atlikus patikrinimą, mėginiams paimti rekomenduojama naudoti įprastą fiziologinį tirpalą arba virusų išsaugojimo mėgintuvėlį, pagamintą Hangzhou Testsea biology.

gerklės tepinėlis:nuvalykite dvišales ryklės tonziles ir užpakalinę ryklės sienelę vienkartiniu steriliu mėginių ėmimo tamponu, panardinkite tamponą į mėgintuvėlį, kuriame yra 3 ml mėginių ėmimo tirpalo, išmeskite uodegą ir priveržkite mėgintuvėlio dangtelį.

3. Mėginių saugojimas ir pristatymas:Mėginiai, kuriuos reikia ištirti, turėtų būti ištirti kuo greičiau.Transportavimo temperatūra turi būti palaikoma 2–8 ℃. Mėginiai, kuriuos galima ištirti per 24 valandas, gali būti laikomi 2 ℃–8 ℃ temperatūroje, o jei mėginių negalima ištirti per 24 valandas, jie turėtų būti laikomi žemesnėje arba lygioje temperatūroje. iki -70 ℃ (jei nėra -70 ℃ laikymo sąlygos, laikinai galima laikyti -20 ℃), venkite kartoti

užšaldymas ir atšildymas.

4. Tinkamas mėginių paėmimas, saugojimas ir transportavimas yra labai svarbūs šio gaminio veikimui.

【Bandymo metodas】

1. Mėginio apdorojimas ir mėginio pridėjimas

1.1 Mėginio apdorojimas

Sumaišę minėtą mėginių ėmimo tirpalą su mėginiais, paimkite 30 μL mėginio į DNR atpalaiduojančio reagento mėgintuvėlį ir tolygiai išmaišykite.

1.2 Pakrovimas

Paimkite 20 μL atkūrimo reagento ir įpilkite į MPV aptikimo reagentą, įpilkite 5 μL anksčiau apdoroto mėginio (teigiamas ir neigiamas kontrolė turi būti apdorojami lygiagrečiai su mėginiais), uždenkite mėgintuvėlio dangtelį, centrifuguokite 2000 aps./min 10 sekundžių.

2. PGR amplifikacija

2.1. Įdėkite paruoštą PGR plokštelę / mėgintuvėlius į fluorescencinį PGR prietaisą. Kiekvienam bandymui turi būti nustatyta neigiama ir teigiama kontrolė.

2.2 Fluorescencinio kanalo nustatymas:

1) Pasirinkite FAM kanalą MPV aptikimui；

2) Vidinės kontrolės genų aptikimui pasirinkite HEX / VIC kanalą；

3.Rezultatų analizė

Nustatykite bazinę liniją virš aukščiausio neigiamos kontrolės fluorescencinės kreivės taško.

4.Kokybės kontrolė

4.1 Neigiama kontrolė: FAM, HEX/VIC kanale arba Ct＞40 Ct vertės neaptikta；

4.2 Teigiamas valdymas: FAM, HEX/VIC kanale, Ct≤40；

4.3 Aukščiau nurodyti reikalavimai turi būti įvykdyti atliekant tą patį eksperimentą, kitaip bandymo rezultatai yra neteisingi ir eksperimentą reikia kartoti.

【Nupjauta vertė】

Mėginys laikomas teigiamu, kai: Tikslinė seka Ct≤40, Vidinės kontrolės genas Ct≤40.

【Rezultatų interpretacija】

Pasibaigus kokybės kontrolei, vartotojai turėtų patikrinti, ar kiekvienam mėginiui HEX/VIC kanale yra amplifikacijos kreivė, jei yra, o kai Ct≤40, tai rodo, kad vidinis kontrolės genas sėkmingai amplifikuotas ir šis konkretus testas yra tinkamas.Vartotojai gali tęsti tolesnę analizę:

3. Mėginiams su vidinės kontrolės geno amplifikacija nepavyko (HEX/VIC

kanalas, Ct＞40 arba nėra amplifikacijos kreivės), mažas viruso kiekis arba PGR inhibitorių buvimas gali būti nesėkmės priežastis, tyrimas turėtų būti kartojamas iš mėginių paėmimo;

4.Teigiamiems mėginiams ir auginamam virusui vidaus kontrolės rezultatai įtakos neturi;

Jei mėginiai buvo neigiami, vidinė kontrolė turi būti teigiama, kitaip bendras rezultatas yra neteisingas ir tyrimą reikia pakartoti, pradedant nuo mėginių paėmimo etapo.