Kîta Vedîtina Asîda Nukleîk Vîrûsa Monkeypoxê (MPV).

Kit ji bo 48 ceribandin an kontrolkirina kalîteyê reagentan vedihewîne, di nav de pêkhateyên jêrîn:

Reagent A

ReagentB

Nîşe: Pêkhateyên jimareyên cûda yên berhevokê bi hev re nayên bikar anîn

【Mercên hilanînê û Jiyana Refê】

1.Reagent A/B dikare di 2-30°C de were hilanîn, û heyama rafê 10 meh e.

2.Ji kerema xwe gava ku hûn ji bo ceribandinê amade ne, qapaxa lûleya ceribandinê vekin.

3.Topên îmtîhanê ji dema derbasbûnê wêdetir bikar neynin.

4.Tubeya vedîtina rijandinê bikar neynin.

【Applicable Instrument】

Minasib ji bo Pergala analîzê ya LC480 PCR, Pergala analîzkirina PCR-ya Otomatîk Gentier 48E, pergala analîzkirina PCR ya ABI7500 maqûl e.

【Sample Requirements】

1.Cûreyên nimûne yên Applicable: Nimûneyên şûşeyên qirikê.

2.Sampling çareseriya:Piştî verastkirinê, tê pêşniyar kirin ku ji bo berhevkirina nimûneyê, salona normal an boriyek parastina vîrusê ku ji hêla biyolojiya Hangzhou Testsea ve hatî hilberandin bikar bînin.

tama qirikê:Tonsilên farîngeal ên dualî û dîwarê farîngealê yê paşîn bi şûşeya nimûneyê ya sterîl a yekcar paqij bikin, şûşê bixin nav lûleya ku tê de 3 ml çareseriya nimûneyê tê de heye, dûvikê bavêjin, û qapaxa lûlê hişk bikin.

3.Sample hilanîn û radestkirina:Nimûneyên ku bêne ceribandin divê di zûtirîn dem de bêne ceribandin.Germahiya veguhastinê divê di 2~8 ℃ de were girtin. Nimûneyên ku di nav 24 demjimêran de bêne ceribandin dikarin di 2℃~8℃ de bêne hilanîn û heke nimûne di nav 24 demjimêran de neyên ceribandin, divê ew di kêmtir an wekhev de bêne hilanîn. heta -70 ℃ (heke rewşa hilanînê ya -70 ℃ tune be, dikare li -20 ℃ demkî were hilanîn), dubare nebin

cemidandin û helandin.

4. Komkirina nimûneyên rast, hilanîn û veguheztin ji bo performansa vê hilberê pir girîng in.

【Rêbaza ceribandinê】

1.Pêvajoya nimûne û zêdekirina nimûne

1.1 Pêvajoya nimûne

Piştî ku çareseriya nimûneya jorîn bi nimûneyan re tevlihev bikin, 30 μL ji nimûneyê têxin nav lûleya reagentê ya berdana DNA-yê û bi rengek wekhev tevlihev bikin.

1.2 Barkirin

20 μL ji reagenta vejenê hildin û têxin reagenta tespîtkirina MPV, 5 μL ji nimûneya hilberandî ya jorîn lê zêde bikin (kontrola erênî û negatîv bi nimûneyan re paralel were hilanîn), kapa boriyê bigire, wê di 2000 rpm de 10 santrîfuj bike. seconds.

2. Amplification PCR

2.1 Plate/boriyên PCR-ê yên amadekirî li amûra PCR-ya floransansê bar bikin, ji bo her ceribandinê kontrola neyînî û kontrola erênî bêne danîn.

2.2 Mîhengkirina kanala fluorescent:

1) Ji bo tespîtkirina MPV kanala FAM-ê hilbijêrin;

2) Kanala HEX / VIC-ê ji bo tespîtkirina genê ya kontrola navxweyî hilbijêrin.

3.Analîzkirina encamên

Xeta bingehê li jor xala herî bilind a kembera fluorescentê ya kontrola neyînî saz bikin.

4.Kontrolkirina kalîteyê

4.1 Kontrola neyînî: Di kanala FAM, HEX/VIC, an Ct＞40； de nirxa Ct nayê dîtin

4.2 Kontrola erênî: Di kanala FAM, HEX/VIC, Ct≤40；

4.3 Pêdiviyên jorîn divê di heman ceribandinê de bêne bicîh kirin, wekî din encamên testê nederbasdar in û pêdivî ye ku ezmûn were dubare kirin.

【Qîmetê qut kirin】

Nimûneyek wekî erênî tê hesibandin dema ku: Rêzeya armanc Ct≤40, Gena kontrola hundurîn Ct≤40.

【Şirovekirina encaman】

Dema ku kontrolkirina kalîteyê derbas dibe, bikarhêner divê kontrol bikin ka ji bo her nimûneyê di kanala HEX/VIC de kaxezek mezinbûnê heye, heke hebe û bi Ct≤40 re, ew destnîşan kir ku gena kontrola hundurîn bi serfirazî hatî zêdekirin û ev ceribandina taybetî derbasdar e.Bikarhêner dikarin analîza şopandinê bidomînin:

3.Ji bo nimûneyên bi zêdekirina gena kontrola navxweyî têk çûn (HEX/VIC

kanal, Ct (Ct＞40, an bê kêşeya amplification), barkirina vîrusê ya kêm an jî hebûna astengkerê PCR dikare bibe sedema têkçûnê, divê muayene ji berhevkirina nimûneyê were dubare kirin;

4.Ji ​​bo nimûneyên erênî û vîrusê çandî, encamên kontrola navxweyî bandor nakin;

Ji bo nimûneyên ku negatîf hatine ceribandin, pêdivî ye ku kontrola hundurîn erênî were ceribandin, wekî din encama giştî nederbasdar e û pêdivî ye ku muayene were dubare kirin, ji qonaxa berhevkirina nimûneyê dest pê dike.