SARS-CoV-2 Neutralizing Antibody Detection Kit (ELISA)
.PRINCIPIUM.
Sars-CoV-2 Antibody Detection Ornamentum Neutralizing nititur methodologia competitive ELISA.
Receptator purgatus ligans domain (RBD), interdum e spica viralis (S) interdum et cellae hostiae
receptor ACE2, haec probatio ad imitandum virum-hospes neutralis commercium destinatur.
Calibratores, Qualitas Imperium, ac serum vel plasma exempla singula bene mixta sunt in dilutione
quiddam continens hACE2-HRP aliquotatum in tubulis parvis conjugatis. Deinde mixturae transferuntur in
microplate cisternas quae immobiles recombinantes SARS-CoV-2 RBD fragmentum (RBD) for
incubatio. Durante incubatione 30-minute, RBD anticorpus specificum in calibratoribus, QC et
exempla cum hACE2-HRP certabunt pro RBD immobiliter in puteis ligandis specificis. Post
incubatione, puteis lotis 4 temporibus ad solvendum non solutum hACE2-HRP conjugatum. Solutio
TMB deinde additur et incubatur per 20 minuta ad cella temperies, inde in evolutione a .
caeruleum colorem. Color progressionis sistitur addito 1N HCl, et absorbance est
metiri spectrophotometrically ad 450 nm. Intensio coloris formati proportionalis est
quantitatem enzyme presentis, et inverse precedente quantitatem signorum eodem modo.
Per comparationem ad curvam calibrationem a calibratoribus cautis formatam, detentio
elementorum in ignoto exemplo corrumpendo tunc computatur.
.MATERIALS REQUISITIS NEQUE DUM.
1. decocta vel deionized aqua
2. praecisio fistularum: 10μL, 100μL,200μL et 1 mL
3. Disposable pipette tips
4. Microplate lector capax lectionis absorbance in 450nm.
5. chartam absorbent
6. Aliquam lacinia purus paper
7. Vortex turpis vel aequipollens
.COLLECTIONES SPECIMEN ET PRAECLUSIO.
1. Serum et Plasma exempla in tubulis quae K2-EDTA collecta sunt ad hoc ornamentum adhiberi possunt.
2. Specimina piniferantur et recondantur usque ad 48 horas ante 2°C-8°C prior ad pervestigandum.
Specimina longiori tempore habita (usque ad 6 menses) semel tantum in -20 °C constringantur priora ut de- prehendantur.
Saepe duratus- CALEFACTO cycles vitare.
COMMENTARIUM
.Praeparatio reagens.
1. Omnes regentes ex refrigeratione sumi debent et ad cella temperies ante usum redire permittuntur
(20° ad 25°C). Serva omnes regentes in armario prompte post usum.
2. Omnia exemplaria ac potestates ante usum vortentur.
3. hACE2-HRP Solutio Praeparatio: Dilutire hACE2-HRP incumbo ad 1:51 rationem dilutionis cum Dilutione.
Quiddam. Exempli gratia, 100 μL extenuant hACE2-HRP cum 5.0mL of HRP Dilutionis Buffer ad
hACE2-HRP solutionem faciunt.
4. 1× Solutio Lava Praeparatio: Diluto 20× Solutio lava cum deionata vel decocta cum aqua
vo- tio 1,19. Exempli gratia, dilutum 20 mL 20× Lava Solutio cum 380 mL de deionizato vel
Aquae destillatae ad 400 mL de 1° Lava Solutio.
.Test De modo procedendi.
1. In tubis separatis, aliquot 120μL praeparatorum hACE2-HRP Solutio.
2. Adde 6 µL calibratorum, exempla incognita, qualitates moderantes in unaquaque tubo bene miscere.
3. Translatio 100μL uniuscuiusque mixtionis in gradu 2 praeparato in puteos microplatis respondentes secundum
configuratione test ad praedestinatum.
3. Tege laminam cum Plate Sigillo et incubant 37°C pro 30 minutis.
4. Tabulam Obsignatorem remove et laminam cum circiter 300 μL 1× lava et quater per bene solutionem lava.
5. Tap laminam in charta linteum ad tollendas residuas liquores in puteis lotis gradibus.
6. Adde 100 μL of TMB Solutio cuilibet bene et incubare bracteae in obscuro 20-25°C pro 20 minutis.
7. Adde 50 μL Solutio unicuique bene ad obsistendum in reactione.
8. Read absorbance in microplate lector ad CDL nm intra X minuta (630nm sicut accessorium est
commendatur ad altiorem execucionem perficiendam).