ຊຸດກວດຫາ Antibody Neutralizing SARS-CoV-2 (ELISA)

【ຕັ້ງໃຈໃຊ້】

SARS-CoV-2 Neutralizing Antibody Detection Kit is Competitive Enzyme-Linked Immunosorbent Assay (ELISA) ມີຈຸດປະສົງເພື່ອກວດຫາຄຸນນະພາບ ແລະເຄິ່ງປະລິມານຂອງພູມຕ້ານທານທີ່ເປັນກາງທັງໝົດຕໍ່ກັບ SARS-CoV-2 ໃນເຊລັມ ແລະ plasma ຂອງມະນຸດ. ຊຸດກວດຫາ Antibody Neutralizing SARS- CoV-2 ສາມາດຖືກນໍາໃຊ້ເປັນຕົວຊ່ວຍໃນການກໍານົດບຸກຄົນທີ່ມີການຕອບສະຫນອງພູມຕ້ານທານທີ່ປັບຕົວກັບ SARS- CoV-2, ຊີ້ໃຫ້ເຫັນເຖິງການຕິດເຊື້ອທີ່ຜ່ານມາຫຼືກ່ອນຫນ້າ. ບໍ່ຄວນໃຊ້ຊຸດກວດຫາພູມຕ້ານທານທີ່ເປັນກາງຂອງ SARS-CoV-2 ເພື່ອກວດຫາການຕິດເຊື້ອ SARS-CoV-2 ແບບສ້ວຍແຫຼມ.

【ແນະນຳ】

ການຕິດເຊື້ອ Coronavirus ໂດຍປົກກະຕິເຮັດໃຫ້ເກີດການຕອບໂຕ້ຂອງພູມຕ້ານທານ neutralizing. ອັດຕາການປ່ຽນແປງໃນຄົນເຈັບ COVID-19 ແມ່ນ 50% ແລະ 100% ໃນມື້ 7 ແລະ 14 ອາການຫຼັງເລີ່ມຕົ້ນ, ຕາມລໍາດັບ. ເພື່ອນໍາສະເຫນີຄວາມຮູ້, ເຊື້ອໄວຣັສທີ່ສອດຄ້ອງກັນ neutralizing antibody ໃນເລືອດແມ່ນໄດ້ຮັບການຍອມຮັບວ່າເປັນເປົ້າຫມາຍສໍາລັບການກໍານົດປະສິດທິພາບຂອງພູມຕ້ານທານແລະຄວາມເຂັ້ມຂົ້ນທີ່ສູງຂຶ້ນຂອງ antibody ເປັນກາງຊີ້ໃຫ້ເຫັນເຖິງປະສິດທິພາບການປ້ອງກັນທີ່ສູງຂຶ້ນ. ການທົດສອບການຫຼຸດຜ່ອນ Plaque Neutralization Test (PRNT) ໄດ້ຖືກຮັບຮູ້ວ່າເປັນມາດຕະຖານທອງສໍາລັບການກວດສອບພູມຕ້ານທານທີ່ເປັນກາງ. ຢ່າງໃດກໍ່ຕາມ, ເນື່ອງຈາກການສົ່ງຜ່ານຕ່ໍາແລະຄວາມຕ້ອງການທີ່ສູງຂຶ້ນສໍາລັບການປະຕິບັດງານ, PRNT ແມ່ນບໍ່ສາມາດໃຊ້ໄດ້ສໍາລັບການວິນິດໄສ serodiagnosis ຂະຫນາດໃຫຍ່ແລະການປະເມີນວັກຊີນ. ຊຸດກວດຫາ Antibody Neutralizing SARS-CoV-2 ແມ່ນອີງໃສ່ວິທີການ Competitive Enzyme-Linked Immunosorbent Assay (ELISA), ເຊິ່ງສາມາດກວດຫາພູມຕ້ານທານທີ່ເປັນກາງໃນຕົວຢ່າງເລືອດ ພ້ອມທັງເຂົ້າເຖິງລະດັບຄວາມເຂັ້ມຂົ້ນຂອງພູມຕ້ານທານຊະນິດນີ້ໂດຍສະເພາະ.

 【ຂັ້ນຕອນການທົດສອບ】

1.In ທໍ່ແຍກຕ່າງຫາກ, aliquot 120μLຂອງການແກ້ໄຂ hACE2-HRP ກະກຽມ.

2. ຕື່ມ 6 μLຂອງ calibrators, ຕົວຢ່າງທີ່ບໍ່ຮູ້ຈັກ, ການຄວບຄຸມຄຸນນະພາບໃນແຕ່ລະທໍ່ແລະປະສົມກັນດີ.

3.Transfer 100μLຂອງແຕ່ລະປະສົມທີ່ກະກຽມໃນຂັ້ນຕອນທີ 2 ເຂົ້າໄປໃນຂຸມ microplate ທີ່ສອດຄ້ອງກັນຕາມການຕັ້ງຄ່າການທົດສອບທີ່ໄດ້ກໍານົດໄວ້ລ່ວງຫນ້າ.

3. ກວມເອົາແຜ່ນດ້ວຍ Plate Sealer ແລະ incubate ຢູ່ທີ່ 37 ° C ເປັນເວລາ 60 ນາທີ.

4. ເອົາ Plate Sealer ແລະລ້າງຈານດ້ວຍນ້ໍາປະມານ 300 μLຂອງ 1 × Wash Solution ຕໍ່ນ້ໍາດີສໍາລັບສີ່ຄັ້ງ.

5. ແຕະແຜ່ນໃສ່ຜ້າເຊັດເຈ້ຍເພື່ອເອົາຂອງແຫຼວທີ່ຕົກຄ້າງຢູ່ໃນນໍ້າສ້າງຫຼັງຈາກຂັ້ນຕອນການລ້າງ.

6. ຕື່ມ 100 μLຂອງ TMB Solution ໃສ່ແຕ່ລະຂຸມແລະ incubate ແຜ່ນໃນຄວາມມືດຢູ່ທີ່ 20 – 25 ° C ສໍາລັບ 20 ນາທີ.

7. ຕື່ມ 50 μLຂອງ Stop Solution ໃສ່ແຕ່ລະດີເພື່ອຢຸດຕິກິຣິຍາ.

8.Read ການດູດຊຶມໃນ microplate reader ຢູ່ 450 nm ພາຍໃນ 10 ນາທີ (630nm ເປັນອຸປະກອນເສີມແມ່ນແນະນໍາສໍາລັບການປະຕິບັດຄວາມແມ່ນຍໍາສູງ.