SARS-CoV-2 ತಟಸ್ಥಗೊಳಿಸುವ ಪ್ರತಿಕಾಯ ಪತ್ತೆ ಕಿಟ್ (ELISA)

【ಉದ್ದೇಶಿತ ಬಳಕೆ】

SARS-CoV-2 ತಟಸ್ಥಗೊಳಿಸುವ ಪ್ರತಿಕಾಯ ಪತ್ತೆ ಕಿಟ್ ಸ್ಪರ್ಧಾತ್ಮಕ ಕಿಣ್ವ-ಸಂಯೋಜಿತ ಇಮ್ಯುನೊಸಾರ್ಬೆಂಟ್ ಅಸ್ಸೇ (ELISA) ಮಾನವ ಸೀರಮ್ ಮತ್ತು ಪ್ಲಾಸ್ಮಾದಲ್ಲಿ SARS-CoV-2 ಗೆ ಒಟ್ಟು ತಟಸ್ಥಗೊಳಿಸುವ ಪ್ರತಿಕಾಯಗಳ ಗುಣಾತ್ಮಕ ಮತ್ತು ಅರೆ-ಪರಿಮಾಣಾತ್ಮಕ ಪತ್ತೆಗಾಗಿ ಉದ್ದೇಶಿಸಲಾಗಿದೆ. SARS- CoV-2 ನ್ಯೂಟ್ರಲೈಸಿಂಗ್ ಆಂಟಿಬಾಡಿ ಡಿಟೆಕ್ಷನ್ ಕಿಟ್ ಅನ್ನು SARS- CoV-2 ಗೆ ಹೊಂದಿಕೊಳ್ಳುವ ಪ್ರತಿರಕ್ಷಣಾ ಪ್ರತಿಕ್ರಿಯೆಯನ್ನು ಹೊಂದಿರುವ ವ್ಯಕ್ತಿಗಳನ್ನು ಗುರುತಿಸಲು ಸಹಾಯವಾಗಿ ಬಳಸಬಹುದು, ಇದು ಇತ್ತೀಚಿನ ಅಥವಾ ಹಿಂದಿನ ಸೋಂಕನ್ನು ಸೂಚಿಸುತ್ತದೆ. ತೀವ್ರವಾದ SARS-CoV-2 ಸೋಂಕನ್ನು ಪತ್ತೆಹಚ್ಚಲು SARS-CoV-2 ನ್ಯೂಟ್ರಲೈಸಿಂಗ್ ಆಂಟಿಬಾಡಿ ಡಿಟೆಕ್ಷನ್ ಕಿಟ್ ಅನ್ನು ಬಳಸಬಾರದು.

【ಪರಿಚಯ】

ಕೊರೊನಾವೈರಸ್ ಸೋಂಕುಗಳು ಸಾಮಾನ್ಯವಾಗಿ ತಟಸ್ಥಗೊಳಿಸುವ ಪ್ರತಿಕಾಯ ಪ್ರತಿಕ್ರಿಯೆಗಳನ್ನು ಪ್ರೇರೇಪಿಸುತ್ತವೆ. COVID-19 ರೋಗಿಗಳಲ್ಲಿ ಸಿರೊಕಾನ್ವರ್ಶನ್ ದರಗಳು ಕ್ರಮವಾಗಿ 50% ಮತ್ತು 100% ದಿನ 7 ಮತ್ತು 14 ನಂತರದ ರೋಗಲಕ್ಷಣದ ಪ್ರಾರಂಭದಲ್ಲಿ. ಜ್ಞಾನವನ್ನು ಪ್ರಸ್ತುತಪಡಿಸಲು, ರಕ್ತದಲ್ಲಿನ ಅನುಗುಣವಾದ ವೈರಸ್ ತಟಸ್ಥಗೊಳಿಸುವ ಪ್ರತಿಕಾಯವು ಪ್ರತಿಕಾಯದ ಪರಿಣಾಮಕಾರಿತ್ವವನ್ನು ನಿರ್ಧರಿಸುವ ಗುರಿಯಾಗಿ ಗುರುತಿಸಲ್ಪಟ್ಟಿದೆ ಮತ್ತು ತಟಸ್ಥಗೊಳಿಸುವ ಪ್ರತಿಕಾಯದ ಹೆಚ್ಚಿನ ಸಾಂದ್ರತೆಯು ಹೆಚ್ಚಿನ ರಕ್ಷಣೆಯ ಪರಿಣಾಮಕಾರಿತ್ವವನ್ನು ಸೂಚಿಸುತ್ತದೆ. ಪ್ಲೇಕ್ ರಿಡಕ್ಷನ್ ನ್ಯೂಟ್ರಾಲೈಸೇಶನ್ ಟೆಸ್ಟ್ (PRNT) ಅನ್ನು ತಟಸ್ಥಗೊಳಿಸುವ ಪ್ರತಿಕಾಯಗಳನ್ನು ಪತ್ತೆಹಚ್ಚಲು ಚಿನ್ನದ ಮಾನದಂಡವೆಂದು ಗುರುತಿಸಲಾಗಿದೆ. ಆದಾಗ್ಯೂ, ಅದರ ಕಡಿಮೆ ಥ್ರೋಪುಟ್ ಮತ್ತು ಕಾರ್ಯಾಚರಣೆಗೆ ಹೆಚ್ಚಿನ ಅಗತ್ಯತೆಯಿಂದಾಗಿ, ದೊಡ್ಡ ಪ್ರಮಾಣದ ಸಿರೊಡಯಾಗ್ನೋಸಿಸ್ ಮತ್ತು ಲಸಿಕೆ ಮೌಲ್ಯಮಾಪನಕ್ಕೆ PRNT ಪ್ರಾಯೋಗಿಕವಾಗಿಲ್ಲ. SARS-CoV-2 ತಟಸ್ಥಗೊಳಿಸುವ ಪ್ರತಿಕಾಯ ಪತ್ತೆ ಕಿಟ್ ಸ್ಪರ್ಧಾತ್ಮಕ ಕಿಣ್ವ-ಲಿಂಕ್ಡ್ ಇಮ್ಯುನೊಸಾರ್ಬೆಂಟ್ ಅಸ್ಸೇ (ELISA) ವಿಧಾನವನ್ನು ಆಧರಿಸಿದೆ, ಇದು ರಕ್ತದ ಮಾದರಿಯಲ್ಲಿ ತಟಸ್ಥಗೊಳಿಸುವ ಪ್ರತಿಕಾಯವನ್ನು ಪತ್ತೆ ಮಾಡುತ್ತದೆ ಮತ್ತು ವಿಶೇಷವಾಗಿ ಈ ರೀತಿಯ ಪ್ರತಿಕಾಯದ ಸಾಂದ್ರತೆಯ ಮಟ್ಟವನ್ನು ಪ್ರವೇಶಿಸುತ್ತದೆ.

 【ಪರೀಕ್ಷಾ ವಿಧಾನ】

1.ಪ್ರತ್ಯೇಕ ಟ್ಯೂಬ್‌ಗಳಲ್ಲಿ, ತಯಾರಾದ hACE2-HRP ಪರಿಹಾರದ 120μL ಆಲ್ಕೋಟ್.

2.ಪ್ರತಿ ಟ್ಯೂಬ್‌ನಲ್ಲಿ 6 μL ಕ್ಯಾಲಿಬ್ರೇಟರ್‌ಗಳು, ಅಜ್ಞಾತ ಮಾದರಿಗಳು, ಗುಣಮಟ್ಟದ ನಿಯಂತ್ರಣಗಳನ್ನು ಸೇರಿಸಿ ಮತ್ತು ಚೆನ್ನಾಗಿ ಮಿಶ್ರಣ ಮಾಡಿ.

3.ಹಂತ 2 ರಲ್ಲಿ ತಯಾರಿಸಲಾದ ಪ್ರತಿ ಮಿಶ್ರಣದ 100μL ಅನ್ನು ಪೂರ್ವನಿಯೋಜಿತ ಪರೀಕ್ಷಾ ಸಂರಚನೆಯ ಪ್ರಕಾರ ಅನುಗುಣವಾದ ಮೈಕ್ರೋಪ್ಲೇಟ್ ಬಾವಿಗಳಿಗೆ ವರ್ಗಾಯಿಸಿ.

3.ಪ್ಲೇಟ್ ಸೀಲರ್ನೊಂದಿಗೆ ಪ್ಲೇಟ್ ಅನ್ನು ಕವರ್ ಮಾಡಿ ಮತ್ತು 37 ° C ನಲ್ಲಿ 60 ನಿಮಿಷಗಳ ಕಾಲ ಕಾವುಕೊಡಿ.

4. ಪ್ಲೇಟ್ ಸೀಲರ್ ಅನ್ನು ತೆಗೆದುಹಾಕಿ ಮತ್ತು ಪ್ರತಿ ಬಾವಿಗೆ ಸರಿಸುಮಾರು 300 μL 1× ವಾಶ್ ಪರಿಹಾರದೊಂದಿಗೆ ಪ್ಲೇಟ್ ಅನ್ನು ನಾಲ್ಕು ಬಾರಿ ತೊಳೆಯಿರಿ.

5. ತೊಳೆಯುವ ಹಂತಗಳ ನಂತರ ಬಾವಿಗಳಲ್ಲಿ ಉಳಿದಿರುವ ದ್ರವವನ್ನು ತೆಗೆದುಹಾಕಲು ಪೇಪರ್ ಟವೆಲ್ ಮೇಲೆ ಪ್ಲೇಟ್ ಅನ್ನು ಟ್ಯಾಪ್ ಮಾಡಿ.

6.ಪ್ರತಿ ಬಾವಿಗೆ 100 μL TMB ಪರಿಹಾರವನ್ನು ಸೇರಿಸಿ ಮತ್ತು 20 ನಿಮಿಷಗಳ ಕಾಲ 20 - 25 ° C ನಲ್ಲಿ ಕತ್ತಲೆಯಲ್ಲಿ ಪ್ಲೇಟ್ ಅನ್ನು ಕಾವುಕೊಡಿ.

7.ಪ್ರತಿಕ್ರಿಯೆಯನ್ನು ನಿಲ್ಲಿಸಲು ಪ್ರತಿ ಬಾವಿಗೆ 50 μL ಸ್ಟಾಪ್ ಪರಿಹಾರವನ್ನು ಸೇರಿಸಿ.

8.ಮೈಕ್ರೊಪ್ಲೇಟ್ ರೀಡರ್‌ನಲ್ಲಿ ಹೀರಿಕೊಳ್ಳುವಿಕೆಯನ್ನು 10 ನಿಮಿಷಗಳಲ್ಲಿ 450 nm ನಲ್ಲಿ ಓದಿ (630nm ಹೆಚ್ಚಿನ ನಿಖರ ಕಾರ್ಯಕ್ಷಮತೆಗಾಗಿ ಪರಿಕರವಾಗಿ ಶಿಫಾರಸು ಮಾಡಲಾಗಿದೆ.